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狂犬病病毒糖蛋白膜外区基因在大肠埃希氏菌中的高效表达
引用本文:蔡月琴,叶菊秀,李玲燕,周继勇.狂犬病病毒糖蛋白膜外区基因在大肠埃希氏菌中的高效表达[J].中国兽医科技,2006,36(6):449-453.
作者姓名:蔡月琴  叶菊秀  李玲燕  周继勇
作者单位:浙江大学动物预防医学研究所,浙江杭州310029
摘    要:为获得狂犬病病毒(RV)糖蛋白抗原,采用RT-PCR方法从狂犬病病毒ERA株中扩增了编码RV糖蛋白的全长基因,将其克隆于pMD18-T载体,再经PCR扩增出糖蛋白全长基因和膜外区基因,将其分别亚克隆至原核表达载体pET-28a(+)、pET-32a(+)和pGEX-4T-1中,经PCR和双酶切鉴定以及序列分析,表明已成功构建了重组质粒。将重组质粒转化到大肠埃希氏菌BL21(DE3)中进行表达,结果显示,克隆到pET-32a(+)的糖蛋白膜外区基因表达量最高,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的45.4%。经Western-blotting检测,不同载体表达的糖蛋白膜外区产物均可与兔抗RV多抗发生特异性反应,表明,重组蛋白具有良好的反应原性。

关 键 词:狂犬病病毒  糖蛋白膜外区  高效表达
文章编号:1673-4696(2006)06-0449-05
收稿时间:2006-03-13
修稿时间:2006-06-02

High level expression of rabies virus glycoprotein extracellular domain gene in Escherichia coli
CAI Yue-qin, YE Ju-xiu, LI Ling-yan, ZHOU Ji-yong.High level expression of rabies virus glycoprotein extracellular domain gene in Escherichia coli[J].Chinese Journal of Veterinary Science and Technology,2006,36(6):449-453.
Authors:CAI Yue-qin  YE Ju-xiu  LI Ling-yan  ZHOU Ji-yong
Abstract:
Keywords:rabies virus  glycoprotein extracellular domain  expression
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