| Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因克隆及其原核表达 |
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| 引用本文： | 孔留五,康艳梅,何逸民,李小康,潘全会,张桂红.Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因克隆及其原核表达[J].上海畜牧兽医通讯,2009(2):8-10. |
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| 作者姓名： | 孔留五 康艳梅 何逸民 李小康 潘全会 张桂红 |
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| 作者单位： | 华南农业大学兽医学院,广东,广州,510642 |
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| 摘 要： | 根据Genbank中的Ⅰ型鸭肝炎病毒全基因序列设计了扩增Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因的包含有EcoRV和xhoⅠ酶切位点的引物，用该特异性引物从Ⅰ型鸭肝炎病毒cDNA模板中扩增得到目的基因VP1，以相同的限制性内切酶酶切目的基因和表达载体pET32a后构建重组表达载体，经酶切及PCR鉴定筛选出阳性克隆，测序证明目的基因正确插入了表达载体，转化宿主菌RossetaⅡ，用不同浓度的IPTG诱导VP1基因的表达，收集菌液进行SDS-PAGE电泳，Western-blotting分析蛋白免疫原性。结果表明，VP1在大肠杆菌RossetaⅡ中表达量较高，表达产物的分子量约为48ku、并能被Ⅰ型鸭肝炎病毒阳性血清所识别。Ⅰ型鸭肝炎病毒VPI蛋白在大肠杆菌RossetaⅡ中表达产物具有免疫原性。
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| 关 键 词： | Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒 VP1基因 诱导表达 |
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