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| 多重实时荧光定量PCR鉴别欧洲型、美洲型和高致病性PRRSV检测方法的建立 | |
| 引用本文： | 温青娜,周玲玲,申红,杨菊凤,林祥群.多重实时荧光定量PCR鉴别欧洲型、美洲型和高致病性PRRSV检测方法的建立[J].动物医学进展,2015,36(6). |
| 作者姓名： | 温青娜 周玲玲 申红 杨菊凤 林祥群 |
| 作者单位： | 1. 河南科技学院,河南新乡,453000 2. 广东中大南海海洋生物技术工程中心有限公司,广东广州,510330 3. 石河子大学,新疆石河子,832003 4. 山东畜牧兽医职业学院,山东潍坊,261061 5. 石河子职业技术师范学院,新疆石河子,832003 |
| 摘 要： | 根据欧洲型N基因、美洲型M基因和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)nsp2基因的各自保守序列设计特异性的引物和不同荧光标记的TaqMan荧光探针,通过优化反应体系和扩增条件,建立了能够检测欧洲型、美洲型和高致病性PRRSV的多重实时荧光定量PCR方法。该方法的重复试验表明其批内和批间的变异系数最高值分别为1.84%和1.76%;灵敏性试验表明其检测下限为10copies/μL;特异性试验表明与其他一些猪源病毒无交叉反应,具有良好的特异性;临床试验表明,该方法能够快速准确地检测出临床组织样本中美洲型及高致病性PRRSV的核酸;此外,本研究用欧洲型PRRSV质粒进一步验证了该方法可以检测出欧洲型PRRSV的目的基因。该方法的建立为不同类型的PRRSV快速检测提供了有效手段,可用于猪繁殖与呼吸综合征疫情的监测及防控。 |
| 关 键 词： | 欧洲型 美洲型 高致病性 猪繁殖与呼吸综合征病毒 多重实时荧光定量PCR |
Development of Multiplex Real-time PCR for Detection of European Genotype,American Genotype and Highly Pathogenic PRRSV |
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| WEN Qing-na,ZHOU Ling-ling,SHEN Hong,YANG Ju-feng,LIN Xiang-qun.Development of Multiplex Real-time PCR for Detection of European Genotype,American Genotype and Highly Pathogenic PRRSV[J].Progress In Veterinary Medicine,2015,36(6). | |
| Authors: | WEN Qing-na ZHOU Ling-ling SHEN Hong YANG Ju-feng LIN Xiang-qun |
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