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| 狂犬病病毒核蛋白基因的克隆序列分析及其在E.coli中的高效表达 | |
| 引用本文： | 高明华,夏咸柱,薛琳.狂犬病病毒核蛋白基因的克隆序列分析及其在E.coli中的高效表达[J].中国兽医杂志,2006,42(11):6-9. |
| 作者姓名： | 高明华 夏咸柱 薛琳 |
| 作者单位： | 1. 吉林大学畜牧兽医学院,吉林,长春,130062;军事医学科学院军事兽医研究所,吉林,长春,130062;内蒙古扎兰屯农牧学院,内蒙古,扎兰屯,162650 2. 军事医学科学院军事兽医研究所,吉林,长春,130062 3. 吉林大学畜牧兽医学院,吉林,长春,130062;军事医学科学院军事兽医研究所,吉林,长春,130062 |
| 基金项目： | 农业部重要人兽共患病(尼帕、西尼罗、狂犬病)防制技术平台项目 |
| 摘 要： | 对狂犬病病毒（RV）ERA株核蛋白（N）基因进行了克隆和序列分析。根据GenBank中已发表的RVN基因序列，设计合成了1对特异性引物，对RV ERA株N基因进行了RT-PCR扩增。将PCR产物纯化后与pMD18T连接得到重组质粒pMD-N，并进行核苷酸序列测定。结果该基因全长1353bp，编码450个氨基酸。RV ERA株与CVS-11、PV-11、SRV9和SAD—B19株相比，核苷酸的同源性分别为98％、98．3％、99％、99.6％，推导的氨基酸的同源性分别为98％、99％、99％、99.6％。将pMD-N双酶切，回收目的基因片段并克隆到原核表达载体pET28a（＋）中，构建了重组质粒pETN；将其转化表达菌BL21（DE3）并用IPTG进行诱导表达。结果重组菌裂解物经SDS-PAGE电泳可检测到相对分子量为53kDa的重组蛋白。经凝胶薄层扫描分析，重组蛋白表达量占菌体蛋白的56．8％，Western-blot结果显示该重组蛋白能与RV多克隆抗体发生特异性反应。 |
| 关 键 词： | 狂犬病病毒 核蛋白基因 克隆 表达 |
| 文章编号： | 0529-6005（2006）11-0006-03 |
| 收稿时间： | 04 5 2006 12:00AM |
| 修稿时间： | 2006年4月5日 |
Cloning, sequence analysis and expression in E.coli of nucleoprotein gene of rabies virus |
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| GAO Ming-hua,XIA Xian-zhu,XUE Lin.Cloning, sequence analysis and expression in E.coli of nucleoprotein gene of rabies virus[J].Chinese Journal of Veterinary Medicine,2006,42(11):6-9. | |
| Authors: | GAO Ming-hua XIA Xian-zhu XUE Lin |
| Institution: | 1. College of Animal and Veterinary Science, Jilin University, Changchun 130062, China; 2. Institute of Military Veterinary, Academy of Military Medical Science of PLA, Changchun 130062, China; 3. Zha LanTun College of Agriculture and husbandry, Zha LanTun 162650, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | Rabies virus Nucleoprotein gene cloning expression |
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