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为了研究中草药对3种不同血清型禽源沙门菌的体外抑菌效果,采用水煎法制备黄连、黄柏、白头翁、金银花、女贞子、乌梅6种单味中草药水提液,然后进行药物敏感性试验,并进一步测定最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示,鼠伤寒沙门菌LLCL-8株对黄连、金银花和白头翁较为敏感,MIC分别为(62.50±0) mg/mL、(83.33±29.46) mg/mL、(125.00±0) mg/mL,MBC分别为250.00 mg/mL、250.00 mg/mL、大于500.00 mg/mL;鸡白痢沙门菌LLC-51株对黄连敏感,MIC为(31.25±0) mg/mL,MBC为125.00 mg/mL;肠炎沙门菌S株对黄连、白头翁敏感,MIC分别为(62.50±0) mg/mL、(104.16±29.46) mg/mL,MBC均为250.00 mg/mL。说明黄连对3种血清型禽源沙门菌具有广谱抑菌作用,且抑菌效果相对明显;白头翁、金银花对某些血清型菌株具有较好的抑菌效果。 相似文献
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为探讨中草药对肠道免疫作用的机理,试验对鸡小肠固有膜内淋巴细胞数量进行了动态观察,将120只1日龄海兰褐公雏养至37日龄,随机分为4组,其中A、B、C组为试验组,每天分别灌服高剂量(9.0 mg/mL)、中剂量(6.5 mg/mL)和低剂量(4.5 mg/mL)的中草药,D组为对照组,并运用组织学常规切片技术和H.E.染色法,观察试验组和对照组鸡在55,66,73日龄时小肠固有膜中淋巴细胞的数量。结果表明:试验组鸡小肠固有膜内的淋巴细胞数量与对照组相比差异极显著(P<0.01)。说明中草药可提高鸡小肠固有膜内淋巴细胞的数量。 相似文献
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肌醇对哲罗鲑抗氧化能力的影响及组织病理学观察 总被引：1，自引：0，他引：1
为期56 d的饲养试验旨在探讨肌醇对哲罗鲑( Hucho taimen)抗氧化能力的影响,并进行不同肌醇含量下哲罗鲑肠道、肝脏的组织病理学观察。选择平均体重为(2.83±0.44) g健康的哲罗鲑630尾,随机分为7组(每组3个重复,每个重复30尾鱼),分别饲喂以鱼粉、明胶和酪蛋白为蛋白质源配制的肌醇含量为99.8(不额外添加肌醇)、199.8、299.8、499.8、699.8、899.8和5099.8 mg/kg的7种试验饲料。结果表明：饲料中肌醇含量显著影响肝脏中超氧化物歧化酶( SOD)活性和丙二醛( MDA)含量( P<0.05)。肝脏SOD活性在899.8 mg/kg组达最高值,显著高于99.8、199.8和5099.8 mg/kg组( P<0.05);肝脏MDA含量随着肌醇含量的升高呈先下降后上升趋势,在499.8 mg/kg组达最低值,显著低于99.8和199.8 mg/kg组( P<0.05)。饲料中肌醇含量过低(99.8 mg/kg)或过高(5099.8 mg/kg)时均会使组织发生病理性损伤,比如肝脏会出现空泡变性,细胞轮廓模糊等情况;肠道褶皱变宽变短,排列疏松。由此得出,饲料中肌醇含量为299.8~899.8 mg/kg时哲罗鲑的抗氧化能力较高;饲料中肌醇含量过高或过低都会导致哲罗鲑抗氧化能力降低,肠道、肝脏发生不同程度的病变。 相似文献
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《中国草食动物科学》2017,(2)
为研究维生素E对4℃保存娟姗牛精液品质和抗氧化保护作用的影响,用假阴道法采集体格健硕的娟姗牛精液,在稀释液中分别添加0 mg/mL、0.01 mg/mL、0.03 mg/mL、0.05 mg/mL、0.07 mg/mL、0.09 mg/mL的维生素E,将新鲜精液稀释至1.47×10~6/mL,于4℃环境下保存48 h,以评价精子活力、精子顶体完整率、谷胱甘肽还原酶(GR)和过氧化氢酶(CAT)活性等精液品质指标。结果显示:娟姗牛精液4℃保存至48 h时,维生素E 0.03 mg/mL添加组娟姗牛精子活力显著高于0.05 mg/mL维生素E添加组(P0.05),极显著高于对照组和其他试验组(P0.01);维生素E 0.03 mg/mL添加组牛精子顶体完整率极显著高于对照组和其他试验组(P0.01);GR酶活性维生素E 0.03 mg/mL添加组牛达71.55 U/L,较0.05 mg/mL维生素E添加组和0.07 mg/mL维生素E添加组高,且差异显著(P0.05),较对照组和其他添加组差异极显著(P0.01);维生素E 0.03 mg/mL添加组牛精子CAT值达5.68 U/mL,极显著高于对照组和其他添加组(P0.01)。说明在精液稀释液中添加0.03 mg/mL的维生素E可明显提高4℃环境保存娟姗牛精液的品质。 相似文献
