| 猪传染性胃肠炎病毒S基因B、C位点的克隆及原核表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 张春叶,沈红,李焕荣,路苹.猪传染性胃肠炎病毒S基因B、C位点的克隆及原核表达载体的构建[J].动物医学进展,2008,29(9). |
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| 作者姓名： | 张春叶 沈红 李焕荣 路苹 |
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| 作者单位： | 1. 北京农学院动物科学技术系,北京,102206
2. 农业应用新技术北京市重点实验室,北京,102206 |
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| 基金项目： | 北京市重点实验室基金，北京市教委科研项目 |
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| 摘 要： | 参考GenBank上公布的猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）S基因B、C抗原位点序列，应用Primer6．0设计一对含酶切住点的引物，用于RT—PCR扩增B、C抗原位点目的片段，将扩增产物连接于peasy—T克隆载体上，构建克隆载体，用EcoRⅠ和XhoⅠ对表达载体PET-32a（＋）和重组质粒进行酶切，将酶切产物亚克隆至PET-32a（＋）多克隆位点上，连接、转化至BL21（DE3），构建B、C位点的原核表达载体，并对阳性重组质粒进行酶切、PCR和测序鉴定。所扩增的目的片段的大小为357bp，与原核表达载体连接后，经核苷酸及推导的氨基酸序列分析表明，该基因与其他猪传染性胃肠炎病毒相应基因具有很高的同源性，说明成功地构建了TGEVS基因B、C抗原位点的原核表达载体。TGEVS基因B、C抗原位点原核表达载体的成功构建，为TGEV诊断方法的建立提供良好的技术基础。
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| 关 键 词： | 猪传染性胃肠炎病毒 S基因B C抗原位点 克隆 原核表达载体 |
Cloning and the Construction of Prokaryotic Expression of the Sites B\C of S Gene of Transmissible gastroenteritis virus |
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| ZHANG Chun-ye,SHEN Hong,LI Huan-rong,LU Ping.Cloning and the Construction of Prokaryotic Expression of the Sites B\C of S Gene of Transmissible gastroenteritis virus[J].Progress In Veterinary Medicine,2008,29(9). |
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| Authors: | ZHANG Chun-ye SHEN Hong LI Huan-rong LU Ping |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | TGEV the B\C antigenic sites of S gene cloning prokaryotic expression |
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