| 重组鹅β-防御素7蛋白的原核表达及其生物学特性分析 |
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| 引用本文： | 高梦莹,徐倩倩,张婷婷,陈玉秋,赵文钧,齐甜铭,马得莹.重组鹅β-防御素7蛋白的原核表达及其生物学特性分析[J].动物营养学报,2016(4):1114-1121. |
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| 作者姓名： | 高梦莹 徐倩倩 张婷婷 陈玉秋 赵文钧 齐甜铭 马得莹 |
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| 作者单位： | 东北农业大学动物科学技术学院,哈尔滨,150030 |
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| 基金项目： | 教育部博士点基金项目(20122325110016)，哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目(2013RFXXJ019)，黑龙江省应用技术研究与开发计划项目(PC13S02) |
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| 摘 要： | 为探讨鹅β-防御素7(Av BD7)的生物学特性,将鹅Av BD7基因亚克隆到大肠杆菌原核表达载体p Pro EX HTa的EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切位点上,构建重组表达质粒p Pro EX-Av BD7,将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta感受态细胞中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)对其菌液进行诱导表达。经N-三(羟甲基)甲基甘氨酸十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(Tricine-SDS-PAGE)分析,该重组蛋白大小为10~15 ku,与预期大小结果一致。重组鹅Av BD7蛋白纯化后,通过菌落计数的方法测定其体外抗大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、四联球菌、枯草芽孢杆菌等抑菌活性,盐离子浓度对其抗菌活性的影响及其对鸡红细胞的溶血活性。结果显示,重组鹅Av BD7蛋白对所测定的5种细菌均有显著抗菌活性(P0.05),且其抑菌活性随蛋白浓度的增加而增强。高浓度盐离子(150 mmol/L)显著抑制重组鹅Av BD7蛋白的抗菌活性(P0.05)。重组鹅Av BD7蛋白对鸡红细胞没有溶血活性(P0.05)。由此可见,重组鹅Av BD7蛋白具有广谱抗菌活性,高浓度盐离子显著降低其抗菌活性,且该重组蛋白不具有溶血活性。
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| 关 键 词： | 鹅β-防御素7 重组蛋白 抗菌活性 |
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