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本文用猪囊尾蚴的全囊虫、囊液、头节的粗提抗原(CW_1,CF_1,CS_1),和其超速离心上清液抗原(CW_2,CF_2,CS_2)以及其经葡聚糖凝胶柱(Sephadex G—150)层析提纯的抗原(CW_3,CF_3,CS_3)分别对人工感染的猪囊尾蚴、细颈囊尾蚴猪和不感染的对照组猪,以间接血球凝集试验(IHA)进行定期的检测。结果表明,CW_2,CW_3,CF_2和 CS_2抗原的敏感性较高。进而用此4种抗原对自然感染的猪囊尾蚴猪进行了扩大诊断试验。试验结果:CF_2的敏感性高于其它抗原,但特异性较差,其检出率为76.87%,假阳性率为16.07%;而 CW_3抗原的敏感性虽较 CF_2抗原差,但特并性较强,检出率为64.88%,假阳性率为2.5%。两种抗原的重复性均良好。 相似文献
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不同抗原在兔豆状囊尾蚴病血清学诊断中的研究 总被引：4，自引：0，他引：4
本试验首次应用兔三状囊尾蚴的囊液分馏物和猪细颈囊尾蚴的囊液作抗原，同兔豆状囊尾蚴的囊液和头节、囊壁抗原，用炭凝集试验检测了兔豆状囊尾蚴病的阳性血清及阴性血清，分析、比较了各种抗原诊断兔豆状囊尾蚴病的应用效果。结果：兔豆状囊尾蚴囊液通过葡聚糖凝胶Ｇ－２００过柱，所得第二峰蛋白抗原性最强，特异性最好，阳性符合率最高；其次是兔豆状囊尾蚴的液囊抗原；猪细颈囊尾蚴囊液抗原性，特异性都较上两种抗原低，但对兔体内寄生１０个以上豆状囊尾蚴的检出率还是较理想的；而免豆状囊尾蚴的头节、囊壁抗原性小，不能用于该病的诊断。 相似文献
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为筛选豆状囊尾蚴的特异性抗原,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western-blot)技术对自然感染的豆状带绦虫成虫、幼虫的头节、囊壁可溶性抗原及囊液抗原进行了分析.结果表明:从豆状带绦虫不同发育阶段的虫体中分离出5~12条主要蛋白区带,分子质量为25~114ku.以第7周自然感染家兔血清对7种虫体抗原进行的Western-blot分析显示,7种虫体抗原在42、57、63ku处均能被兔抗豆状囊尾蚴血清识别.以家兔阳性血清中提取出来的IgG免疫球蛋白对7种虫体抗原进行的Western-blot分析显示,7种虫体抗原在63ku处均能被兔抗豆状囊尾蚴血清识别.说明63ku蛋白带可作为预防兔豆状囊尾蚴病的候选疫苗抗原.试验初步阐明了豆状带绦虫7种不同抗原的部分生化特性,为对该抗原的进一步深入研究奠定了基础. 相似文献
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《江苏农业科学》2017,(18)
以高抗甘薯黑斑病品种南京-92块根为材料,从染菌6 d的甘薯块根中得到粗酶液;经热变性、硫酸铵分级沉淀后,采用高流速二乙基氨基琼脂糖交换剂(DEAE Sepharose Fast Flow)阴离子交换层析,分离出3个蛋白峰,活性检测可知峰2为活性峰;将峰2经葡聚糖凝胶G-75(Sephadex G-75)凝胶层析纯化后得到4个蛋白峰;将具有几丁质酶活性的峰2经聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),凝胶上显示2条蛋白条带,分别割胶纯化测定活性,然后将有活性的条带进行10%、12%PAGE电泳,均显示为单一条带;本试验分离纯化过程中得到了电泳纯级的几丁质酶,为后续的研究奠定了基础。 相似文献
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通过对猪囊尾蚴虫体 (CWag)、囊液 (CFag)、头节 (CSag)、囊壁 (CBWag)、脲溶抗原 (UCWag)和成虫抗原(TSag)的水解氨基酸以及抗原反应原性的分析 ,确定了各氨基酸与抗原反应原性的关系。试验结果表明 ,几种抗原都含有 17种氨基酸 ,通过数据处理软件SPSS对各种抗原组成差异分析显示 ,各种抗原在天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、组氨酸的组成上无显著差异 (P >0 .0 5 ) ,且CSag、CBWag之间在所有氨基酸组成上均差异不显著 ;而UCWag却与其它抗原在氨基酸组成上差异显著 (P <0 .0 5 )。UCWag的敏感性和特异性均较高 ,脯氨酸与抗原反应的敏感性呈正线性相关 ,谷氨酸与抗原反应的特异性呈正线性相关 相似文献