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《中国家禽》2016,(21)
为了减少抗菌素在家禽生产中的不合理应用,寻找鸡毒支原体(MG)敏感的中草药,通过测定100种中草药对鸡毒支原体的最低抑制浓度(MIC)试验,在此基础上选择了30种敏感性较高的药物对6株MG分离株进行了MIC测定。结果表明,黄连(0.49mg/mL,6/6)最好,其次是乳香、没药(0.98mg/mL,3/6)、桔梗(1.95mg/mL,5/6)、土茯苓(1.95mg/mL,3/6)、黄芩(3.91mg/mL,6/6)、白头翁(3.91mg/mL,5/6)。中草药煎剂pH值与渗透压对MG体外抑制试验的影响研究表明,中草药煎剂在进行MIC试验时,其pH值和渗透压只对前1~2管有影响,随着递倍稀释,影响消失。研究筛选的对MG有抑制作用的中草药为进一步研究MG治疗组方提供了试验数据。 相似文献
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为了研究中药复方制剂对脂多糖(LPS)诱导的小鼠肠炎模型的保护作用,将ICR小鼠随机分为空白对照组(灌胃蒸馏水)、LPS造模组(灌胃蒸馏水)、阳性对照组(灌胃5μg/mL地塞米松)、中药复方制剂高剂量组(灌胃200 mg/mL中药)、中剂量组(灌胃100 mg/mL中药)和低剂量组(灌胃50 mg/mL中药)。每组小鼠预防性灌胃7 d,最后一次给药后除空白对照组,其他组小鼠立刻腹腔注射2 mg/mL的LPS,注射6 h后观察小鼠整体状况和粪便状态,评估疾病活动指数。同时检测小鼠血清生化指标,测定血清和肠组织中炎症因子含量,HE染色观察小鼠小肠组织形态。结果：与LPS组相比,不同浓度的中药复方制剂均能够改善小鼠的整体状况及粪便状态,疾病活动指数显著降低(P<0.05)。此外,与LPS组相比,不同浓度的中药复方制剂组小鼠的血清生化指标碱性磷酸酶(ALP)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)显著下降(P<0.05),血清和肠组织中炎性因子的释放量显著降低(P<0.05),肠组织形态趋于正常。本研究结果表明中药复方制剂能够缓解LPS诱导的小鼠肠炎,具有较好的抗炎作用。 相似文献
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本研究旨在建立一种操作简单的仔猪小肠上皮细胞体外培养体系，为猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）的相关研究提供材料。研究以未吃初乳的新生仔猪作为肠道供体，采用肠腔面刮取肠黏膜和机械分离分散的方式进行原代细胞的体外分离。采用0.1%胰蛋白酶差速消化法进行仔猪小肠上皮细胞的纯化；比较新生弱仔猪和正常仔猪作为供体对原代小肠上皮细胞活性的影响；MTT法比较不同代次原代细胞的增殖活性；免疫荧光和实时荧光定量RT-PCR方法检测PEDV毒株CV777在原代小肠上皮细胞感染和增殖情况。结果显示，本研究建立的体外分离培养方法能获得增殖活性良好的原代小肠上皮细胞，具有明显的"S"型细胞增殖曲线。通过胰酶差速消化可得到纯度高、形态单一的小肠上皮细胞，同时细胞连续传代5次仍保持良好的增殖活性。弱仔猪和正常仔猪分离培养的小肠上皮细胞的增殖活性比较显示，两者并没有明显区别，这为降低原代细胞培养的成本提供新的思路。免疫荧光和实时荧光定量RT-PCR结果显示，PEDV可感染本方法分离培养的仔猪原代小肠上皮细胞，并在其中进行复制增殖。本研究建立了一种操作简单、实用性强、成本较低的仔猪原代小肠上皮细胞体外培养方法，该方法培养的原代细胞可作为PEDV分离培养和相关研究的基础材料。 相似文献
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SHEN Xuehuai ZHAI Yinjian YIN Lei PAN Xiaocheng ZHANG Danjun ZHAO Ruihong DAI Yin HU Xiaomiao ZHOU Xueli HOU Hongyan 《中国畜牧兽医》2007,47(12):4051-4058
The study was aimed to establish a simple in vitro culture system for piglet small intestinal epithelial cells,and to provide materials for researches on porcine epidemic diarrhea virus (PEDV).In this study,newborn piglets that did not eat colostrum were used as the initial donors,and the primary cells were separated in vitro by scraping the intestinal mucosa from the intestinal lumen and mechanical