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相似文献
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1.
自从1971年Faulk与Taylor创立胶体金标记技术以来,胶体金被引入免疫化学中,成为继荧光标记、酶标记和放射性免疫标记之后的又一种新型的免疫标记技术。目前该技术在医学快速检验中的应用主要是用于妊娠检测、病原体抗原或抗体检测、药物滥用检测、疾病相关蛋白检测等。该技术在动物疫病诊断方面的应用虽然起步较晚,但发展迅速。其中,免疫胶体金层析技术已成为当今兽医快速检测中最快速敏感的免疫学检测技术之一。  相似文献   

2.
免疫胶体金技术是以胶体作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型免疫标记技术,没有潜在致癌物质的酶显色底物。斑点金免疫渗滤测定法是将斑点酶标与免疫胶体金结合起来的一种新型免疫标记技术。该测定方法是将被检抗体(血清或血纸浸出液)直接点样在硝酸纤维素膜上,滴加胶体金标记的血吸虫抗原,特异性抗原与抗体很快结合,在反应处发生金颗粒聚集,1min左右形成肉眼可见的红色斑点,判定检测效果。  相似文献   

3.
免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术,没有潜在致癌物质的酶显色底物。斑点金免疫渗滤测定法是将斑点酶标与免疫胶体金结合起来的一种新型的免疫标记技术。将被检抗体(血清或血纸浸出液)直接点样在硝酸纤维素膜上,滴加胶体金标记的血吸虫抗原,特异性抗原与抗体很快结合,在反应处发生金颗粒聚集,1min左右形成肉眼可见的红色斑点。  相似文献   

4.
荧光抗体法检测猪细小病毒   总被引:1,自引:0,他引:1  
猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)为引起母猪繁殖障碍性疾病的主要病原之一.猪细小病毒感染的主要特征是孕猪在怀孕前容易受到感染,可引起胚胎或胎儿的感染和死亡,导致母猪发生流产,死胎,胎儿木乃伊化及新生仔猪的死亡.目前,国内外检测猪细小病毒的方法主要有原位杂交、银加胶体金检测法、ELISA双抗体夹心法、聚合酶链反应和荧光抗体法等.免疫荧光技术是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应.笔者认为荧光抗体法较适用,而关于此方法的报道甚少,因此进行了以寻求快速、特异的直接荧光抗体检测方法为目的的研究.  相似文献   

5.
自Coons等(1942)引入抗体标记技术以来,多种标记抗体免疫测定技术,如荧光抗体技术(FA)、放射免疫测定技术(RIA)、酶免疫测定技术(EIA)等业已得到广泛的应用,已成为微生物学工作的重要手段和方法。但是标记抗体也有其自身的缺点,如:荧光抗体技术要求被检材料中含有大量的细菌或病毒等抗原;放射免疫测定虽然敏感,但放射性同位素的使用费用较大而且必需配备严格的安全措施。这使得基层单位难以开展此项工作。 EIA方法具有RIA的敏感性和FA的安全性,用于  相似文献   

6.
酶标技术是一项七十年代发展起来的新技术。它除具有荧光标记技术、同位素标记技术的快速敏感和试验结果客观等优点外,还具有操作简便、安全、不需特殊仪器、制剂可长期保存、特异性高等优点。酶标法检测抗体可达到毫微克级水平。现  相似文献   

7.
本文采用胰酶分散法制备抗原,建立了间接荧光抗体法。用此法对人工感染鸡、人工感染鸡胚及自然发病鸡的抗原进行了测定,结果,人工感染鸡肾脏于72~168h100%检测到特异性荧光,其余时间部分鸡检出特异性荧光;人工感染后病死鸡肾脏均100%检测到特异性荧光;人工感染鸡胚于48~120h100%检测到特异性荧光,其余时间部分检出特异性荧光;178例自然发病病例中检出抗原阳性病例153例。对抗原检测的结果与冰冻切片制备抗原建立的间接荧光抗体法完全一致。用胰酶分散法制备抗原,对已知阳性血清和待检血清进行检测,检测结果与用冰冻切片法制备抗原检测结果一致。该法将检测程序简化,检测时间明显缩短,适合于临诊应用及对鸡群进行抗体监测  相似文献   

