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1.
《养猪》2016,(2)
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是对养猪业有重大影响的顽固性疾病。临床上表现为怀孕母猪发生流产、早产、死胎等繁殖障碍,仔猪和肥育猪出现呼吸衰竭,并伴随生长缓慢,流行范围广,病死率高。血液中的PRRS抗体检测在疾病诊断、免疫水平评估中有着重要作用。但血液样品采集有工作量大、对动物造成伤害、威胁采集人员安全等缺点。近年来有报道利用口腔液检测PRRS抗体,结果与血液中PRRS抗体含量具有很好的相关性。而本试验主要比较不同的样品采集处理方法对结果的影响,结果显示,口腔液的稀释倍数对检测结果影响较大,因此必须选择敏感性较高的检测试剂盒,如蓝耳病抗体检测试剂盒血清40倍稀释时,与口腔液2倍稀释的结果才有较高的相关性。 相似文献
2.
猪繁殖--呼吸综合症(PRRS)抗体免疫金标快速检测试纸的研制与应用 总被引：11，自引：1，他引：11
应用酶联免疫吸附原理和胶体金层析技术，在玻璃纤维和硝酸纤维素膜的检测线和对照线上分别喷上胶体金PRRSV，PRRSV和兔抗PRRS抗体，从而制作成猪PRRS抗体免疫金标试纸，用该试纸与PRRS—ELISA试剂盒分别对30份猪血清及血液样品进行抗体水平检测，结果完全一致。说明金标试纸法是一种微量、特异、简便和结果容易判定的新的检测方法，非常适用于基层兽医站和猪场，特别是进行现场检测和开展大规模疫情普查时使用。 相似文献
3.
《畜牧与兽医》2020,(8)
试验采用阻断ELISA试剂盒和间接ELISA试剂盒,分别对人工感染猪和自然感染猪进行了猪圆环病毒2型(porcine circovirus 2, PCV2)抗体检测。结果显示:PCV2攻毒组和PCV2攻毒后佐剂KHL刺激组试验猪用两种ELISA试剂盒检测,检测结果基本一致。PCV2抗体均于攻毒后2～3周出现,6～8周达到最高,至第16周仍维持较高水平。PCV2攻毒后佐剂刺激组猪产生的抗体水平明显高于PCV2攻毒组。PCV2自然感染猪用两种ELISA试剂盒检测,检测结果一致。断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)发病猪抗体阳性率为99%,PMWS亚临床感染猪抗体阳性率为95%,PMWS发病猪抗体水平多数高于亚临床感染猪。 相似文献
4.
《畜牧与兽医》2017,(1):80-85
从浙江某规模猪场分别采集不同日龄商品猪口腔液与血清样本,应用实时定量PCR和ELISA方法,分别检测2种体液中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的抗原和抗体水平,并分析其消长规律。结果提示:2种病毒各自的特异性抗体在口腔液和血清中的消长规律基本一致。相比血清,口腔液中的母源抗体存续时间更长(3周),主动免疫后产生特异性抗体的时间则更晚(3周)。口腔液中PRRSV和PCV2的感染动态规律,与血清和口腔液抗体的消长规律也具有很好的相关性,在出现病毒感染高峰后,血清和口腔液特异性抗体转阳,其中血清抗体的转阳反应更为迅速(3周)。本研究为进一步发展猪群口腔液检测系统提供了临床依据。 相似文献
5.
为分析使用棉绳采集口腔液监测猪场伪狂犬病（PR）方法的科学性,本研究拟通过实验室水平、动物试验及临床应用3个方面对使用棉绳采集口腔液监测猪场PR这一方法开展应用分析。首先对采样条件进行优化,并通过模拟试验测定棉绳对伪狂犬病病毒（PRV）的释放能力,通过动物试验测定病毒感染后检出时间,最后对临床样品进行检测分析。结果表明：使用直径为1.0 cm的棉绳,在早上喂料前采集口腔液样品,采样时间为20~30 min,可采集到更能满足试验要求的口腔液。病毒释放能力测定显示,棉绳对PRV的释放能力为50%左右,使用棉绳采集口腔液可检测到1个TCID50/0.1 mL的病毒含量。动物试验检测发现,猪群在感染后28 d中除第5天外,口腔液中病原含量均高于鼻拭子中病原含量,口腔液检测效果优于鼻拭子,且口腔液中病毒的检出时间（感染后第1天）早于血液中抗体转阳时间（感染后第7天）。临床样品检测分析结果表明,PRV疫苗免疫后也可通过口腔液检测到疫苗毒,并且存在无法通过口腔液检测感染PRV野毒后稳定猪中带毒的情况,因此口腔液检测方法应结合gE抗体检测,才可综合判断猪群是否为感染群体。综上,本研究优化了口腔液采集方法,并测定了棉绳对口腔液的释放能力和感染后检出时间,表明口腔液可作为较好的监测猪群PR的手段;口腔液监测方法需结合gE抗体检测来综合判断猪群是否为感染群体。 相似文献
6.
