| 家蚕细胞色素P450 CYP337A1的原核表达 |
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| 引用本文： | 董元凌,艾均文,柳照应,张湖静,李傲祥,朱勇.家蚕细胞色素P450 CYP337A1的原核表达[J].中国蚕业,2008,29(2):20-23. |
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| 作者姓名： | 董元凌 艾均文 柳照应 张湖静 李傲祥 朱勇 |
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| 作者单位： | 西南大学生物技术学院,重庆,400716 |
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| 摘 要： | 以含有CYP337A1基因完全编码框的克隆载体质粒DNA为模板进行PCR扩增，产物经TA克隆测序鉴定后，亚克隆至原核融合表达载体PET50（b）（含有编码64．3kD的Nus．Tag蛋白标签）中，在大肠杆菌BL21（DE3）中进行原核表达。利用SDS-PAGE方法，以空载和未诱导菌体作对照，对细菌总蛋白进行电泳分析，结果表明：经1mmol／L IPTG诱导2h后，即能看到1条大约120kD的蛋白质特异带，与预计大小一致。进一步利用不同时间、不同温度以及不同浓度的IPTG进行诱导结果比较，发现在诱导时间为2h，温度为32℃，IPTG浓度为0．6mmol／L的诱导条件下，融合蛋白表达量最大。该实验为利用该基因的蛋白产物进行功能分析创造了条件。
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| 关 键 词： | 家蚕 细胞色素P450 CYP337A1 原核表达 |
| 文章编号： | 1007-0982(2008)02-0020-04 |
| 修稿时间： | 2007年11月21 |
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