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猪丁型冠状病毒与猪流行性腹泻病毒双重实时荧光定量RT-PCR方法的建立和初步应用 总被引：1，自引：0，他引：1
猪丁型冠状病毒(PDCoV)与猪流行性腹泻病毒(PEDV)均为致病性冠状病毒,可以引起猪呕吐、腹泻脱水和新生仔猪死亡。为了建立一种快速检测PDCoV和PEDV的双重SYBR Green I荧光定量RT-PCR方法,根据GenBank登录的2种病毒基因的保守序列,设计了两对特异性引物,分别扩增其N、M基因保守区,并将其克隆至pMD19-T载体;将10倍梯度稀释的混合重组质粒作为标准品模板,建立了一种检测PDCoV和PEDV的双重的SYBR Green I荧光定量RT-PCR方法,并对其反应的敏感度、特异性和重复性进行了检测。结果表明,本试验所建立的双重荧光定量RT-PCR检测方法对PDCoV和PEDV的最低检测量分别为51和32拷贝·μL-1,且与PBoV、TGEV、PRV、PCV2无交叉反应,特异性较好;对2016年至2017年在河北省收集的130份仔猪腹泻样本检测,结果显示,PDCoV的检出率为16.9%,PEDV的检出率为66.2%,二者同时感染的检出率为2.3%,与普通RT-PCR检测方法相比,敏感性更高。本研究为PDCoV和PEDV的诊断及分子流行病学调查提供了一种快速、定量检测方法。 相似文献
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我国集约化猪场新发猪丁型冠状病毒病的诊断 总被引：3，自引：2，他引：1
猪丁型冠状病毒(PDCoV)是一种国外新发现的猪腹泻病原,我国广泛存在猪流行性腹泻,但至今未见猪丁型冠状病毒感染的正式报道。2015年7月,在存栏2 000头基础母猪的华南某集约化猪场5至15日龄乳猪发生传播迅速的严重腹泻,发病率90%、死淘率90%以上。经实验室PCR诊断为猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和轮状病毒(RV)检测均为阴性。用特异性的PDCoV N基因引物经RT-PCR扩增显示为强阳性。在此基础上,对扩增产物进行了基因测序和遗传变异分析,显示该毒株在PDCoV新的遗传分支上,与其他PDCoV有显著区别。本研究首次报道我国出现了猪丁型冠状病毒病的新病例,毒株命名为PDCoV Ch-A。 相似文献
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猪流行性腹泻病毒(PEDV)可以感染各个年龄段的猪只,但更易感染刚出生的仔猪。仔猪流行性腹泻是猪场一种较为普遍的疾病,具有较大的危害性。文章通过调查连云港某猪场新生仔猪(2019年4—5月期间56头母猪产下的全部641头活仔猪)发生腹泻及其死亡情况,结果发现哺乳期共死亡仔猪94头(其中疾病死亡共42头,约占45%),其中流行性腹泻死亡21头,占疾病死亡的50%,占总死亡的22%。另外,结合走访当地一些养猪户了解到目前仔猪流行性腹泻的危害仍然较大。最后,分析了仔猪流行性腹泻的发生原因并提出预防措施,为降低仔猪流行性腹泻的发生率以及为猪场采取有效的防治措施提供参考或借鉴。 相似文献
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在猪养殖业中,经常会出现一些传染性疾病,其中就包括流行性腹泻.该病害主要威胁新生仔猪,影响仔猪的生长和发育性能.新生仔猪腹泻原因包括传染性和非传染性因素.其中传染性因素包括病毒性、细菌性和寄生虫性三种,尤其是病毒病引发的仔猪腹泻最为严重,必须高度重视仔猪流行性腹泻. 相似文献
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本研究旨在了解引起仔猪腹泻的主要病毒性病原感染情况及流行特点,为有效防控广西仔猪腹泻提供科学依据。试验采用RT-PCR/PCR检测方法对2016年3月至2019年2月广西14个地级市366个规模猪场送检的914份仔猪腹泻病料样品进行猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪轮状病毒（PoRV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪Delta冠状病毒（PDCoV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪圆环病毒2型（PCV2）和猪伪狂犬病病毒（PRV）检测,并分析其阳性率在不同年份、季节、地区之间的差异及病原混合感染情况。调查结果显示,PEDV、PDCoV、PRRSV、PoRV、PCV2、CSFV、PRV均存在不同程度的感染,其样品平均阳性率分别为59.74%、8.32%、7.77%、4.92%、3.72%、3.28%和2.08%,未检测出TGEV;PEDV已无明显季节性,一年四季均高发,即使在炎热的夏季,在感染猪群中也持续存在,PDCoV有明显的季节性,多发生在冬春寒冷季节;广西仔猪腹泻PEDV阳性率高,单一感染高达50.55%,仔猪腹泻混合感染情况也较多,其中以二重感染情况较为常见,同时也存在四重感染现象。结果表明,广西腹泻仔猪存在7种病毒性病原不同程度感染情况,其中以PEDV导致的仔猪病毒性腹泻尤为严重,新发PDCoV阳性率仅次于PEDV,需重视并加强对新发PDCoV的防控。 相似文献