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YuHyunJae LeeJungSun LeeNamJoo HaSiJung KimSoYeon GangEunJoo BaeDongWon ChangMooUng LeeHyunSook YuHyunJae LeeJungSun LeeNamJoo HaSiJung KimSoYeon GangEunJoo BaeDongWon ChangMooUng LeeHyunSook 《华中农业大学学报》2004,23(1):150-156
在韩国的平菇(Pleurotus ostreatus )商品化种植基地发现了真菌病毒的自然流行为害的现象。这些病害经常伴随着一些球形病毒粒体的出现。采用Tris-EDTA缓冲液提取,PEG-NaCl沉淀和CsCl梯度离心,依据不同的比重,获得了3种病毒粒体,其中1种病毒粒体直径为27nm,另外2种的粒体为27nm,并推定这些病毒共同感染栽培的平菇。其中1种27nm的球形病毒,其比重较34nm的病毒大,称为平菇球形病毒(OMSV),该病毒含有2条大小分别为6．00kb和1．25kb的ssRNA片段。直径为34nm的病毒有两种比重小的粒体,其中1种常与OMSV共感染平菇,称为平菇等面体病毒-I(oystermushroom isometric virus-I ,OMIV-1),该病毒含有12条dsRNA片段,它们的大小分别是2.65,2．45,2．40,2．20,2．15,2．10,2．05,2．00,1．90,1．80,1．00和O．80kb。另外一种称之为平菇等面体病毒-II(oyster mushroom isometric virus-II, OMIV-II),．含有3条dsRNA片段,大小分别是2．25,2．15和2．05kb。经聚丙烯酰胺凝胶(12％)电泳、考马斯量兰染色表明OMSV,OMIV-I和OMIV-II病毒粒体的外壳蛋白的分子量大小分别是29kDa、71kDa和62kDa。这些结果表明在平菇中至少存在3种不同的ssRNA和dsRNA病毒。 相似文献
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用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳分析了黑猪血清蛋白质和碱性磷酸酶同工酶生化位点多态性的分布。结果：血清蛋白质可分离出１０ ～１２ 条区带,血红蛋白分离出１ ～２ 条区带,结合珠蛋白分离出４ 条区带,铜蓝蛋白分离出１ 条区带,糖蛋白分离出７ ～９ 条区带,脂蛋白分离出４ 条区带,光密度扫描黑猪血清蛋白质相对面积比分别为白蛋白占３１ ．９０ ％ ,α１ 蛋白占１１ ．１６ ％ ,α２ 蛋白占２４ ．４２ ％ ,β蛋白占１１ ．３１ ％ ,γ蛋白占２１ ．１８ ％ 。碱性磷酸酶同工酶分离出２ 条区带,其中 Ａ Ｌ Ｐ１ 占７３ ．６７ ％ , Ａ Ｌ Ｐ２ 占２１ ．７１ ％ 。用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质和碱性磷酸酶重复性较好,分辨较高,测定蛋白质和碱性磷酸酶的迁移率（ Ｒｍ 值） 和百分含量的变化对分析猪的遗传特征、选育优良品种和诊断诸多疾病有重要意义。 相似文献
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《云南农业大学学报(自然科学版)》2021,(3)
【目的】研究新型海藻肥配施传统复合肥对玉米产量及其生长特性的影响,为其推广应用提供科学依据。【方法】以春玉米金禾658为供试品种进行田间试验,设置CK (复合肥1 500 kg/hm~2)、CF_1+S_1、CF_2+S_1、CF_3+S_1、CF_1+S_2、CF_2+S_2和CF_3+S_2共7个处理(CF_1～CF_3分别为复合肥1 500、1 350和1 200 kg/hm~2,S_1～S_2分别为海藻肥7.5和15 kg/hm~2),田间随机排列,测定玉米的产量及其构成因素、生物量、株高、茎粗和叶绿素含量等性状。