为分析使用棉绳采集口腔液监测猪场伪狂犬病(PR)方法的科学性,本研究拟通过实验室水平、动物试验及临床应用3个方面对使用棉绳采集口腔液监测猪场PR这一方法开展应用分析。首先对采样条件进行优化,并通过模拟试验测定棉绳对伪狂犬病病毒(PRV)的释放能力,通过动物试验测定病毒感染后检出时间,最后对临床样品进行检测分析。结果表明:使用直径为1.0 cm的棉绳,在早上喂料前采集口腔液样品,采样时间为20~30 min,可采集到更能满足试验要求的口腔液。病毒释放能力测定显示,棉绳对PRV的释放能力为50%左右,使用棉绳采集口腔液可检测到1个TCID50/0.1 mL的病毒含量。动物试验检测发现,猪群在感染后28 d中除第5天外,口腔液中病原含量均高于鼻拭子中病原含量,口腔液检测效果优于鼻拭子,且口腔液中病毒的检出时间(感染后第1天)早于血液中抗体转阳时间(感染后第7天)。临床样品检测分析结果表明,PRV疫苗免疫后也可通过口腔液检测到疫苗毒,并且存在无法通过口腔液检测感染PRV野毒后稳定猪中带毒的情况,因此口腔液检测方法应结合gE抗体检测,才可综合判断猪群是否为感染群体。综上,本研究优化了口腔液采集方法,并测定了棉绳对口腔液的释放能力和感染后检出时间,表明口腔液可作为较好的监测猪群PR的手段;口腔液监测方法需结合gE抗体检测来综合判断猪群是否为感染群体。 相似文献
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8.
在漯河市某养殖场随机选取2栋(保育13和保育17)健康状况良好的保育猪进行猪蓝耳病(PRRS)疫苗不同免疫剂量的效果试验,每栋舍中猪只随机分为四组(A、B、C、D组),分别免疫不同剂量的蓝耳病疫苗。每组猪群均随机选取15头仔猪标记,分别在免疫前、免疫后7、14、21、28 d进行采血,采用酶联免疫(ELISA)检测试剂盒检测PRRSV抗体水平。结果显示,猪群首次免疫蓝耳病疫苗后第2周抗体水平达到高峰,之后有所下降;不同剂量的疫苗免疫,猪群整体抗体变化趋势一致,说明低剂量的蓝耳病毒即可引起猪群的感染。 相似文献
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本研究采用3种不同的猪繁殖与呼吸综合征病毒（procine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV）抗体检测试剂盒对仔猪母源抗体和免疫猪抗体消长规律进行了比较分析,以期为猪群PRRSV抗体监测提供试剂盒选择依据。将10头PRRSV、PCV2病原双阴性仔猪随机分为2组,每组5头,2组仔猪分别于14日龄及PRRSV母源抗体转阴后免疫高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗,于14、21、28、35、42、49、56、70、84、98日龄采血并分离血清,分别用3种商品化PRRSV抗体检测试剂盒检测抗体水平,同时检测母猪分娩后14 d抗体水平;结果显示,试剂盒A与试剂盒C的Kappa值=0.784＞0.6,试剂盒A与试剂盒C高度一致;试剂盒B与试剂盒A、试剂盒B与试剂盒C的Kappa值分别为0.422、0.374,试剂盒B与试剂盒A一致性中度,试剂盒B与试剂盒C一致性较弱。母源抗体监测表明,3种试剂盒检测的PRRSV母源抗体均在42日龄左右转阴。试剂盒A与试剂盒C所检测的PRRSV相关抗体在免疫后1周即产生,3周即可达到峰值,而试剂盒B所检测的PRRSV相关抗体在免疫后3周产生,5周达到峰值。本研究为3种试剂盒对临床PRRSV的抗体监测和免疫评估提供了试验依据。 相似文献
11.
