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1.
[目的]研究外源多胺促进霍山石斛类原球茎芽的发生与过氧化氢(H_2O_2)代谢酶活性的关系。[方法]主要测定了外源多胺处理后H_2O_2的动态变化和代谢酶的活性。[结果]外源多胺在有效促进芽发生的同时也能显著提高培养物中H_2O_2的含量,2.0 mmol/L亚精胺(Spd)或腐胺(Put)处理5 d的培养物中H_2O_2含量分别比对照组高175.6%和180.6%,添加H_2O_2淬灭剂二甲基硫脲(DMTU)可抑制类原球茎芽的发生,补充Spd或Put可部分解除DMTU的抑制作用。在外源多胺处理前期和中期,虽然超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性无明显改变,但合成H_2O_2的多胺氧化酶(PAO)活性和分解H_2O_2的抗坏血酸过氧化物酶(APX)与过氧化氢酶(CAT)活性明显增加。[结论]外源多胺作用的霍山石斛类原球茎芽的发生与H_2O_2积累和分解代谢有关。 相似文献
2.
Methylmalonic aciduria is an inborn error of metabolism characterized by neonatal or infantile ketoacidosis. Leukocytes isolated from the peripheral blood of a 1-year-old child with this disorder converted negligible quantities of propionate-3-C(14) to carbon dioxide, but oxidized succinate-1,4-C(14) normally, an indication of a block in the conversion of propionate to succinate. Parenteral administration of vitamin B(18) resulted in a reduction in methylmalonic acid excretion and an increase in propionate oxidation by leukocytes in vitro. The results suggest a mutation of methylmalonyl-CoA isomerase, a vitamin B(12), dependent enzyme which converts methylmalonyl-CoA to succinyl-CoA, and provide the first demonstration of vitamin B(12) "dependency" in man. 相似文献
3.
化石燃料的持续开采与使用对环境产生了严重的负面影响，使得开发可再生清洁能源代替传统能源成为必然。木质纤维素是一种丰富的可再生资源，可转化为生物乙醇、氢气等生物质燃料，被认为是代替化石燃料的理想替代品。其中木质纤维原料转化为生物乙醇需经过预处理、酶水解以及微生物发酵这3个关键步骤，而纤维素酶水解通常会受到酶、水解条件、底物等诸多因素的影响。针对木质素对纤维素酶水解的影响研究进行综述，大量研究发现，木质素是纤维素酶水解过程中的主要抑制剂。木质素既可以吸附纤维素酶，与纤维素酶发生无效吸附；又可以作为物理屏障，阻碍酶对纤维素的生产性吸附。尽管通过预处理可以去除大部分的木质素，但依旧无法从根源上缓解木质素对纤维素酶水解的影响，研究木质素的结构单元对酶解效率的影响可能是当前生物乙醇转化中木质素在纤维素酶水解中的研究方向。 相似文献
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DA-6对草莓叶片叶绿素合成前体物质及关键酶酶活性的影响 总被引：2，自引：1，他引：1
为弄清DA-6提高草莓叶片叶绿素的作用效果,以温室栽培的‘甜查理’(Fragaria×ananassa Duch.cv.Sweet Charlie)草莓为试材,在结果前1个月用20mg/L DA-6对不同叶龄(幼叶和展开叶)进行叶面喷施。利用紫外分光光度计测定相关物质含量和酶活。结果表明:幼叶和展开叶叶绿素含量都有提高,但对幼叶效果明显好于展开叶,分别平均提高18%和5%。测定处理组降低了叶绿素的前体物质5-氨基酮戊酸(5-aminolevulinic acid,ALA)含量,但增加了后续中间产物胆色素原(porphobilinogen,PBG)含量,催化ALA向PBG转化的5-氨基酮戊酸脱水酶(5-aminolevulinate dehydratase,ALAD)的活性也有显著提高。因此,通过叶面喷施DA-6可提高ALA向PBG转化效率,使得后续产物有充足的底物合成叶绿素,从而使叶绿素含量增加。 相似文献
5.
