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miR-92a对奶山羊乳腺上皮细胞增殖及凋亡的调控分析
引用本文:包黎娟,刘育含,马毅,安小鹏,张月,张梦,王建刚,堵斌,李广,曹斌云.miR-92a对奶山羊乳腺上皮细胞增殖及凋亡的调控分析[J].畜牧兽医学报,2020,51(1):137-149.
作者姓名:包黎娟  刘育含  马毅  安小鹏  张月  张梦  王建刚  堵斌  李广  曹斌云
作者单位:1. 西北农林科技大学动物科技学院, 杨凌 712100;2. 天津市畜牧兽医研究所, 天津 300381;3. 陕西佰傲再生医学有限公司, 西安 710000
基金项目:陕西省重点研发计划(2018ZDCXL-NY-01-03)
摘    要:miRNAs是对哺乳动物乳腺组织发育及泌乳机能进行调控的重要因子。本研究依据已有的关中奶山羊乳腺组织miRNA表达谱,选择不同泌乳时期差异表达的miR-92a为研究对象,探究miR-92a对山羊乳腺上皮细胞(GMEC)增殖及凋亡的调控作用,并挖掘其潜在的调控基因。采用荧光定量PCR、MTT检测、EdU检测及流式细胞术,检测miR-92a在不同泌乳时期乳腺组织的表达情况,并在细胞水平检测miR-92a对乳腺上皮细胞增殖、凋亡及细胞周期的调控作用。利用RNA-seq技术,分析过表达miR-92a乳腺上皮细胞中的差异表达基因。qRT-PCR结果显示,miR-92a在奶山羊泌乳初期乳腺组织中表达量极显著高于泌乳中期(P<0.01),表明miR-92a可能对奶山羊泌乳性状有重要的调控作用。GMEC过表达miR-92a后,试验结果显示:与NC对照组比较,miR-92a过表达组的EdU阳性细胞数极显著减少(P<0.01),S期的细胞数显著下降、G1期的细胞数显著增加,同时miR-92a组的凋亡细胞数目显著增加(P<0.05)。采用RNA-seq,构建了miR-92a过表达mRNA文库,发现下调基因54个,上调基因160个。GO terms及KEGG通路分析显示差异表达基因调控乳腺上皮细胞多种生物学功能。以上结果表明miR-92a促进GMEC凋亡、抑制其增殖,测序结果进一步证明miR-92a对奶山羊乳腺发育及泌乳性能具有潜在的调控作用。

关 键 词:miR-92a  奶山羊  乳腺上皮细胞  转录组测序  
收稿时间:2019-08-08

The Regulatory of MiR-92a on Proliferation and Apoptosis of Dairy Goat Mammary Epithelial Cells
BAO Lijuan,LIU Yuhan,MA Yi,AN Xiaopeng,ZHANG Yue,ZHANG Meng,WANG Jiangang,DU Bin,LI Guang,CAO Binyun.The Regulatory of MiR-92a on Proliferation and Apoptosis of Dairy Goat Mammary Epithelial Cells[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2020,51(1):137-149.
Authors:BAO Lijuan  LIU Yuhan  MA Yi  AN Xiaopeng  ZHANG Yue  ZHANG Meng  WANG Jiangang  DU Bin  LI Guang  CAO Binyun
Institution:1. College of Animal Science and Technology, Northwest A & F University, Yangling 712100, China;2. Tianjin Institute of Animal Science and Veterinary, Tianjin 300381, China;3. Shaanxi Bio-Regenertive Medicine Co., LTD., Xi'an 710000, China
Abstract:
Keywords:miR-92a  dairy goat  mammary epithelial cells  RNA-Seq  
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