【结果】添加海藻肥的CF_1+S_1和CF_1+S_2处理的产量较传统复合肥CK处理分别显著增加了18.9%和15.9%(P0.05),并且在其配施减量10%和20%复合肥的情况下依然达到未减产效果。与CK处理相比,CF_1+S_1处理将玉米各时期干物质量显著提高了3.9%～6.4%、拔节期株高和茎粗分别显著增加了5.1%和8.9%、乳熟期叶片SPAD值提高了9.7%(P0.05)。然而在相同复合肥用量下,不同海藻肥处理间的产量、茎粗和SPAD值均无显著差异(P0.05)。在经济效益方面,添加7.5 kg/hm~2海藻肥的CF_1+S_1处理收益最高,较CK增加了32.5%,较减量复合肥的CF_2+S_1和CF_3+S_1处理分别增加了16.5%和21.6%。【结论】与普通复合肥相比,配施7.5 kg/hm~2海藻肥可显著提高春玉米的株高、茎粗、SPAD值和干物质量,进而增加了玉米的产量与经济效益。 相似文献
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以亲和层析法提纯的猪瘟兔化毒用2%的Tritonx-100裂解后,经SDS-PAGE法分析,表明它有3种结构多肽,即：GP#-1（54-58KD）,GP#-2（24.5-28KD）,CP（7-10KD）。GP#-2在凝胶中稍有扩散,出现较长的拖尾现象。经PAS（Periodic Acid Schiffis reagent）染色证明,GP#-1、GP#-2为糖蛋白,用免疫印迹法测知：GP#-2能与猪瘟抗体结合,而GP#-1,CP则不能结合。3种蛋白成份的氨基酸组成及含量有一定差异。CP与GP#-1、GP#-2之间的差别较大。GP#-1、GP#-2可能是病毒的囊膜蛋白成份,CP可能是衣壳的蛋白成份。 相似文献
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从人工接种感染黄矮病毒(Rice Yellow Stunt Virus,RYSV)的水稻茎杆中提取得到了部分纯化的RYSV制品,病毒制品经Tricine-SDS-PAGE得到分子量分别为84 kD,60 kD,31 kD和29.5 kD的4条主要蛋白带和分子量为170kD和43kD的两条次要蛋白带。根据弹状病毒结构蛋白命名法,按分子量大小依次命名为L,G,N,NS,M_1和M_2蛋白。从电泳凝胶上切下G和N蛋白带,制成抗原免疫BALB/C小鼠;制得G和N蛋白小鼠腹水抗体。经Dot-blot试验测得N蛋白抗体效价为1:1000,G蛋白抗体效价为1:400。 相似文献
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苏铁白、绿苗可溶性蛋白质及若干同工酶分析 总被引：5，自引：1，他引：4
采用聚丙酰胺凝胶垂直平板电泳技术,对苏铁绿苗和白化苗进行可溶性蛋白质及若干同工酶区带分析,发现正常绿苗可溶性蛋白质有１３条区带,比白化苗多２条;过氧化物酶同工酶谱带有６条,比白化苗少１条;酯酶同工酶带１５条,比白化苗多１条．以上结果表明：可溶性蛋白质区带、过氧化酶及酯酶同工酶谱带与苏铁白化苗的性状表达有密切相关． 相似文献
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苏云金芽胞杆菌BRC-HZP7杀虫晶体蛋白多样性分析 总被引：1，自引：1，他引：0
分离自武夷山土壤的苏云金芽胞杆菌BRC-HZP7菌株对小菜蛾和甜菜夜蛾幼虫有较好的毒杀作用.对该菌株进行了生理生化测定、cry基因的PCR-RFLP检测,以及通过SDS-PAGE检测晶体蛋白,并对蛋白点进行肽段指纹图谱鉴定.结果表明该菌株含有cry1Aa、cry1 Ba、cry1 Ia、cry2Ab、cry2Ac、cr... 相似文献
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为检测高分辨率遥感影像不同波段纹理特征对于森林蓄积量估算精度的影响,以湖北省荆门市京山县太子山林场马尾松纯林为对象,基于灰度共生矩阵的方法分别提取高分辨率遥感影像Worldview-2 红光、绿光、蓝光、近红外波段和全色波段的纹理特征,利用随机森林算法,分别建立野外样地蓄积量与纹理参数的模型。