对高产蛋白酶细菌P5菌株发酵产生的蛋白酶进行初步分离纯化并研究其酶学性质。结果表明,硫酸铵饱和度为70%时,酶活性达到最高(310.44U/mL);该酶最适反应温度为40℃,在35～40℃保温5h,酶活性基本没变化;酶反应最适pH值为7.0,酶活性在pH值6.0～7.5时比较稳定。K+、Ca2+、Mg2+、Fe3+对酶活性有促进作用,Na+对酶活性基本没有影响,Hg2+和Mn2+对酶活性有抑制作用,其他金属离子对酶活性的影响随离子浓度的不同而不同。 相似文献
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大豆籽粒尿囊素酶对十二烷基磺酸钠、尿素、盐酸胍变性处理较不敏感．十二烷基磺酸钠、尿素变性处理的尿囊素酶可通过稀释而恢复活力，但一经盐酸胍变性后却难以通过稀释而恢复活力．酶蛋白质氨基酸残基化学修饰结果表明，巯基、赖氨酸残基、酪氨酸残基不是构成酶分子活力中心的必需基团，色氨酸残基是酶活性中心的必需基团．甘油醛、异烟肼不影响酶反应，而乙酰氧肟氧肟酸抑制酶活力３９．６％ 相似文献
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Saturnine gout: lead-induced formation of guanine crystals 总被引：1，自引：0，他引：1
Intravenous injection of a sublethal dose of lead acetate into a domestic pig resulted in a 4.5-fold increase of guanine in the urine, indicating an impairment in the conversion of guanine to xanthine. This impairment is probably due to the inhibition of guanine aminohydrolase (guanase), since the activity of this enzyme is inhibited by Pb2+ (the inhibition constant being 3.0 X 10(-6)M). Postmortem histological examination revealed concretions of crystalline material in the epiphyseal plate of the femoral head. Extraction of the section containing the concretions showed that they were guanine. The relation of these findings to saturnine gout is discussed. 相似文献
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对黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)TS 07发酵液中的茶皂素脱色酶进行粗分离,并对其酶学性质进行了研究。结果表明: 用硫酸铵沉降法所得粗酶粉的酶活力高达52 971 U·g-1;该酶的最适反应温度为40℃,最适作用pH值为45;该酶在常温下具有良好的热稳定性,在pH值30～75环境下都比较稳定;Fe3+、Ca2+和Ni2+对酶活影响不大,Hg2+能强烈抑制茶皂素脱色酶的活性;10%(V/V)有机溶剂丙酮、异丙醇、乙醇和乙腈能保留茶皂素脱色酶大部分的活力;反应体系中H2O2达到5%,茶皂素脱色酶仍能保持较高的活力;而在反应底物不存在的情况下,茶皂素脱色酶与025%的H2O2保温1 h后,酶活残余量仍能达到80%以上。 相似文献
9.
文冠果FAD2的序列与功能分析 总被引：3，自引：1，他引：2
脂肪酸脱饱和酶2(fatty acid desaturase 2, FAD2)基因是油脂合成代谢的关键酶基因,其编码的蛋白催化油酸(18∶1)进一步脱饱和形成亚油酸(18∶2)。本研究以富含油酸和亚油酸2种优质不饱和脂肪酸的文冠果种胚为试材,采用简并引物策略结合RACE技术,克隆了文冠果FAD2的cDNA序列。序列分析表明,文冠果FAD2除具有植物FAD2特有的3个组氨酸区和N端的芳香族氨基酸区外,还具有3个N—糖基化位点和多个磷酸化位点。通过农杆菌介导,将文冠果FAD2转入拟南芥fad2突变体中进行表达分析。气相结果表明,拟南芥fad2突变体缺失亚油酸,而转入文冠果FAD2的拟南芥fad2突变体的种子油中产生了亚油酸,这表明所克隆的文冠果FAD2基因编码的酶具有催化油酸(18∶1)脱饱和成为亚油酸(18∶2)的活性。 相似文献
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枇杷果肉过氧化物酶的分离纯化及其性质研究 总被引：2，自引：0，他引：2
枇杷果肉制成丙酮粉,通过硫酸铵沉淀分级分离、透析、DEAE-纤维素离子交换柱层析纯化,获得两个酶活力峰,第二活力峰的酶制剂经过PAGE和SDS-PAGE电泳获得单一纯的过氧化物酶(PODⅡ),纯酶比活力为710.5U/mg。酶亚基分子量为22.6kDa,等电点pI为3.6。酶的动力学研究表明:酶的最适pH为5.0,在pH2.6～10区域较稳定;酶最适温度是35℃,对热敏感,高于45℃以上酶的稳定性差。酶对愈创木酚和H2O2的表观Km值分别为20.58和12.04mmol/L,以愈创木酚为底物时,酶比活力最大,其次是苯酚、邻苯二酚、对苯二酚和间苯二酚,酶未能催化以焦性没食子酸为底物的氧化反应。Al3+、Mn2+、Zn2+和Hg2+对酶有抑制作用,Mg2+、Ca2+、Cu2+、Fe2+、Ba2+和Pb2+对酶有激活作用;半胱氨酸等12种化合物对酶活力均有不同程度的抑制作用,在防止或减轻枇杷采后的酶促褐变中将起到重要的作用。 相似文献
11.
