| 刚地弓形虫SRS29C核酸疫苗的构建及SRS29C与SAG1联合免疫保护性的比较研究 |
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| 引用本文： | 叶建军,田静,高传亮,闫安,叶利颖,王宇冰,宋淇淇.刚地弓形虫SRS29C核酸疫苗的构建及SRS29C与SAG1联合免疫保护性的比较研究[J].黑龙江畜牧兽医,2023(21):18-25. |
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| 作者姓名： | 叶建军 田静 高传亮 闫安 叶利颖 王宇冰 宋淇淇 |
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| 作者单位： | 天津农学院动物科学与动物医学学院天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室 |
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| 基金项目： | 天津市自然科学基金项目(19JCQNJC13700)；;天津市教委科研计划项目(2018KJ185)；;国家级大学生创新训练计划项目(202110061035)； |
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| 摘 要： | 为了探究刚地弓形虫表面蛋白(surface antigen, SAG)SRS29C基因和SRS29C、SAG1联合基因的核酸疫苗对小鼠急性感染弓形虫的免疫保护效果，试验利用PCR方法扩增了SRS29C基因片段并将其克隆至真核表达载体pEGFP-N1中，构建重组质粒pEGFP-SRS29C,并对该质粒进行酶切鉴定，同时用该质粒对HEK293T细胞进行转染，再用Western-blot方法检测目标蛋白在细胞中的表达情况；用重组质粒pEGFP-SRS29C和pEGFP-SAG1单独免疫或联合免疫小鼠，用ELISA法测定血清IgG水平，CCK-8法检测脾淋巴细胞增殖能力，流式细胞仪测定CD4+和CD8+T淋巴细胞百分比，ELISA试剂盒检测脾脏细胞因子的表达情况；进行小鼠体内攻虫试验，记录小鼠存活时间。结果表明：成功构建了重组质粒pEGFP-SRS29C,表达的蛋白质大小为66 ku; pEGFP-SRS29C组和联合免疫组与PBS组和空载体组相比血清IgG含量、脾淋巴细胞增殖率、CD4+
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| 关 键 词： | 弓形虫 核酸疫苗 SRS29C SAG1 重组质粒 联合免疫 |
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