| 猪圆环病毒2型Cap蛋白的可溶性表达、纯化及鉴定 |
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| 引用本文： | 孙伟,范红结,徐正军,高升.猪圆环病毒2型Cap蛋白的可溶性表达、纯化及鉴定[J].畜牧与兽医,2013,45(3). |
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| 作者姓名： | 孙伟 范红结 徐正军 高升 |
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| 作者单位： | 1. 江苏省动物疫病预防控制中心,江苏南京,210036
2. 南京农业大学动物医学院,江苏南京,210095 |
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| 摘 要： | 为获得可用于猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)抗体检测的重组抗原Cap蛋白,根据GenBank中发表的PCV2 ORF2序列设计物,以PCV2 JS株基因组为模板,PCR扩增出无核定位信号(nuclear localization signal,NLS)的ORF2基因片段,插入质粒pET-30a(+)构建重组表达质粒pET-ORF2ΔNLS,IPTG可诱导该重组菌表达约27 ku大小的重组蛋白。进一步分析发现该蛋白在大肠杆菌中主要以可溶性形式存在;镍柱亲和层析法纯化该蛋白,用PCV2阳性血清进行免疫印迹试验,结果发现纯化的重组蛋白能与PCV2抗体发生特异性反应,表明该纯化的蛋白具有很好的免疫反应原性,可用于临床样本中PCV2抗体的检测。
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| 关 键 词： | 猪圆环病毒2型 Cap蛋白 表达 纯化 鉴定 |
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