猪初乳中PEDV IgA抗体捕获ELISA检测方法的建立及其初步应用 |
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引用本文: | 杨利,张浩明,于晓明,侯立婷,郑其升.猪初乳中PEDV IgA抗体捕获ELISA检测方法的建立及其初步应用[J].中国预防兽医学报,2023(8):822-828. |
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作者姓名: | 杨利 张浩明 于晓明 侯立婷 郑其升 |
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作者单位: | 1. 江苏省农业科学院动物免疫工程研究所/国家兽用生物制品工程技术研究中心/江苏省食品质量与安全重点实验室 |
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摘 要: | 为建立评价猪流行性腹泻病毒(PEDV)疫苗免疫效力的方法,本研究利用纯化的PEDV免疫BALB/c小鼠,按照常规方法制备PEDV全病毒单克隆抗体(MAb)作为捕获抗体,PEDV细胞培养上清为夹心抗原,HRP标记的羊抗猪IgA为二抗,采用棋盘滴定法对各反应条件优化后建立了用于猪初乳中PEDV IgA检测的捕获ELISA方法,并确定其临界值为0.25。采用该捕获ELISA对PEDV、PCV2b、PRRSV、PRV、JEV、PPV、FMDV与CSFV IgA抗体阳性猪初乳进行检测,结果显示,除PEDV IgA抗体阳性猪初乳检测结果为阳性外,其他病毒抗体阳性猪初乳检测结果均为阴性,表明该方法特异性强。采用该方法和BIONOTE PEDV IgA试剂盒对从1∶10开始2倍倍比稀释的16个稀释度的阳性猪初乳样品检测,结果显示该方法对阳性样品检测的最大稀释度为1∶40 960,是BIONOTE PEDV IgA试剂盒敏感性的16倍(1∶2 560),表明本研究建立方法的敏感性高。分别采用同一批次和不同批次制备的MAb包被的ELISA板分别检测5份PEDV IgA抗体阳性和1份PEDV IgA抗体阴性...
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关 键 词: | 猪流行性腹泻病毒 IgA检测 捕获ELISA 猪初乳 |
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