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猪Delta冠状病毒(porcine delta coronavirus,PDCoV)是一种新发现的仔猪腹泻类冠状病毒,感染仔猪主要表现出水样腹泻、呕吐和脱水等临床症状,和猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)临床症状极其类似,且临床上混合感染病例较多,单靠临床症状和剖检变化很难辨别这2种疾病,因此建立同时检测且能区分PDCoV和PEDV的检测方法具有重要意义。参照GenBank登录的PDCoV M基因和PEDV ORF3基因特异性序列设计引物,扩增相应的基因片段,克隆构建重组质粒pMD-18T-PDCoV-M与pMD-18T-PEDV-ORF3,测序验证后,分别以此重组质粒为标准品,建立了能同时检测PDCoV和PEDV的SYBR GreenⅠ双重荧光RT-PCR方法,并对其扩增体系和扩增条件等进行了优化,同时对所建立的双重荧光RT-PCR方法的特异性、灵敏性和重复性进行了检测。结果显示,该试验成功建立了能同时检测PDCoV和PEDV的SYBR GreenⅠ双重荧光RT-PCR方法,最低能检测到PDCoV和PEDV分别是28.6拷贝/μL和99.6拷贝/μL的质粒浓度,显示出较好的敏感性;在同样扩增条件下该方法具有较好的重复性;特异性试验表明,该方法仅能检测出PEDV和PDCoV,而对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪伪狂犬病毒(PRV)等均不产生特异性扩增曲线。将所建立的双重荧光RT-PCR方法以及单重荧光定量RT-PCR方法分别对198份临床收集的仔猪腹泻样品进行PEDV和PDCoV检测,结果显示,PDCoV阳性样品41份,阳性率为20.7%;PEDV阳性样品59份,阳性率为29.8%;同时感染这2种病毒的样品17份,阳性率为8.6%。与单重荧光定量RT-PCR方法对PEDV和PDCoV的检出率一样,符合率100.0%。本研究成功建立了PDCoV和PEDV的双重荧光RT-PCR方法,能同时准确地检测PDCoV和PEDV,这为PDCoV和PEDV的临床鉴别诊断和流行病学调查研究奠定基础。 相似文献
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猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起,该病会导致种猪和育肥猪一过性腹泻,哺乳仔猪呕吐、水样腹泻,会降低种猪种用价值和育肥猪饲养回报,对哺乳仔猪,特别是10日龄内哺乳仔猪有高达70%~100%的致死率,给猪场带来巨大经济损失。为减少该病带来的经济损失,对该病及时诊断,果断采取有效措施最为关键。2018年11月,江西省某规模化养猪场发生新生仔猪腹泻,综合流行病学调查、临床症状观察、解剖病变观察、实验室检测结果,最终确定该起新生仔猪腹泻病例为PED。 相似文献
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《国外畜牧学(猪与禽)》2021,41(4)
猪流行性腹泻具有高发病率和高致死率,新生仔猪易感,严重影响了规模化养猪业的发展。本文阐释了新生仔猪流行性腹泻的流行病学特点、临床特征及诊断特点,重点从做好产房保温清洁、减少猪群应激、强化疫苗免疫和加强新生仔猪护理等方面完善新生仔猪流行性腹泻防控策略,提升规模化猪场的管理水平。 相似文献
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1仔猪腹泻的类型1.1病毒性腹泻1.1.1传染性肠胃炎(TGE)。本病是猪的一种急性高度接触性肠道疾病。病原体为冠状病毒科冠状病毒属。1.1.2流行性腹泻(PED)。猪流行性腹泻是一种急性、高度接触性的传染病,以水样腹泻、呕吐、脱水和新生仔猪的高死亡率为特征。流行性腹泻是独立的猪的急性肠道传染病。 相似文献
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<正>猪德尔塔冠状病毒（Porcine deltacoronavirus,PDCoV）是德尔塔冠状病毒属的成员,是一种猪肠道致病性冠状病毒,可引起新生仔猪急性腹泻、呕吐和脱水。PDCoV最初于2012年在香港进行的一项分子监测研究中被发现,后来于2014年在美国俄亥俄州腹泻猪群中出现。随后,疫情在全球蔓延,目前,已在韩国、中国大陆、泰国、越南和老挝等多国的仔猪粪便样本中检测到该病毒。PDCoV的流行病学、 相似文献
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猪流行性腹泻又称流行性病毒性腹泻(Epidemic viral diarrhea,EVD),是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种猪肠道传染病,以腹泻、呕吐和脱水为主要特征,是危害新生仔猪最严重的肠道传染病之一.2012年初,该病在辽宁省部分地区的多家规模化猪场均有发生,由于对该病缺乏必要的诊断与治疗手段,入冬以来该病再次出现,且短时间内呈现出高发病率、高死亡率的流行特点,给养猪行业造成了巨大的经济损失.
1发病情况
2012年初,沈阳市苏家屯区某种猪场哺乳舍中的新生仔猪开始陆续发病,症状主要为急性腹泻,呕吐,脱水,死亡,极个别有神经症状,所排粪便多为黄、绿、灰白颜色,发病率高,死亡率高,按照一般性肠道感染治疗均不见效,该病一直持续到当年7月初自然好转,之后再无此症状出现,累计死亡新生仔猪近千头. 相似文献