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牛疱疹病毒I型二重LUX荧光PCR鉴别检测方法的建立
引用本文:陈茹,刘琳琳,曾彩云,曾碧健,罗琼,曹永长,毕英佐.牛疱疹病毒I型二重LUX荧光PCR鉴别检测方法的建立[J].中国兽医科技,2007,37(11):944-949.
作者姓名:陈茹  刘琳琳  曾彩云  曾碧健  罗琼  曹永长  毕英佐
作者单位:[1]广东出入境检验检疫局,广东广州510623 [2]华南农业大学动物科学学院,广东广州510642
基金项目:国家质检总局科研项目(2006IK019);广东检验检疫科研项目(2004GDK36)
摘    要:采用LUX新型荧光PCR技术原理,建立了快速检测牛疱疹病毒I型(BHV-1)以及鉴别野毒感染和基因缺失疫苗免疫动物的二重实时荧光PCR方法。结果显示,该方法对多株BHV-1病毒均呈典型gE、gC双基因阳性反应,对其他常见动物疱疹病毒以及健康牛基因组DNA等均呈阴性反应;对细胞增殖病毒液的gE、gC双基因鉴别的检测敏感性可达0.4~O.04TCID50比常规PCR方法高100倍以上;对带毒牛血清、抗凝全血、牛新鲜精液和冷冻精液基因鉴别的检测敏感性分别达0.04TCID50、0.4TCID50、0.4TCID50和4TCID50。采用该方法从临床牛血样、鼻拭子样品中检出IBRV阳性样品,检测全程仅需约2h。对单基因克隆质粒的检测进一步证实该方法能特异地鉴定gE、gC基因,检测灵敏度分别达90、30拷贝。结果表明,该方法可应用于临床快速诊断BHV-1病毒感染,鉴别BHV-1病毒感染与对应的基因缺失疫苗免疫动物。

关 键 词:LUX引物  二重荧光PCR  牛疱疹病毒I型  牛传染性鼻气管炎  牛传染性化脓性外阴阴道炎
文章编号:1673-4696(2007)11-0944-06
收稿时间:2007-08-06
修稿时间:2007-10-10

Establishment of duplex LUX real-time fluorescent PCR assay for detecting bovine herpesvirus 1
CHEN Ru,LIU Lin-lin,ZENG Cai-yun,ZENG Bi-jian,LUO Qiong, CAO Yong-chang,BI Ying-zuo.Establishment of duplex LUX real-time fluorescent PCR assay for detecting bovine herpesvirus 1[J].Chinese Journal of Veterinary Science and Technology,2007,37(11):944-949.
Authors:CHEN Ru  LIU Lin-lin  ZENG Cai-yun  ZENG Bi-jian  LUO Qiong  CAO Yong-chang  BI Ying-zuo
Abstract:
Keywords:LUX primer  duplex fluorescent PCR  bovine herpesvirus type 1  IBR  IPV
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