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鸭补体调节因子H的原核表达及多克隆抗体制备
引用本文:王向丽,李德龙,谷九龙,刘海兰,孟雅娜,陈思怀,唐发书,李继祥.鸭补体调节因子H的原核表达及多克隆抗体制备[J].动物医学进展,2019,40(8):40-43.
作者姓名:王向丽  李德龙  谷九龙  刘海兰  孟雅娜  陈思怀  唐发书  李继祥
作者单位:西南大学动物科学学院,重庆,402460;西南大学动物科学学院,重庆,402460;西南大学动物科学学院,重庆,402460;西南大学动物科学学院,重庆,402460;西南大学动物科学学院,重庆,402460;西南大学动物科学学院,重庆,402460;西南大学动物科学学院,重庆,402460;西南大学动物科学学院,重庆,402460
基金项目:博士基金;中央高校基本科研业务费专项
摘    要:为制备鸭补体调节因子H(CFH)的多克隆抗体,从健康雏鸭的肝脏组织中提取总RNA及反转录合成cDNA,PCR扩增补体调节因子H基因的2个片段H1和H2,插入到载体pMD19-T,测序正确后,将目的基因分别克隆至原核表达载体pCold-TF,转化至大肠埃希菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达蛋白,重组蛋白经SDS-PAGE检测,镍柱亲和层析纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体。结果表明,成功构建重组表达质粒pCold-TF-H1和pCold-TF-H2,SDS-PAGE检测重组蛋白为可溶性表达,TF-H1和TF-H2多克隆抗体效价均超过1∶10000。所制备的多克隆抗体可以为进一步研究鸭CFH的功能奠定基础。

关 键 词:  补体调节因子  H因子  原核表达  多克隆抗体

Prokaryotic Expression and Polyclonal Antibody Preparation of Duck Complement Regulatory Factor H
WANG Xiang-li,LI De-long,GU Jiu-long,LIU Hai-lan,MENG Ya-na,CHEN Si-huai,TANG Fa-shu,LI Ji-xiang.Prokaryotic Expression and Polyclonal Antibody Preparation of Duck Complement Regulatory Factor H[J].Progress In Veterinary Medicine,2019,40(8):40-43.
Authors:WANG Xiang-li  LI De-long  GU Jiu-long  LIU Hai-lan  MENG Ya-na  CHEN Si-huai  TANG Fa-shu  LI Ji-xiang
Institution:(College of Animal Science,Southwest University,Chongqing,402460,China)
Abstract:WANG Xiang-li;LI De-long;GU Jiu-long;LIU Hai-lan;MENG Ya-na;CHEN Si-huai;TANG Fa-shu;LI Ji-xiang(College of Animal Science,Southwest University,Chongqing,402460,China)
Keywords:duck  complement regulatory factor  complement factor H  prokaryotic expression  polyclonal antibody
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