常见的家禽骨骼疾病     

吴绍强 《国外畜牧科技》1994,21(6):38-38

  相似文献   

罗斯河病毒RT-LAMP检测方法的建立     

袁向芬  冯春燕  吕继洲  吴绍强 《中国动物检疫》2018,35(12):75-79

根据Gen Bank中收录的罗斯河病毒(RRV)基因序列,以其保守的E2基因为靶序列,设计并筛选出一套特异性LAMP引物;通过优化反应条件,最终建立了RRV RT-LAMP检测方法,并对其灵敏度、特异性进行了验证。结果显示:本方法对RNA样本的最低检测限可达10拷贝/25μL,而荧光RT-PCR方法和常规RT-PCR方法的灵敏度分别为10拷贝/25μL、100拷贝/25μL;其特异性良好,不与同属或相似病毒发生交叉反应。结果表明,本方法灵敏、特异、快速、便捷,可应用于我国虫媒病高发区的RRV筛查预警。  相似文献   

猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪轮状病毒A多重荧光定量RT-PCR检测方法的建立     

李军  蔡良语  陈兵  刘建利  孙洁  陈书琨  林庆燕  陶虹  吴绍强  卢体康  陈金顶  秦智锋 《中国预防兽医学报》2018,(9)

为对引起腹泻症状的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪轮状病毒A(PRoVA) 3种病毒同时快速地鉴别检测,本研究对GenBank中登录的TGEV的S基因、PEDV的S基因、PRo VA的NSP基因进行序列分析,分别设计了针对3种病毒的特异性引物和用3种荧光基团标记的核酸探针,通过条件优化建立了针对这3种病毒的多重荧光定量RT-PCR方法。结果显示,该方法能够特异性检测PEDV、TGEV和PRo VA,而与其它病原无交叉反应;对TGEV、PEDV和PRo VA的最低检测量分别为1.12拷贝/μL、39拷贝/μL和25拷贝/μL;组内和组间变异系数均小于5%;该方法与商品化的试剂盒检测结果符合率达100%。该方法快速、敏感,检测结果准确可靠,为猪病毒性腹泻疾病的流行病学调查和分子生物学快速诊断奠定了基础。  相似文献   

转人血清白蛋白基因奶牛多重PCR快速检测方法的建立     

朱振营  林祥梅  刘建  吴绍强  仇松寅  王建武  薛振华 《动物医学进展》2010,31(Z1)

建立转基因奶牛多重PCR快速检测方法,为转基因动物及产品进出境监测技术平台的建立提供技术支持,并为转基因动物及产品检测技术标准的制定提供参考。根据转基因奶牛内源基因β2-微球蛋白基因(β2-microglobulin,B2 M),外源基因人血清白蛋白基因(Human α-lactalbumin,α-LA)及标记基因绿色荧光蛋白基因(EGFP)和新霉素磷酸转移酶基因(NPTII)设计特异性引物,优化反应条件,建立转基因奶牛多重PCR检测方法。该方法敏感、快速、特异,一个反应可以检测多个基因片段,可有效用于转基因奶牛外源基因的检测。  相似文献   

应用cDNA微阵列芯片技术筛选猪蛔虫性别差异表达基因的研究   总被引：6，自引：0，他引：6  

邹丰才  吴绍强  廖申权  林瑞庆  李明伟  宋慧群  黄翠琴  朱兴全 《畜牧兽医学报》2006,37(2):163-167

采用cDNA微阵列芯片技术，从所构建的猪蛔虫雌、雄成虫cDNA消减文库分别挑取1044和1119个克隆，PCR扩增其插入片段，经纯化后点样于预先处理好的基片上（双点杂交），制备成cDNA微阵列芯片。将分别标记荧光素Cy3-dUTP和Cy5-dUTP的雌虫和雄虫cDNA探针，与制备好的cDNA芯片杂交（平行进行反标杂交试验）。根据每个点杂交后的Ratio值，筛选出双点杂交和正反标中都同时具有表达差异的基因克隆共1559个。将表达差异最明显的前831个克隆进行测序，获得720个有效序列，经生物信息学分析发现，雄虫特异表达的主要精于蛋白和雌虫特异表达的卵巢信息蛋白的基因序列多数与新杆属线虫存在同源性，有31个可能是新的ESTs。性别差异表达基因及其相关生物信息的获得为下一步研究基因功能奠定了基础。  相似文献   

