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双重RT-PCR快速检测H7N9流感病毒方法的建立
引用本文:蒋文明,李金平,于美芳,孙文博,王素春,彭程,侯广宇,刘朔,杜翔,于建敏,陈继明.双重RT-PCR快速检测H7N9流感病毒方法的建立[J].中国动物检疫,2015,32(5):65-68.
作者姓名:蒋文明  李金平  于美芳  孙文博  王素春  彭程  侯广宇  刘朔  杜翔  于建敏  陈继明
基金项目:青岛市科技计划14-2-4-105-jch,国家自然基金31200123
摘    要:为建立简便快速检测H7N9亚型流感病毒的方法,根椐GenBank中H7亚型流感病毒的HA基因序列和N9亚型流感病毒的NA基因序列,设计2对特异性引物,在建立H7亚型和N9亚型单项RT-PCR的基础上,优化双重RT-PCR反应条件,建立同时检测H7亚型和N9亚型的双重RT-PCR。对H7N9亚型流感病毒核酸模板进行双重RT-PCR扩增,结果可同时扩增HA基因263bp、NA基因520 bp的特异性片段,而对其他常见亚型的流感病毒的RT-PCR扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明,该双重RT-PCR方法的检测下限为3 pg的H7N9病毒模板。利用该双重RT-PCR方法对30份临床样品进行H7N9病毒进行检测,与病毒分离方法进行对比,结果显示,两者的符合率为100%。结果表明建立的双重RT-PCR检测方法,具有特异、快速、敏感、准确的特点,可用于H7N9流感病毒的同时检测和鉴别诊断,为H7N9亚型流感的有效防控提供技术支撑。

关 键 词:流感病毒  H7N9  双重RT-PCR

Development of a Duplex RT-PCR Method for Rapid Detection of H7N9 Subtype Influenza Virus
Jiang Wenming,Li Jinping,Yu Meifang,Sun Wenbo,Wang Suchun,Peng Cheng,Hou Guangyu,Liu Shuo,Du Xiang,Yu Jianmin,Chen Jiming.Development of a Duplex RT-PCR Method for Rapid Detection of H7N9 Subtype Influenza Virus[J].China Journal Of Animal Quarantine,2015,32(5):65-68.
Authors:Jiang Wenming  Li Jinping  Yu Meifang  Sun Wenbo  Wang Suchun  Peng Cheng  Hou Guangyu  Liu Shuo  Du Xiang  Yu Jianmin  Chen Jiming
Abstract:
Keywords:
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