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哈萨克羊抑制素α基因原核表达载体的构建及其诱导表达
引用本文:解津刚,热衣扎别克·哈德坎,张翔宇,卢奇诚,李东升,吾热力哈孜·哈孜汗.哈萨克羊抑制素α基因原核表达载体的构建及其诱导表达[J].中国畜牧杂志,2018(7).
作者姓名:解津刚  热衣扎别克·哈德坎  张翔宇  卢奇诚  李东升  吾热力哈孜·哈孜汗
作者单位:石河子大学动物科技学院;哈萨克国立农业大学动物生物资源系
摘    要:本实验以新疆哈萨克羊睾丸组织为实验材料,提取组织总RNA,经反转录得到c DNA并以此为模板,用以Gen Bank(NM_001308579.1)序列为参考设计的特异性引物进行PCR扩增,之后将扩增产物与p ET32a(+)载体相连,构建重组质粒p ET32a(+)-INHα。将构建好的重组质粒转化到受体菌E.coli BL21中,经IPTG诱导,表达p ET32a(+)-INHα重组蛋白。对扩增产物的测序鉴定结果显示INHα基因克隆成功;经过酶切和测序鉴定确定准确构建了p ET32a(+)-INHα重组载体;经Tricine-SDS-PAGE电泳鉴定,检测到INHα基因编码区全序列表达的重组蛋白单一条带,这说明原核表达载体构建成功并在原核细胞中正常表达,这为今后绵羊INHα基因的免疫功能研究提供了参考依据。

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