8.
免疫荧光检测技术及其在寄生虫检测中的应用进展   总被引:1,自引:0,他引:1  
免疫荧光技术(immunofluorescence technique)是在生物化学、显微镜技术和免疫学基础上发展起来的一项检测技术,是用荧光标记的抗体或抗原与被检样品中相应的抗原或抗体结合,在显微镜下检测荧光,并对样品进行分析的方法。它把显微镜技术的精确性和免疫学检测的特异性、敏感性有机地结合在一起。这一方法的特点是特异性强、灵敏度高。作为一种快速诊断方法,目前广泛应用于病毒、细菌病的诊断,也是许多动物寄生虫病(如弓形虫病)的常规诊断方法。随着标记抗体、抗原的普及,免疫荧光技术在寄生虫病诊断方面的应用将更加广泛。  相似文献   

9.
以鸽抗鸡劳氏肉瘤病毒(RSV)血清IgG作为包被抗体及酶标抗体的双抗体夹心法Dot-ELISA,检测禽白血病病毒抗原,其特异性及敏感性与澳大利亚ELISA(用兔抗AMV-P_(27)血清IgG作为包被抗体及酶标抗体)相同。可用以检测卵清中禽白血病病毒抗原及用鸡胚或鸡胚细胞生产的各种疫苗中污染的禽白血病病毒抗原。  相似文献   

10.
1荧光抗体技术某种物质当受到短波光线如紫外线激发后,能放出波长比激发光长的可见光称为荧光,染料经激发后放出荧光称为荧光染料,将荧光染料连接到提纯的抗体分子上,此种抗体称为荧光抗体。荧光抗体与相应的抗原结合后,形成带有荧光的抗原抗体复合物,可在荧光显微镜下检测,常用的荧光染料有异硫氰酸荧光黄和异硫氰酸罗丹明B等。  相似文献   

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<正>近几年,随着人民生活水平的提高,畜产品作为食品在人民的生活中所占的比例越来越大,其质量安全也越来越受到人们的关注。为了确保可食性畜产品的质量安全,需要一种快速、简便、灵敏度高的检测技术,酶联免疫吸附试验具备这些优点。酶联免疫吸附试验3个基本构成条件为:1)抗原抗体的固相化,即使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。2)抗原抗体的酶标记,即使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗  相似文献   

12.
炭凝集试验是以活性炭为载体,事先将抗原或抗体吸附在活性炭微粒上,然后用此种带有抗原或抗体的活性炭微粒,检测相应的抗体或抗原,根据活性炭微粒的凝集来判定被检材料中是否有相应的抗体或抗原的存在,从而确诊疾病。由于此试验具有操作简便、快速而敏感性和特异性高的特点,因  相似文献   

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固定细胞免疫过氧化物酶技术是近年推出的新方法,用于检测和分析病毒诱导抗原及细胞表面受体,是细胞酶联免疫吸附试验(ELISA)的发展。这种技术克服了以前许多方法的不足。现将其原理、方法及应用情况浅述如下:一、原理将病毒感染的单层细胞或靶细胞用化学试剂(多聚甲醛或丙酮)固定在微量平底96孔塑料培养板上,加适量的特异性抗体(单抗)作用后洗涤,用过氧化物酶标记的抗小鼠 FC 抗体封闭抗原抗体复合物,然后加底物 H_2O_2,终止反应后测其415nm的 OD 值。二、方法1.病毒感染细胞敏感细胞以单层培养在96孔平底塑料培养板上,待细胞生长成密集的单层,  相似文献   

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非洲猪瘟是一种由非洲猪瘟病毒引发的猪的急性、高致死性传染病。目前还没有可用的疫苗,因此采取快速、高效、精准的诊断检测技术对于防控疫情至关重要。目前可用于非洲猪瘟的诊断技术主要有病原学检测、血清学检测两个方面,其中病原学检测主要分为病毒分离法、红细胞吸附法和核酸检测。目前已经开发出荧光定量PCR检测、微滴数字PCR、多重PCR等技术。抗原检测一般采用荧光抗体试验;抗体检测主要采用酶联免疫吸附实验或间接荧光抗体试验。不同的检测技术特点不同,呈现的准确率也有差异。  相似文献   