不同浓度重铬酸钾溶液胁迫对洋葱根尖生理生化特性的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
研究不同浓度重铬酸钾溶液及不同处理时间对洋葱(Allium cepa L.)根尖细胞有丝分裂和植物保护酶系统的影响,旨在为探究重金属铬作用于植物体的生理生化机理提供参考。分别用0、12.5、25.0、50.0、100.0、200.0 mg/L重铬酸钾溶液处理洋葱根尖6、12、18、24 h,而后收集洋葱根尖组织,分别用于洋葱根尖组织石蜡切片、苏木素染色观察和测定根尖细胞中的超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽-S转移酶活性及丙二醛含量。结果表明,不同浓度重铬酸钾溶液处理洋葱根尖不同时间后,细胞有丝分裂出现异常分裂,并伴有微核的产生;无论处理时间长短,随着处理浓度的增加,细胞中的超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽-S转移酶活性都呈现先上升、后下降的变化趋势,而丙二醛含量先缓慢下降、后迅速上升;当处理浓度一定时,随着处理时间的延长,细胞中的超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽-S转移酶活性呈上升趋势,而丙二醛含量呈缓慢下降趋势。说明重铬酸钾溶液对洋葱具有一定的细胞毒性作用,可能与调控细胞中各种酶系统的活性及含量有关。 相似文献
12.
对筛选得到的一株黑曲霉菌株(Aspergillus,niger inu-8)所产菊粉酶的酶学性质进行了研究.结果表明,菊粉酶的最适作用温度为45～55℃,在30～60℃范围内该酶能保持较高的活性,但超过60℃后其活性迅速下降;在80℃水浴下处理0.5 h,酶活性丧失80%;该酶的适宜pH值相对偏酸,在pH值4.0～6.0时有很好的稳定性,在pH值5.0时表现为一个活性高峰;Ca2+对该酶具有明显激活作用,Hg2+和EDTA(乙二胺四乙酸)是该酶的强烈抑制剂;菊粉酶可水解菊粉但不水解棉子糖,对蔗糖酶的活性较低,I/S为52,对菊粉的米氏常数Km为0.34 mol·L-1,最大反应速度Vmax为0.53 mg·L-1·min-1. 相似文献
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独一味[Lamiophlomis rotata(Benth.)Kudo]是一种常用藏药.通过测定其药用器官内源抗氧化酶类活性和脂质过氧化产物含量和速率,研究了不同采收期独一味各药用器官的酶促抗氧化功能.结果表明,独一味植株各药用器官中SOD酶活性均较高且稳定,平均达到150.87 U/g,H2O2清除酶类活性协同作用强,尤其POD活性强,平均达到236.76μmol/g,同时还具有高效AsA-GSH自由基清除循环体系,丙二醛(MDA)积累量很少,平均只有1.22μmol/g,因此认为独一味植株具有高效抗氧化功能和较优越的抗逆能力. 相似文献
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碱性预处理对稻草秸秆酶解的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
以稻草秸秆为原料,弱碱性预处理后进行酶解糖化,对预处理前后的稻草秸秆进行扫描电镜观察,研究预处理条件对稻草秸秆半纤维素、纤维素、木质素含量及损失率的影响,通过酶解还原糖的释放量来判断预处理的效果.结果表明:碱性预处理降低了稻草秸秆中木质素的含量,提高了纤维素的含量,增加了纤维素酶与底物的酶解可及度,促进了稻草秸秆酶解糖化.经2.0%NaOH、60 ℃、固液比1﹕12处理24 h后的稻草秸秆,在pH5.0、加酶量31.2 mg/g、45 ℃条件下酶解120 h的还原糖达到了790.3 mg/g,糖化率为81.01%.扫描电镜观察显示,经碱性预处理过的稻草秸秆孔隙度增大,机械组织暴露,酶解的有效比表面积增大,酶解速率加快. 相似文献
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Mirica LM Vance M Rudd DJ Hedman B Hodgson KO Solomon EI Stack TD 《Science (New York, N.Y.)》2005,308(5730):1890-1892
