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H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白的原核表达
引用本文:杨理凯,郭苗苗,杜伟立,丁锐,王令,张涛,路宏朝.H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白的原核表达[J].动物医学进展,2018(8).
作者姓名:杨理凯  郭苗苗  杜伟立  丁锐  王令  张涛  路宏朝
作者单位:陕西理工大学生物科学与工程学院
摘    要:血凝素(hemagglutinin,HA)是禽流感病毒的主要抗原之一,原核表达HA是该抗原特性研究和疫苗制备的关键。利用分子生物学方法构建H5N1亚型的禽流感病毒HA基因原核表达载体,转化至大肠埃希菌Rosetta菌株,用不同IPTG浓度和时间诱导HA表达,检测蛋白表达量,分析不同诱导条件对HA表达效率的影响,以确定最佳诱导条件。重组表达载体pET32a-HA经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切鉴定,获得预期大小的DNA片段,说明HA基因成功插入质粒pET32a。Western blot检测结果表明,IPTG诱导重组菌株成功表达HA蛋白,当诱导浓度为0.1mmol/L,诱导时间为6h时,HA蛋白表达量最高。研究结果为HA抗原制备及禽流感疫苗的研究奠定基础。

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