| 鼠痘病毒EVM135和EVM085蛋白免疫原性及抗体中和活性的鉴定 |
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| 引用本文： | 高真贞,蒙泽菁,何小兵,房永祥,田慧慧,陈国华,景志忠.鼠痘病毒EVM135和EVM085蛋白免疫原性及抗体中和活性的鉴定[J].畜牧兽医学报,2023(6):2468-2477. |
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| 作者姓名： | 高真贞 蒙泽菁 何小兵 房永祥 田慧慧 陈国华 景志忠 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院兰州兽医研究所/动物疫病防控全国重点实验室/农业部兽医公共卫生重点实验室;2. 兰州大学公共卫生学院 |
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| 摘 要： | 正痘病毒属病毒的A33和H3L蛋白是其成员共有的中和抗体的两个主要靶标。为检测鼠痘病毒(ectromelia virus, ECTV)A33和H3L蛋白同源物的免疫原性及抗体中和活性，以ECTV-Moscow株基因组DNA为模板，PCR扩增A33和H3L同源基因EVM135、EVM085目的序列，分别构建pET30a-EVM135、pET30-EVM085原核表达载体，转化Rosetta感受态细胞，IPTG诱导表达，利用镍层析柱纯化并进行逐步透析复性，免疫兔制备多克隆抗体。建立间接ELISA方法测定其抗体效价分别达1∶120 000和1∶360 000,Western blot和IFA证实该多克隆抗体具有良好的特异性和反应性；ECTV病毒中和试验表明抗EVM135多克隆抗体中和效价为1∶16,而抗EVM085多克隆抗体效价为1∶128。本研究通过高效表达EVM135和EVM085蛋白，并分析其免疫原性及抗体中和活性，为深入研究痘病毒致病和免疫机理，进而快速建立其诊断方法，为猴痘防控技术措施的研究奠定基础。
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| 关 键 词： | A33 H3L 原核表达 多克隆抗体 中和活性 |
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