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多杀性巴氏杆菌PurF蛋白的原核表达及多克隆抗体制备
引用本文:张爱芹,郭东春,刘家森,原冬伟,姜骞,林欢,崔玉东,曲连东.多杀性巴氏杆菌PurF蛋白的原核表达及多克隆抗体制备[J].动物医学进展,2013,34(1):6-10.
作者姓名:张爱芹  郭东春  刘家森  原冬伟  姜骞  林欢  崔玉东  曲连东
作者单位:1. 黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江大庆163319;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室实验动物研究室,黑龙江哈尔滨150001
2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室实验动物研究室,黑龙江哈尔滨,150001
3. 黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江大庆,163319
摘    要:为了获得多杀性巴氏杆菌PurF蛋白及其多克隆抗体,通过PCR扩增了多杀性巴氏杆菌C51-17株purF基因,将其克隆到表达载体pPROEX-HTa中,构建重组表达质粒pHT-PurF,转化至大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达。SDS-PAGE检测表明,获得重组蛋白分子质量约56.5ku,主要以包涵体形式存在;Western blot检测表明,表达的蛋白可与多杀性巴氏杆菌制备的高免血清发生特异性反应。将制备的重组蛋白免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,ELISA检测血清抗体效价,结果显示制备的多克隆抗体滴度达到1∶128 000,Western blot表明可与多杀性巴氏杆菌PurF蛋白发生反应。本研究制备了多杀性巴氏杆菌的PurF蛋白及其多克隆抗体,为进一步研究PurF蛋白在多杀性巴氏杆菌致病中的作用奠定了基础。

关 键 词:多杀性巴氏杆菌  purF基因  原核表达  多克隆抗体

Prokaryotic Expression and Preparation of Polyclonal Antibodies against Pasteurella multocida PurF Protein
ZHANG Ai-qin , GUO Dong-chun , LIU Jia-sen , YUAN Dong-wei , JIANG Qian , LIN Huan , CUI Yu-dong , QU Lian-dong.Prokaryotic Expression and Preparation of Polyclonal Antibodies against Pasteurella multocida PurF Protein[J].Progress In Veterinary Medicine,2013,34(1):6-10.
Authors:ZHANG Ai-qin  GUO Dong-chun  LIU Jia-sen  YUAN Dong-wei  JIANG Qian  LIN Huan  CUI Yu-dong  QU Lian-dong
Institution:1.College of Animal Science and Veterinary Medicine,Heilongjiang August First Agricultural University,Daqing,Heilongjiang,163319,China;2.State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Harbin,Heilongjiang,150001,China)
Abstract:
Keywords:
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