| 赤羽病病毒N基因硫氧还蛋白融合表达载体的构建与表达 |
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| 引用本文： | 花群义,杨云庆,董俊,杨晶焰,贾建军,周晓黎,徐自忠.赤羽病病毒N基因硫氧还蛋白融合表达载体的构建与表达[J].中国兽医科技,2003,33(10):7-14. |
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| 作者姓名： | 花群义 杨云庆 董俊 杨晶焰 贾建军 周晓黎 徐自忠 |
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| 摘 要： | 为获得赤羽病病毒(Akabane virus，AKAV)的核蛋白重组抗原，根据其基因序列(S mRNA)设计合成了1对特异性引物，对AKAV N基因进行RT-PCR扩增，产物大小约为696bp，回收纯化后，将其克隆至pMDl8-T质粒栽体中，经核苷酸序列分析，与已报道的多株AKAV编码核衣壳蛋白N的S mRNA基因比较后发现，所测定毒株的核苷酸序列与TIN毒株的同源性高达98．3％，推测的氨基酸同源性为97．6％，证实为AKAV的N基因。将该基因片段亚克隆插入pBAD／Thio TOPO表达栽体，转化TOPl0细胞，成功地构建了AKAV N基因重组表达栽体。经L-araboinose诱导表达，可稳定、高效地表达AKAV核蛋白抗原。表达蛋白为融合蛋白，分子质量约42．5ku，其表达产量约占茵体总蛋白的28％，融合蛋白中含有AKAV特异性核蛋白抗原，可作为ELISA包被抗原。
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| 关 键 词： | 赤羽病病毒 N基因 核蛋白基因 基因表达 ELISA 基因序列 |
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