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快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒胶体金免疫层析方法的建立
引用本文:李雪松,符芳,李海忠,王伟,陈欣,郎越坤,田华彬,周艳君,刘永刚,蔡雪辉,李曦.快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒胶体金免疫层析方法的建立[J].中国预防兽医学报,2011,33(9).
作者姓名:李雪松  符芳  李海忠  王伟  陈欣  郎越坤  田华彬  周艳君  刘永刚  蔡雪辉  李曦
作者单位:1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨150001;中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241
2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨,150001
3. 齐鲁动物保健品有限公司,山东济南,250100
4. 中国农业科学院上海兽医研究所,上海,200241
基金项目:国家国际科技合作项目(2010DFB33920)
摘    要:为建立一种快速、简便、灵敏的检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的胶体金免疫层析方法(GICA),本研究采用柠檬酸三钠还原法制备了胶体金颗粒,标记抗PRRSVN蛋白的单克隆抗体(MAb) 2D7制备免疫检测探针,将抗PRRSVN蛋白的MAb 1G7和羊抗鼠IgG抗体印迹在硝酸纤维素膜上,分别作为检测线和质控线,经条件优化,组装成胶体金免疫层析试纸条.本研究制备的PRRSV胶体金试纸条的最低检测限度为103.0 TCID50/mL;在特异性试验中,试纸条检测PRRSV呈阳性,其它主要猪病病原均为阴性;不同批次试纸条重复检测,结果无差异;对现地猪场送检的150份病料进行PRRSV病原检测,与RT-PCR相比较,试纸条的特异性和敏感性分别为98.13%和88.37%.两种方法的一致性Kappa值为0.882.建立的PRRSV抗原胶体金免疫层析检测方法具有良好的的敏感性、特异性、重复性及现地应用性.该试纸条的研制为PRRS的快速诊断及免疫预防提供了技术手段.

关 键 词:猪繁殖与呼吸综合征病毒  胶体金  免疫层析

Development of a colloidal gold immunochromatographic assay for rapid detection of porcine reproductive and respiratory syndrome virus
LI Xue-song,FU Fang,LI Hai-zhong,WANG Wei,CHEN Xin,LANG Yue-kun,TIAN Hua-bin,ZHOU Yan-jun,LIU Yong-gang,CAI Xue-hui,LI Xi.Development of a colloidal gold immunochromatographic assay for rapid detection of porcine reproductive and respiratory syndrome virus[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2011,33(9).
Authors:LI Xue-song  FU Fang  LI Hai-zhong  WANG Wei  CHEN Xin  LANG Yue-kun  TIAN Hua-bin  ZHOU Yan-jun  LIU Yong-gang  CAI Xue-hui  LI Xi
Institution:LI Xue-song1,2,FU Fang1,LI Hai-zhong3,WANG Wei1,CHEN Xin1,LANG Yue-kun1,TIAN Hua-bin1,ZHOU Yan-jun2,LIU Yong-gang1,CAI Xue-hui1,LI Xi1(1.Division of Swine Infectious Diseases,State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Harbin 150001,China,2.Shanghai Veterinary Research Institute,Shanghai 200241,3.Qilu Animal Health Products Co.,Ltd.,Jinan 250100,China)
Abstract:A colloidal gold immunochromatographic strip(GICA) was developed for rapidly detecting porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV).The strip was composed of monoclonal antibody(MAb) 2D7,MAb 1G7 against PRRSV N protein and goat anti-mouse IgG antibody.The MAb 2D7,which labbed with colloidal gold,was used as immunodetection probe.The MAb 1G7 and goat anti-mouse IgG antibody were blotted on the nitrocellulose membrane as the test line and control line,respectively.The developed GICA specifically...
Keywords:porcine reproductive and respiratory syndrome  colloidal gold  immunochromatography  
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