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猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF4/ORF5基因区间的反向遗传操作:插入外源序列特性研究
引用本文:丛雁方,张可煜,高飞,韦祖樟,郑浩,童光志,袁世山,郑海红.猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF4/ORF5基因区间的反向遗传操作:插入外源序列特性研究[J].中国动物传染病学报,2012,20(6):16-22.
作者姓名:丛雁方  张可煜  高飞  韦祖樟  郑浩  童光志  袁世山  郑海红
作者单位:1. 中国农业科学院上海兽医研究所动物传染病研究室,上海,200232
2. 中国农业科学院上海兽医研究所动物药学研究室,上海,200232
基金项目:国家自然科学基金面上项目
摘    要:猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)ORF4/ORF5基因间隔区有10个核苷酸(nucleotide,nt),为了探索ORF4/ORF5基因间隔区作为外源基因插入靶点的可行性,本研究通过突变PCR技术,获得一系列ORF4/ORF5间在不同位置插入不同碱基数及特定序列的突变体,随后进行了病毒拯救和复制分析。结果表明,在ORF4/5的10 nts间隔序列之前至少可插入13 nts;在间隔序列之后只能允许3 nts的插入;间隔序列之间能允许至少18 nts的插入,但允许插入的序列具有特异性,由此,暗示ORF4/5允许插入的外源序列与插入位置有关。本研究获得的诸多突变病毒为进一步研制PRRSV基因标识疫苗奠定了基础。

关 键 词:猪繁殖与呼吸综合征病毒  ORF4/ORF5基因间隔区  外源序列  病毒感染性

REVERSE GENETIC MANIPULATION ON A FULL-LENGTH CDNA CLONE OF PORCINE REPRODUCTIVE AND RESPIRATORY SYNDROME VIRUS:CHARACTERIZATION OF THE FOREIGN SEQUENCES INSERTED INTO THE SPACER OF ORF4/ORF5
CONG Yan-fang,ZHANG Ke-yu,GAO Fei,WEI Zu-zhang,ZHENG Hao,TONG Guang-zhi,YUAN Shi-shan,ZHENG Hai-hong.REVERSE GENETIC MANIPULATION ON A FULL-LENGTH CDNA CLONE OF PORCINE REPRODUCTIVE AND RESPIRATORY SYNDROME VIRUS:CHARACTERIZATION OF THE FOREIGN SEQUENCES INSERTED INTO THE SPACER OF ORF4/ORF5[J].Chinese Journal of Animal Infectious Diseases,2012,20(6):16-22.
Authors:CONG Yan-fang  ZHANG Ke-yu  GAO Fei  WEI Zu-zhang  ZHENG Hao  TONG Guang-zhi  YUAN Shi-shan  ZHENG Hai-hong
Institution:1(1.Department of Animal infectious Diseases,Shanghai Veterinary Research Institute,CAAS,Shanghai 200232,China;2.Key Laboratory of Veterinary Drug Safety Evaluation and Residues Research,Shanghai Veterinary Research Institute,CAAS,Shanghai 200241,China)
Abstract:
Keywords:Porcine reproductive and respiratory syndrome virus  ORF4/ORF5 spacer  foreign sequences  insertion
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