| 猪SLA—DRB基因的克隆及在大肠杆菌的表达 |
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| 引用本文： | 吴雪斌,李学伟.猪SLA—DRB基因的克隆及在大肠杆菌的表达[J].甘肃畜牧兽医,2008,38(5). |
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| 作者姓名： | 吴雪斌 李学伟 |
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| 作者单位： | 四川农业大学,动物科技学院,四川,雅安,625014 |
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| 基金项目： | 教育部长江学者和创新团队发展计划
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| 摘 要： | 试验旨在通过基因工程方法获得重组猪SLA-DRB蛋白。根据基因库猪SLA-DRB基因序列设计合成特异性引物,引物两端分别加上BamHⅠ和XhoⅠ酶切位点及保护碱基;提取长白猪肠系淋巴结RNA,用RT-PCR的方法扩增猪SLA-DRB基因cDNA,并将其克隆到pMD18-T载体上,测序后经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后克隆到pET-32a( )中,构建原核表达载体pET-32a-DRB;将重组表达质粒转化至宿主菌Rosseta中,诱导表达。结果表明,成功扩增出猪SLA-DRB基因cD-NA,经DNA序列测定,所得基因与国外报道的序列99.9%相同;成功构建原核表达载体pET-32a-DRB;经IPTG诱导,表达出了6×His-DRB融合蛋白,对表达的蛋白用SDS-PAGE电泳分析,得到了约50kDa左右蛋白,与预期大小相符,表明猪SLA-DRB基因在大肠杆菌中成功的进行了表达。
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| 关 键 词： | SLA-DRB基因 克隆 原核表达 |
Cloning of SLA-DRB gene and its expression in E.coli |
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| WU Xue-bin,LI Xue-wei.Cloning of SLA-DRB gene and its expression in E.coli[J].Gansu Animal and Veterinary Sciences,2008,38(5). |
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| Authors: | WU Xue-bin LI Xue-wei |
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