The binuclear copper enzyme tyrosinase activates O2 to form a mu-eta2:eta2-peroxodicopper(II) complex, which oxidizes phenols to catechols. Here, a synthetic mu-eta2:eta2-peroxodicopper(II) complex, with an absorption spectrum similar to that of the enzymatic active oxidant, is reported to rapidly hydroxylate phenolates at -80 degrees C. Upon phenolate addition at extreme temperature in solution (-120 degrees C), a reactive intermediate consistent with a bis-mu-oxodicopper(III)-phenolate complex, with the O-O bond fully cleaved, is observed experimentally. The subsequent hydroxylation step has the hallmarks of an electrophilic aromatic substitution mechanism, similar to tyrosinase. Overall, the evidence for sequential O-O bond cleavage and C-O bond formation in this synthetic complex suggests an alternative intimate mechanism to the concerted or late stage O-O bond scission generally accepted for the phenol hydroxylation reaction performed by tyrosinase. 相似文献
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限氧与通氧条件下米根霉ADH突变株的碳代谢特性 总被引：1，自引：0，他引：1
【目的】乙醇脱氢酶（ADH）是米根霉发酵生产L-乳酸代谢途径中的支路关键酶，选育米根霉ADH突变株，降低ADH活力，可以提高乳酸转化率。【方法】利用亚硝基胍（NTG）诱变米根霉As3.3462，在含丙烯醇的YPD选择培养基上筛选获得ADH突变株，研究了突变菌株在限氧与通氧条件下的乙醇、乳酸、ADH与L-乳酸脱氢酶（LDH）的特性。【结果】 获得11株ADH突变株，其中mut-2突变株在通氧和限氧条件下对乳酸的转化率比出发菌株分别提高了84.6%和175%，而对乙醇的转化分别下降了39.5%和59.8%。mut-2突变株的最大ADH活力在通氧和限氧条件下均比出发菌株降低，而LDH活力在限氧条件下显著增加，通氧条件下变化不明显。【结论】氧气的供给对米根霉发酵产L-乳酸的产物组成比例影响很大，限氧发酵条件下ADH活力提高，乙醇积累。结果还表明，通过筛选米根霉ADH突变株，是获得L-乳酸高产菌株的一种简单快速的有效手段。 相似文献
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降解菌DDS-1产3-AC-DON氧化酶的酶学特性 总被引：1，自引：0，他引：1
【目的】研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇（deoxynivalenol,DON）降解菌Devosia sp. DDS-1产生的3-AC-DON氧化酶的酶学特性,掌握DDS-1降解3-AC-DON到3-酮基-DON特性,为该酶的开发应用奠定理论基础。【方法】LG培养基培养DON毒素降解菌Devosia sp. DDS-1后,用PBS离心洗涤菌体后采用超声波破碎,用硫酸铵沉淀菌体破碎液获得粗酶液;然后在不同的酶反应体系中检测3-AC-DON氧化酶的酶活性。【结果】降解菌DDS-1产生3-AC-DON氧化酶的最适条件为：pH 7.0、25℃、培养36 h;该酶酶反应的最适温度为35℃,最适反应pH为7.0;该酶在20—40℃,pH 5.0—9.0的范围内能保持80%以上的酶活性;大多数金属离子在浓度为0.2—2 mmol•L-1对3-AC-DON氧化酶有促进作用;乙二胺四乙酸（EDTA）对该酶活性有抑制作用;酶的定域试验结果显示该酶为胞内酶;DDS-1产生的粗酶液能很好地降解小麦中的DON、3-AC-DON毒素。【结论】Devosia sp. DDS-1产生的3-AC-DON氧化酶的酶学特性研究表明,DDS-1产生的3-AC-DON氧化酶具有较好的温度和酸碱稳定性,该酶反应需要金属离子作为辅因子。 相似文献
