猪Hokovirus TaqMan荧光定量PCR方法的建立与应用 |
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引用本文: | 李彬,杜露平,何孔旺,刘浩飞,温立斌,张雪寒,郭容利,茅爱华,倪艳秀.猪Hokovirus TaqMan荧光定量PCR方法的建立与应用[J].中国预防兽医学报,2013,35(6). |
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作者姓名: | 李彬 杜露平 何孔旺 刘浩飞 温立斌 张雪寒 郭容利 茅爱华 倪艳秀 |
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作者单位: | 江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,江苏南京,210014 |
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基金项目: | 江苏省农业科技自主创新资金(CX |
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摘 要: | 为建立检测PHoV的TaqMan荧光定量PCR方法,本研究根据PHoV的VP2基因序列设计引物和探针,以梯度稀释的含有VP2基因的重组质粒作为标准品,进行定量PCR反应.结果显示,该方法的检测灵敏度为10拷贝;而且该检测方法特异性较好,与猪的其他病毒核酸均无交叉反应;批内和批间的变异系数低于3.29%,表明该方法的重复性较好.对华东地区采集的225份临床样品进行检测,结果显示,PHoV的阳性率为14.2%.本研究建立的荧光定量PCR方法灵敏度高、特异性好,可以为PHoV的流行病学调查和发病机制等研究提供可靠的工具.
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关 键 词: | 猪Hokovirus TaqMan荧光定量PCR 检测 |
Development and application of TaqMan-based real-time PCR assay for the detection of porcine Hokovirus |
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Abstract: | |
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Keywords: | porcine Hokovirus TaqMan-based real-time PCR detection |
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