20日龄的仔猪免疫猪圆环病毒2型灭活疫苗,使用ORF2－ELISA方法监测免疫前后的抗体水平,免疫前、免疫2周、免疫3周、免疫4周采集血清,检测结果可以看出,猪群的PCV－2抗体阳性率提高,免疫后4周抗体滴度达到较高水平;免疫组日增重、存活率、净增重均比对照组提高,而且饲料利用率高,药物治疗费由5．67元降低到4．95... 相似文献
12.
使用国产的4种猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体ELISA诊断试剂盒(VP1-ELISA)、猪口蹄疫O型液相阻断ELISA检测试剂盒(LB-ELISA)、猪口蹄疫正向间接血凝试剂盒、猪O型口蹄疫病毒ELISA抗体检测试剂盒(O-ELISA)同时检测猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫后的50份血清样品,阳性率分别为98.0%、94.0%、54.0%、90.0%。同时使用农业部规定的3种试剂盒分别检测20份血清样品的抗体滴度发现,VP1-ELISA试剂盒和LB-ELISA试剂盒阳性符合率为95%,平均抗体滴度相差0.7,与IHA试剂盒符合率为55%,平均抗体滴度相差3.8,故LB-ELISA试剂盒可以用来评价合成肽疫苗免疫的抗体,而IHA试剂盒不能用来检测合成肽疫苗免疫的抗体。 相似文献
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为了探究猪血清与口腔液中免疫抗体含量的相关性,采集32头育肥猪的口腔液和血清样品,采用检测试剂盒分别检测两种体液中猪瘟病毒、O型口蹄疫病毒和猪伪狂犬病毒的抗体水平,并分析两种体液中抗体含量的关系。结果表明:口腔液与血清中猪瘟病毒免疫抗体含量差异显著(P0.05),且无明显的相关性;口腔液与血清中O型口蹄疫病毒抗体含量之间有相关性,存在显著差异(P0.05);口腔液不稀释组与血清2倍稀释组中猪伪狂犬病毒抗体含量之间有相关性,存在显著差异(P0.05)。说明目前还不能通过直接检测口腔液中抗体的方法来代替血清抗体的评估和检测,口腔液在兽医检测中的运用还有许多问题。 相似文献
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《中国兽医学报》2015,(9):1495-1500
为探讨不同中药多糖对猪蓝耳病(PRRS)卵黄抗体效价的影响,本试验采用水提法制备卵黄水提液,2次盐析法纯化卵黄抗体(IgY),SDS-PAGE法检测精制卵黄抗体的纯度。采用棋盘法确定了抗原最佳包被浓度和酶标二抗最佳工作浓度,建立了PRRS特异性卵黄抗体ELISA检测方法。并用PRRS疫苗4种不同免疫剂量免疫蛋鸡,确定最佳免疫方法。选择桑叶多糖、杜仲多糖、桑叶杜仲多糖、地黄多糖和藿蜂酮注射液饮水给药与PRRS疫苗联合免疫蛋鸡,通过卵黄抗体效价变化考察不同中药多糖的免疫增强作用。结果显示:选择抗原的最佳包被浓度为10-9,酶标二抗的最佳工作浓度为1:5 000,卵黄WFS的最佳稀释度为2-6;鸡肌注0.2mL/羽PRRS疫苗,在免疫后2~6周产生的抗体效价最高;鸡在免疫的同时以4mg/羽的剂量饮水给以桑叶杜仲复方多糖,连续3d,在免疫后的第2~9周卵黄抗体效价均最高,优于其他各组。以上结果表明,桑叶杜仲复方多糖饮水给药配合疫苗一起使用能显著提高PRRS卵黄抗体效价,可作为免疫增强剂使用。 相似文献
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不同类型猪蓝耳病疫苗的免疫探讨 总被引：4，自引：1，他引：3
为科学评价不同猪蓝耳病疫苗免疫效果,选取19个规模猪场,分别使用蓝耳病国产弱毒疫苗、进口弱毒疫苗、普通灭活疫苗、猪高致病性蓝耳病疫苗进行免疫,免疫1月后,采集免疫猪群的血清与全血样品,进行PRRSV病原学和免疫抗体检测,结果显示:国产弱毒疫苗、进口弱毒疫苗、普通灭活疫苗、高致病性猪蓝耳病灭活疫苗、对照组抗体阳性率分别为86.40%、76.10%、36.70%、49.30%、31.17%。使用PRRS弱毒疫苗免疫组PRRSV变异株检出率较高,使用高致病性PRRS灭活疫苗免疫组PRRSV普通株检出率较高。此结果提示PRRS疫苗免疫后能产生一定的保护性抗体水平,但交叉免疫保护性较差。对于PRRS的防控,关键在于提高猪群PRRS抗体的水平与整齐度,同时加强饲养管理。 相似文献
