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| 非典型犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因序列分析及其在大肠杆菌中的表达 | |
| 引用本文： | 毕振威,王永山,范红结,王智群,吴晓悠,马金荣,欧阳伟,张海彬.非典型犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因序列分析及其在大肠杆菌中的表达[J].中国预防兽医学报,2011,33(8). |
| 作者姓名： | 毕振威 王永山 范红结 王智群 吴晓悠 马金荣 欧阳伟 张海彬 |
| 作者单位： | 1. 江苏省农业科学院兽医研究所 农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京210014;南京农业大学动物医学院,江苏南京210095 2. 江苏省农业科学院兽医研究所 农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京210014 3. 南京农业大学动物医学院,江苏南京,210095 |
| 基金项目： | 江苏省农业科技自主创新资金项目SCX(11)2141 |
| 摘 要： | 为分析当地非典型犬瘟热病毒(CDV)核衣壳蛋白(N)基因的序列特征及其表达产物的抗原性,根据已发表CDV的N基因序列设计引物,用RT-PCR方法从引起非典型症状的CDV细胞培养物中扩增N基因,进行克隆和序列分析,结果表明:该非典型CDV的N基因与已发表的12个CDV强毒株的核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别在96.6%～99.2%和97.9%～99.4%之间,与已发表的4个CDV疫苗弱毒株的同源性分别在93.2%～93.6%和96.4%～97.5%之间;在N基因系统发育进化树上,非典型CDV与12个强毒株处在同一亚群,而且与9个中国分离毒株的亲缘关系近于3个国外毒株。N基因在大肠杆菌中表达的重组N蛋白的分子量为62 ku,主要以包涵体的形式存在;用western blot分析,重组N蛋白可与CDV阳性血清发生特异性反应;以纯化的重组N蛋白为抗原建立的CDV抗体间接ELISA检测方法具有良好的特异性。 |
| 关 键 词： | 犬瘟热病毒 非典型 核衣壳蛋白基因 序列分析 原核表达 |
Analysis and expression of nucleocapsid protein gene of atypical canine distemper virus in Escherichia coli |
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| BI Zhen-wei,WANG Yong-shan,FAN Hong-jie,WANG Zhi-qun,WU Xiao-you,MA Jin-rong,OUYANG Wei,ZHANG Hai-bin.Analysis and expression of nucleocapsid protein gene of atypical canine distemper virus in Escherichia coli[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2011,33(8). | |
| Authors: | BI Zhen-wei WANG Yong-shan FAN Hong-jie WANG Zhi-qun WU Xiao-you MA Jin-rong OUYANG Wei ZHANG Hai-bin |
| Institution: | BI Zhen-wei1,2,WANG Yong-shan1*,FAN Hong-jie2,WANG Zhi-qun1,WU Xiao-you1,MA Jin-rong1,OUYANG Wei1,ZHANG Hai-bin2(1.Institute of Veterinary Medicine,Jiangsu Academy of Agricultural Sciences,Key Laboratory of Animal Diseases Diagonostic and Immunology,Ministry of Agriculture,National Center for Engineering Research of Veterinary Bio-products,Nanjing 210014,China,2.College of Veterinary Medicine,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China) |
| Abstract: | To investigate the canine distemper virus(CDV) isolated from the lung and liver samples of an atypical clinical cases of canine distemper,the nucleocapsid protein(N) gene was amplified by RT-PCR with a pair of primers designed based on the N gene sequence of CDV reference strains in GenBank.The sequence analysis demonstrated that the homology of the atypical CDV N gene with other 12 virulent reference strains in GenBank were from 96.6% to 99.2% in nucleotide and 97.9% to 99.4% in amino acid sequence,and sha... |
| Keywords: | canine distemper virus atypical nucleocapsid protein gene sequence analysis prokaryotic expression |
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