检科1号消毒剂带鸡消毒对鸡的急性与亚慢性毒性影响     

林祥梅  梅琳  刘建  韩雪清  吴绍强  张顺和  张伟  马超英 《现代畜牧兽医》2006,(9):8-11

为评价检科1号消毒剂对鸡只的急性刺激和亚慢性毒性影响，将AA肉鸡分成8个试验组，其中4个试验组用于急性刺激试验，4个试验组用于亚慢性毒性试验。急性刺激试验采用4个不同的喷雾浓度：空白对照（自来水）、喷雾使用浓度组（按说明书喷雾使用浓度）、5倍喷雾使用浓度组、10倍喷雾使用浓度组；亚慢性毒性试验采用喷雾1次加4个不同的饮水浓度：自来水、1倍饮水浓度、5倍饮水浓度、10倍饮水浓度。试验结果表明，检科1号消毒剂在使用浓度时对鸡只的急性刺激作用较小，对鸡只的血液学指标、组织学等方面几乎没有影响，对鸡只的增重亦没有显著影响。这表明检科1号消毒剂用于带鸡消毒是安全的。  相似文献   

食源性寄生虫病的危害及检测研究现状   总被引：4，自引：0，他引：4  

孙晓智  吴绍强 《中国畜牧兽医》2007,34(8):104-106

作者就近年来国内外危害严重的蛔虫、广州管圆线虫、异尖线虫、弓形虫、贾第鞭毛虫和隐孢子虫、卫氏并殖吸虫、华支睾吸虫等几种寄生虫引起的食源性寄生虫病的危害和检测研究现状进行了综述。  相似文献   

球虫感染对鸡血液中锌铁含量的影响     

吴绍强  胡孝忠 《中国农业大学学报》1998,(Z2)

利用15日龄商品代 AA 内仔鸡作为试验对象,研究鸡在人工感染柔嫩艾美耳球虫后,其血浆中锌、铁元素含量的变化及其规律.在无球虫环境中将试验鸡饲养至15日龄,称重后选择体重相近的随机分为两组,即不感染空白对照组和感染试验组,感染组各鸡径口嗉囔内接种1×10~5个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,感染后第3,5,7,9,12天,从各组随机抓取8只鸡,心脏采血,肝素抗凝后离心分离血浆,血浆经硝酸消化后,用 ICP/6500电感  相似文献   

四种核酸染料对用LAMP方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的影响     

袁向芬  吴绍强  林祥梅 《中国动物检疫》2015,32(2):72-77

本研究旨在建立一种基于颜色变化的北美洲型猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)RT-LAMP检测方法及结果判定方法,方便LAMP技术的现场检测应用。根据Gen Bank中美洲型PRRSV的保守序列设计一套LAMP引物,对反应进行优化后建立了PRRSV LAMP检测方法。对比Dye63、钙黄绿素(Calcein)、SYBR Green I和Picogreen 4种核酸染料对于LAMP反应的适用性。结果显示,只有Calcein、Dye63适于LAMP反应前加入,但对扩增效率均产生一定抑制,造成反应时间延迟:Calcein的延迟作用更强(约10min),Dye63延迟作用较小(约5min)。加入Dye63的LAMP反应灵敏度为2×101拷贝,而加入Calcein的灵敏度要低10倍。经多功能酶标仪对荧光强度的检测,含Dye63的反应阴阳性差异明显,可用于LAMP反应结果的判定。据此建立的基于新型核酸染料Dye63的PRRSV RT-LAMP检测方法操作简单、方便、直观,可大大减少环境污染造成的假阳性。Dye63有望成为继Calcein之后,可用于LAMP反应前加入,反应后闭管判定的一种新核酸染料,方便LAMP检测技术现场应用。  相似文献   

草鱼呼肠孤病毒抗原捕获ELISA检测方法的建立     

景宏丽  曹欢  张旻  王娜  林祥梅  张利峰  吴绍强 《中国动物检疫》2014,31(12):78-81

研究以纯化的羊抗草鱼呼肠孤病毒多克隆抗体作为捕获抗体,抗草鱼呼肠孤病毒的单克隆抗体为检测抗体,建立草鱼呼肠孤病毒抗原捕获ELISA检测方法,其最佳反应条件是：羊多克隆抗体包埋浓度为2.5μg/mL,抗草鱼呼肠孤病毒单克隆抗体工作浓度为1:400稀释,以3％牛血清白蛋白作为封闭液。该方法的检测限为5×105 pfu/mL,且能够特异性检出发病草鱼内脏组织中的草鱼呼肠孤病毒。特异性试验结果表明该方法具有较高的特异性,与病毒性出血性败血症病毒、传染性造血器官坏死病毒和鲤春血症病毒等水产动物病毒株均不反应。该方法还具有较好的稳定性。  相似文献