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IBDV抗原表位与VP2组合基因的分子构建及其在昆虫细胞中的表达
引用本文:周宇,王永山,范红结,欧阳伟,唐雨德,王忠灿.IBDV抗原表位与VP2组合基因的分子构建及其在昆虫细胞中的表达[J].中国兽医学报,2010,30(10).
作者姓名:周宇  王永山  范红结  欧阳伟  唐雨德  王忠灿
作者单位:1. 江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏,南京,210014;南京农业大学,动物医学院,江苏,南京,210095
2. 江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏,南京,210014
3. 南京农业大学,动物医学院,江苏,南京,210095
4. 南京军区军事医学研究所,江苏,南京,210002
基金项目:国家自然科学基金,江苏省自然科学基金,江苏省农业科技创新基金项目
摘    要:运用PCR重叠延伸技术将传染性法氏囊病病毒(IBDV)多表位5e与VP2基因连接构建组合基因VP2-5e,将其插入到杆状病毒表达系统供体质粒pFastBac HT中,转化E.coliDH10Bac感受态细胞,经三抗性筛选获得重组杆状病毒表达质粒pBac HT-VP2-5e,用脂质体法转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒vBac HT-VP2-5e。对vBac HT-VP2-5e感染的Sf9细胞,以间接免疫荧光试验(IFA)检测,具有特异性荧光;电镜检查,重组VP2-5e蛋白能够自组装成病毒样颗粒(VLP);用免疫印迹分析(Western-blotting),在59 000处出现一条特异性蛋白条带。本试验为组合基因型重组IBD多价疫苗的研究奠定了基础。

关 键 词:传染性法氏囊病痛毒  VP2基因  抗原表位  组合基因  表达

Construction of the integrated gene of multi-mimotopes and VP2 of infectious bursal disease virus, and its expression in insect cells
ZHOU Yu,WANG Yong-shan,FAN Hong-jie,OUYANG Wei,TANG Yu-de,WANG Zhong-can.Construction of the integrated gene of multi-mimotopes and VP2 of infectious bursal disease virus, and its expression in insect cells[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2010,30(10).
Authors:ZHOU Yu  WANG Yong-shan  FAN Hong-jie  OUYANG Wei  TANG Yu-de  WANG Zhong-can
Abstract:
Keywords:
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