| 摘 要： | 为了研究引起青海省海西州漠河骆驼场安格斯种牛致死病因及其病原特征,试验以C47-8为质控菌株,采用常规细菌分离鉴定技术对无菌采集的病死安格斯种牛病料进行了多杀性巴氏杆菌的分离与纯化、生化鉴定、致病性试验、药敏试验及其种特异性基因Kmt-1的检测。结果表明:临床分离株为革兰氏阴性的短杆菌,病料触片经美蓝染色镜检可见其呈两极着色特性;与C47-8间存在乳糖、蔗糖、木糖、水杨苷及尿素酶等5种生化鉴定差异;对小鼠具有致死性效应;对红霉素等22种抗生素耐药,平均耐药率为62.85%(22/34),而质控菌株则无耐药性。同时对提取的临床分离株DNA进行Kmt-1基因的PCR扩增,分别获得了大小为460 bp和253 bp的Kmt-1基因扩增片段;经序列分析,临床分离株Kmt-1基因与Gen Bank公布的序列之间的基因编码区核苷酸序列同源性为97%~100%;检测的最低DNA浓度为790 ng/m L;所应用的2对Kmt-1基因检测引物对伤寒沙门氏菌、大肠埃希氏菌和克雷伯氏菌的扩增均为阴性。说明此次安格斯种公牛发病为多杀性巴氏杆菌引起,建议该养殖场在做好饲养管理的同时,应加强针对多杀性巴氏杆菌的免疫预防和消毒处理措施,以减少或杜绝本病的再次发生。
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