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血清中和试验 动物受到病毒感染后,体内产 生特异性中和抗体,并与相应的病 毒粒子呈现特异性结合,因而阻止 病毒对敏感细胞的吸附,或抑制其 侵入,使病毒失去感染能力。中和 试验是以测定病毒的感染力为基 础,以比较病毒受免疫血清中和后 的残存感染力为依据,来判定免疫 血清中和病毒的能力。 酶联免疫吸附试验(ELISA) ELISA 是酶联免疫吸附剂测定 的简称。它是继免疫荧光和放射免 疫技术之后发展起来的一种免疫酶 技 术 。       原理 ELISA 的基础是抗原或抗体的 固相化及抗原或抗体的酶标记。结 合在固相载体表面的抗原或…  相似文献   

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将抗番鸭GPV单抗腹水采用透析法标记异硫氰酸荧光素(FITC),制备成抗GPV荧光抗体,研制检测GPV抗原的直接免疫荧光诊断方法。结果显示GPV荧光抗体仅与GPV阳性的组织切片或细胞呈现特异性荧光,与番鸭细小病毒(MPV)、番鸭呼肠孤病毒(MDRV)、鸭副粘病毒(DPMV)、鸭病毒性肝炎病毒(DHV)和正常番鸭组织切片不反应;与间接荧光方法的符合率为92.9%。表明GPV荧光抗体具有较好的特异性、敏感性和准确性,可用于临床快速诊断番鸭小鹅瘟病。  相似文献   

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为了建立一种快速、敏感、特异的检测犬冠状病毒(CCV)的方法,利用感染CCV的犬肾传代细胞包被酶联反应板,以辣根过氧化物酶标记的金黄色葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA)作为第2抗体,建立了检测CCV抗体的间接ELISA方法。抗原的包被量为每孔3×104个染毒细胞,酶标抗体的工作浓度为1∶40。试验发现,包被的病毒抗原经甲醇固定30min后可以提高试验的敏感性,减少病毒抗原的使用量。与中和试验比较证实,2种抗体检测方法的测定结果呈正相关  相似文献   

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5.3.2.5 免疫荧光技术(IFT) 免疫荧光技术就是荧光抗体技术(FAT)。IFT早在1961年就开始用于人类流感的快速诊断。1984年美国宾西法尼亚州爆发禽流感时Skeeles将IFT首次用于AIV的检测。IFT最早用于病毒的鉴定和定位病毒感染细胞中特异性抗原,主要是核内荧光;用MP抗原的荧光抗体主要出现胞质荧光,核内也有部分荧光。  相似文献   

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免疫学在兽医中侧重于免疫血清学诊断和免疫防治。在疾病的诊治中更是依靠免疫学诊断技术快速、准确地诊断出传染病病原和传播途径,对于传染病的预防控制尤为重要。免疫学检测即是根据抗原、抗体反应的原理,利用已知的抗原检测未知的抗体,或是利用已知的抗体检测未知的抗原。由于外源性和内源性抗原均可通过不同的抗原递呈途径诱导生物机体的免疫应答,在生物体内产生生物T细胞的克隆扩增和效应增强,并分泌特异性的免疫球蛋白-抗体。由于抗原抗体结合具有特异性和专一性的特点,这种检测可以定性、定位、定量地检测某一特异的抗原或抗体。  相似文献   

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正液相阻断ELISA,是检测口蹄疫病毒抗体的国际标准,敏感性高,特异性强,判定结果客观,主要用于检测抗体,评价FMD疫苗的免疫效力,也就是疫苗免疫动物的抗强毒攻击能力。目前,民乐县动物疫病预防控制中心广泛采用ELISA法检测口蹄疫免疫抗体,评价免疫效果,为全县动物疫情预警提供有效依据。1 ELISA实验基本原理ELISA是在免疫酶技术的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术,过程包括抗原(抗体)吸附在固相载体上称为包被,加待测抗体(抗原),再加相应酶标记抗体(抗原),生成抗原(抗体)-  相似文献   

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