| 3种奶牛乳房炎链球菌的gapC基因原核表达及其免疫原性研究 |
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| 引用本文： | 王凤,汤德元,宋立,宁宜宝,张纯萍.3种奶牛乳房炎链球菌的gapC基因原核表达及其免疫原性研究[J].养殖与饲料．饲料世界,2013(6):10-15. |
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| 作者姓名： | 王凤 汤德元 宋立 宁宜宝 张纯萍 |
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| 作者单位： | 贵州大学动物科学学院;中国兽医药品监察所 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划)(2013CB127204) |
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| 摘 要： | 为研究引起奶牛乳房炎的病原菌停乳链球菌、无乳链球菌和乳房链球菌的gapC基因工程疫苗及其生物免疫活性,试验采用PCR方法扩增出停乳链球菌、无乳链球菌和乳房链球菌的gapC基因cDNA序列,克隆到pMD18-T载体上,将重组质粒pMD18-T-TRgapC、pMD18-T-WRgapC和pMD18-T-RFgapC经双酶切鉴定、测序及序列分析后,再将gapC基因亚克隆到pET-28a(+)原核表达载体上,构建停乳链球菌、无乳链球菌和乳房链球菌的gapC基因原核表达质粒pET-28-TRgapC、pET-28-WRgapC和pET-28-RFgapC;将构建好的原核表达质粒转化至宿主菌BL21(DH3)中,诱导表达目的蛋白。表达产物经SDS-PAGE电泳、纯化、复性后经Western blot检测,得到了约38 ku的条带,与预期大小相符。说明这3种蛋白有一定的免疫原性。
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| 关 键 词： | 奶牛乳房炎 停乳链球菌 无乳链球菌 乳房链球菌 gapC基因 原核表达 免疫原性 |
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