结果表明,全色波段对马尾松森林的精度最高（R2=0.86,RMSE=47.37 m3·hm-2）,其次是绿色波段（R2=0.85,RMSE=50.82 m3·hm-2）和近红外波段（R2=0.85,RMSE=46.85 m3·hm-2）,蓝色波段（R2=0.68,RMSE=60.72 m3·hm-2）和红色波段（R2=0.69,RMSE=56.27 m3·hm-2）的精度最低;窗口大小对模型精度影响较小,全色波段的R2取值在0.82~0.86,RMSE取值在47.66~51.99 m3·hm-2,多光谱波段的R2取值在0.88~0.89;蓝色和红色波段的非相似度（DIS）的估算模型精度相对较高,绿色波段的对比度（CON）（R2=0.87,RMSE=46.21 m3·hm-2）估算精度最高,红色波段的非相似度（R2=0.68,RMSE=58.30 m3·hm-2）估算精度较高,近红外波段的角二阶矩阵（ASM）（R2=0.68,RMSE=60.30 m3·hm-2）精度最高,全色波段的对比度、相关性、熵、变化量模型精度较高,R2为0.85。利用高分辨率遥感影像纹理特征估算森林参数时需综合考虑不同波段的纹理特征对模型的贡献。 相似文献
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用酶联免疫印迹对弓形虫抗原组分分析的结果显示：经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ后的弓形虫抗原组分分别为１．７８ＫＤ，２１．３ＫＤ，３０ＫＤ，３６．５ＫＤ，３９．１ＫＤ和５０．２ＫＤ。电转印至硝酸纤维膜上的各抗原组分，用ＥＬＩＢ分析，弓形虫感染宿主的血清能与抗原组分蛋白起反应，其中３９．１ＫＤ和２１．３ＫＤ分子量组分蛋白带色显色最深，提示这二种组分蛋白是弓形虫ＩｇＧ抗体识别的主要组分蛋白，而对照血清与各组分蛋白为 相似文献
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【目的】检测猪红细胞类补体受体I型（Complement receptor 1-like,CR1-like）与C3b活性片段能否发生结合,以期为阐明猪红细胞发挥免疫粘附功能的分子机理提供科学数据。【方法】利用前期已构建的CR1-like(3-6)、CR1-like(8-11)功能域片段的重组质粒建立酵母双杂交检测体系,运用酵母共转化的方法将诱饵质粒（重组pGBKT7-CR1-like）与捕获质粒（重组pGADT7-C3b）共同转入Y2HGold酵母细胞中,分别利用一缺平板SD/-Leu、SD/-Trp和二缺平板SD/-Leu/-Trp（DDO）严格筛选共转化成功的酵母细胞,再根据报告因子是否表达来鉴别转化子在SD/-Leu/-Trp/X-α-Gal（DDO/X）、SD/-Leu/-Trp/X-α-Gal/Aba（DDO/X/A）二缺培养板上的生长情况,并结合菌落的颜色变化现象综合判定CR1-like活性片段与补体C3b在酵母细胞中是否发生相互结合;然后运用免疫沉淀技术分离酵母细胞中CR1-like与C3b结合复合物,并对该复合物的特异性进行Western blot鉴定。【结果】试验成功将pGBKT7-CR1-like与pGADT7-C3b基因共转入Y2HGold酵母细胞。共转化的酵母克隆在SD/-Leu、SD/-Trp、DDO平板上能够正常生长,在DDO/X、DDO/X/A平板上正常生长且菌落呈现蓝色,由此表明,试验中酵母双杂交系统建立成功,并通过试验获得了阳性酵母克隆。共同转化了pGBKT7-CR1-like和pGADT7-C3b质粒的酵母菌落PCR反向鉴定结果显示,在共转化的酵母菌中含有目的基因CR1-like(3-6)和CR1-like(8-11),共转化组的质粒酶切后出现C3b基因片段,与设计大小一致,说明重组质粒成功共转化入酵母细胞中。免疫沉淀试验中应用pGBKT7载体的标签抗体c-Myc沉淀酵母细胞中的融合蛋白,以c-Myc为一抗进行Western blot检测发现,单独转化了pGBKT7-CR1-like(3-6)和pGBKT7-CR1-like(8-11)的融合蛋白在50 kD处出现特异性条带;共转化pGBKT7-CR1-like(3-6) + pGADT7-C3b和共转化pGBKT7-CR1-like(8-11) + pGADT7-C3b的酵母融合蛋白在83 kD处出现特异性条带;以HA单克隆抗体为一抗进行Western blot检测时,在pGBKT7-CR1-like(3-6)和pGBKT7-CR1-like(8-11)融合蛋白中没有出现特异性条带,只有3、4泳道中共转化的酵母融合蛋白在83 kD处出现特异性条带,表明在Y2HGold酵母细胞中存在CR1-like与C3b识别结合的复合物。