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【目的】比较4种穿心莲内酯衍生物（A2、A4b、A4d、A4e）与羟基马桑毒素（Tutin）对粘虫生理代谢影响的差异,为探索新型植物源杀虫剂提供依据。【方法】粘虫3龄幼虫采用Tutin和A2、A4b、A4d、A4e经活体和离体2种方法处理后制备粗酶液,用比色法测定试虫超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和过氧化物酶（POD）3种保护酶的活力,通过酶比活力对比分析活体处理不同时间酶活力的变化及2种处理方法酶活力水平的一致性。【结果】活体试验结果表明,Tutin、A2、A4b、A4d、A4e对粘虫体内POD、CAT活力有抑制作用,而对SOD活力有促进作用;在5种化合物中,整体而言,A4b和A4e对3种保护酶的影响较大。离体测定结果表明,粘虫体内POD、CAT和SOD活力的变化趋势与活体测定结果相似。【结论】A2、A4b、A4d、A4e和Tutin通过对粘虫幼虫3种保护酶活性的干扰,削弱了其对氧自由基和H2O2的解毒代谢功能,表明4种穿心莲内酯衍生物可以作为新型植物源杀虫剂。采用活体与离体2种方法对粘虫比活力的测定结果一致。 相似文献
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Some neurons of the rat central nervous system contain aromatic-L-amino-acid decarboxylase but not monoamines 总被引：7，自引：0，他引：7
C B Jaeger G Teitelman T H Joh V R Albert D H Park D J Reis 《Science (New York, N.Y.)》1983,219(4589):1233-1235
Neurons containing the enzyme aromatic-L-amino-acid decarboxylase (AADC) but lacking either tyrosine hydroxylase or serotonin were found in the spinal cord of neonatal and adult rats by light and electron microscopic immunocytochemistry. The majority of these neurons localized to area X of Rexed contact ependyma. Thus, spinal AADC neurons have the enzymatic capacity to catalyze directly the conversion of the amino acids tyrosine, tryptophan, or phenylalanine to their respective amines tyramine, tryptamine, or phenylethylamine. These amines normally present in the central nervous system may be of potential clinical significance as endogenous psychotomimetics. 相似文献
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基因工程技术在黄曲霉毒素生物降解中的应用 总被引：2，自引：0，他引：2
黄曲霉毒素具有强致癌性、致突变性和致畸性,影响动物生产性能,降低饲料转化效率,减少产肉量、产蛋量和产奶量,增加动物发病率和死亡率,给畜牧业造成巨大的经济损失。另外,黄曲霉毒素通过肉、蛋、奶食物链传递给人类,严重威胁人类健康。因此,黄曲霉毒素的防控已经成为全球性高度关注的问题。目前,饲料中黄曲霉毒素的脱毒方法主要采用物理吸附,如蒙脱石、活性炭、酵母细胞壁等,但物理吸附仅是吸附了黄曲霉毒素,并不能减少毒素的量,最终饲料中被吸附的毒素在体内解吸附后排出体外,可造成环境的二次污染。另外吸附剂效果不稳定,可能会吸附饲料中的维生素等营养物质,造成饲料品质下降。其中,生物降解法具有解毒彻底、专一性强,不影响饲料的营养价值且能够避免毒素的重新产生等优点,从而备受研究者的关注。目前,有越来越多的研究报道了真菌、细菌及其代谢产生的酶能够降解黄曲霉毒素,而鲜有关于降解黄曲霉毒素重组酶的报道。基因工程技术在黄曲霉毒素生物降解中的运用,可采用现代分子生物学的方法,从复合解毒酶中分离纯化出特定的蛋白。但因微生物降解酶分离纯化过程复杂、酶活不稳定、酶作用条件苛刻,较难用于实际生产。因此,人们利用基因工程手段将活性高的解毒酶基因进行基因克隆,实现降解酶基因在原核或真核工程菌种的异源高效表达,为酶制剂在降解霉菌毒素的实际生产中作用研究奠定了理论基础。文章就基因工程技术在黄曲霉毒素降解中的运用研究进展及未来发展方向进行综述,为饲料和食品中霉菌毒素生物降解酶的运用提供理论基础和实践依据。 相似文献