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为建立一种敏感、特异、快速、高通量的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体血清学检测方法,本研究利用原核表达技术表达了PRRSV M蛋白,将纯化后的重组M蛋白作为包被抗原建立了检测PRRSV抗体的间接ELISA方法。参照已发表的PRRSV基因组M基因序列,设计合成1对特异性引物,RT-PCR扩增了长约435 bp的M基因片段,将目的片段亚克隆至pET32a(+)表达载体中,经IPTG诱导获得了以包涵体形式表达的重组M蛋白,重组蛋白纯化后,免疫印迹检测结果表明具有良好的抗原性和特异性。以重组M纯化蛋白为包被抗原,经间接ELISA反应条件的优化,建立了检测PRRSV抗体的间接ELISA方法,该方法检测猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪圆环病毒2型(PCV2)其他6种常见猪病病原的阳性血清均为阴性;该方法批内与批间重复性试验的变异系数分别小于5%和10%;该方法与商品化ELISA试剂盒的符合率为95.3%。本研究建立的M-ELISA检测方法将为猪群免疫PRRS疫苗后抗体水平监测及PRRSV野毒感染的快速诊断与流行病学调查等提供了一种简便易行、快速、高通量的血清学抗体检测方法。 相似文献
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为了鉴别免疫猪群3ABC抗体阳性猪是免疫动物受到病毒感染引起的,还是疫苗中残留的非结构蛋白引起的,通过检测免疫动物体内的3ABC抗体和病毒感染情况,探讨3ABC抗体的出现与免疫剂量的关系。选取60日龄保育猪20头,分成A、B、C、D 4个组,分别注射猪口蹄疫O型灭活疫苗(OS/99株)1、2、4、6m L/头。每组猪分别在免疫前1 d以及免疫后3、7、14、30和60 d,采集血清和鼻咽拭子,使用口蹄疫3ABC间接ELISA检测试剂盒、口蹄疫多重RT-PCR检测试剂盒以及病毒分离试验,检测3ABC抗体和病毒感染情况,发现保育猪在低剂量(1 m L/头或2 m L/头)免疫后没有检测到非结构蛋白抗体,而高剂量(4 m L/头或6m L/头)免疫后出现非结构蛋白抗体阳性率升高,而且出现非结构蛋白抗体阳性的动物中没有检出病毒感染或病毒核酸。检测结果提示这些免疫猪群非结构蛋白抗体的形成与免疫剂量有关。 相似文献
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兔瘟是一种急性、热性、败血性和毁灭性的传染病,发病率和死亡率极高,是目前危害我国养兔业最重要的疫病之一。间接ELISA抗体检测方法是兔瘟血清学抗体水平检测的主要方法,在兔瘟的诊断、流行状态的监测和流行病学调查等方面得到了广泛应用。为了评价兔瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒在兔瘟抗体检测中的应用效果,利用兔瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒对2012年采集于河南、河北、山东等地的818份免疫兔血清进行了检测,并进行了间接ELISA抗体检测试剂盒与间接血凝抑制试验(HI)的符合率研究。结果显示两者的符合率达94.0%,说明ELISA试剂盒具有良好的临床适用性和准确性,非常适用于兔场免疫后兔群的抗体水平监测。 相似文献
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猪乙型脑炎（Epidemic Encephalitis B）是由日本乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus, JEV）引起的一种急性人兽共患传染病,猪主要特征表现为高热、流产、产死胎和公猪睾丸炎,感染率较高,发病率和死亡率较低,对国内养猪业和公共卫生都带来了巨大威胁。间接ELISA抗体检测方法具有价格低廉、操作简单、高通量、敏感性高、特异性强等优点,是猪乙型脑炎血清学抗体水平检测的主要方法。研究利用猪乙型脑炎间接ELISA抗体检测试剂盒对2012-2013年采集于山东、河南、河北等地的526份免疫猪血清样品进行了抗体检测,并进行了间接ELISA抗体检测试剂盒与乳胶凝集试验抗体检测试剂盒的符合率研究。旨在评价猪乙型脑炎间接ELISA抗体检测试剂盒的临床适用性及准确性,进而评价其临床应用效果,同时掌握我国猪乙型脑炎疫苗的群体免疫效果,了解我国部分地区猪乙型脑炎的免疫现状,为猪乙型脑炎的综合防控提供参考依据。 相似文献