使用CR1-like单克隆抗体沉淀酵母细胞中的融合蛋白,以CR1-like单克隆抗体为一抗进行Western blot检测发现,单独转化了pGBKT7-CR1-like(3-6)和pGBKT7-CR1-like(8-11)的融合蛋白在50 kD处出现特异性条带;共转化pGBKT7-CR1-like(3-6) + pGADT7-C3b和共转化pGBKT7-CR1-like(8-11) + pGADT7-C3b的酵母融合蛋白在83 kD处出现特异性条带;以C3单克隆抗体为一抗进行Western blot检测发现,在pGBKT7-CR1-like(3-6)和pGBKT7-CR1-like(8-11)融合蛋白中没有出现特异性条带,泳道3、4所示只有共转化的酵母融合蛋白在83 kD处出现特异性条带,表明在Y2HGold酵母细胞中存在具有生物活性的CR1-like与C3b识别结合的复合物。通过多个单克隆抗体杂交结果,可看出诱饵质粒的表达产物CR1-like(3-6)、CR1-like(8-11)片段与捕获质粒的表达产物C3b片段可在酵母细胞内发生结合。【结论】猪红细胞CR1-like发挥免疫粘附功能的识别配体为C3b,为猪红细胞CR1-like功能域分子结构的进一步解析提供了重要数据依据。 相似文献
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棉花大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)血清学检测--抗原处理的比较 总被引：3，自引：0，他引：3
分别以棉花黄萎病菌V20的菌丝研磨物、菌丝蛋白、超氧化物歧化酶酶带Ⅰ、超氧化物歧化酶酶带Ⅱ为抗原免疫家兔,制备了抗血清As1、As2、As3、As4。琼脂双扩散法(ADD)和间接ELISA方法测定其特异性,发现这4种抗血清既可与同种的抗原发生阳性反应,也可与不同种的抗原发生交叉反应。用异种抗原黑白轮枝菌和尖孢镰刀菌吸附这4种抗血清,排除其非特异性成分后,抗血清专化性明显提高,消除了交叉反应。特异性测定表明:经吸附后的4种抗血清可以准确地将大丽轮枝菌鉴定到种的水平,但仍不能区分其生理型和致病类型。另外,当分别使用菌丝研磨物或菌丝蛋白为特异性测定抗原时,ADD检测的结果虽然一致,但前者阳性反应沉淀线粗糙,轮廓不清晰,后者的沉淀线较细,且清晰、明显。因此适宜选择菌丝蛋白为抗原进行抗血清的特异性测定试验。 相似文献
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白菜与甘蓝及其杂交和回交后代过氧化物酶同工酶的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
通过对白菜、甘蓝及其杂交、回交后代成熟功能叶过氧化物同工酶的分析,发现白菜有主酶带PE_2和付酶带PE_3,甘蓝有主酶带PE_1和付酶带PE_4,杂种F_1具有双亲的酶带PE_1、PE_2、PE_3和PE_4,回交第二代酶谱与杂种F_1相似或少了个别酶带。细胞组分的同工酶分析表明,这些同工酶都是存在于叶绿体上。对过氧化物酶的遗传及叶绿体与杂种优势的关系进行了讨论。 相似文献
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对六株嗜水气单胞菌的全细胞和外膜成份在不同的培养条件下进行SDS-PAGE、免疫转印分析.在同一培养条件下6个供试菌株全细胞的蛋白质电泳图谱不同.同一菌株在五种不同的培养条件下,其蛋白质电泳图谱相似但有差异.6株菌株的细菌外膜提取物的蛋白质电泳图谱不同,同一菌株在5种不同的培养条件下,其蛋白质电泳图谱相似但有差异,但所有的图谱均具有34 kDa和30 kDa的条带.用Schiff's试剂,银染及生物素标记(BS-1,ConA,UEA-1)法测定及分析提取物中糖或碳水化合物的特征.生物素标记及经蛋白酶K处理后的所有菌株的提取物均显示不同分子量碳水化合物的条带,但具有相同分子量的条带,其中32 kDa条带被三种生物素及银染所显示,而34 kDa仅被生物素BS-1和UEA-1所识别.经Schiff's试剂染色后,仅出现少量的条带.用免疫转印法测定菌体提取物的抗原性,结果显示,提取物有多条不同的条带被两种血清所识别,且用活菌制备的血清比死菌的要强得多.所有菌株在不同培养条件下的提取物均具35 kDa条带被鱼血清所识别.所以,35 kDa条带可能是嗜水气单胞菌的共同抗原.同时,用ELISA法测定,证明鱼血清与其它菌株间有较强的交叉反应. 相似文献