separation and dispersion.The piglet intestinal epithelial cells were purified using 0.1% trypsin differential digestion method.Compared the effects of newborn weak piglets and normal piglets as donors on the activity of primary intestinal epithelial cells.MTT method was used to compare the proliferation activity of primary cells of different generations.Immunofluorescence and Real-time RT-PCR were used to detect the infection and proliferation of PEDV strain CV777 in primary intestinal epithelial cells.The results showed that the isolation and culture method in vitro used in this study could obtain primary intestinal epithelial cells with good proliferation activity,with obvious S-type cell proliferation curves.The cells with high purity and single morphology could be obtained by differential digestion,and had good proliferation activity after five consecutive passages.The proliferative activity of intestinal epithelial cells isolated from weak piglets and normal piglets had no obvious difference,and provided new way for reducing the cost of primary cell culture.The results of immunofluorescence and Real-time RT-PCR showed that PEDV could infect the primary intestinal epithelial cells,and replicated and proliferated in them.In this study,we established a simple,practical and low-cost method for in vitro culture of piglet primary small intestinal epithelial cells.The primary cells cultured by this method could be used as basic materials for the isolation and culture of PEDV and related research. 相似文献
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饲料脂肪水平对黄姑鱼幼鱼生长性能、肌肉组成和血浆生化指标的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
本研究以鱼油为主要脂肪源,配制脂肪水平分别为4.07%(L4组)、7.04%(L7组)、10.05%(L10组)和12.97%(L13组)的4种等氮配合饲料,并将1 200尾初始平均体重为(41.7±3.1)g的黄姑鱼幼鱼分成4组,进行为期8周的饲养试验,探讨饲料脂肪水平对黄姑鱼幼鱼生长性能、肌肉组成和血浆生化指标的影响。每组设3个重复,每个重复放养100尾鱼。结果表明:L4和L7组黄姑鱼幼鱼的终末均重、终末均体长、增重率、成活率、饲料效率、蛋白质效率、肥满度和脏体比均显著高于L10和L13组(P0.05);L7组黄姑鱼幼鱼的特定生长率和肝体比显著高于L10和L13组(P0.05),但L7和L4组之间差异不显著(P0.05);L4、L7和L10组黄姑鱼幼鱼的肌肉粗蛋白质含量显著高于L13组(P0.05),L4、L7和L10组之间差异不显著(P0.05);L4组黄姑鱼幼鱼的肌肉粗脂肪含量显著低于L7、L10和L13组(P0.05),L7、L10和L13组之间差异不显著(P0.05);L7组黄姑鱼幼鱼的肌肉粗灰分含量显著低于L4、L10和L13组(P0.05),L4、L10和L13组之间差异不显著(P0.05);L4和L7组黄姑鱼幼鱼的血浆中总蛋白、白蛋白、球蛋白、甘油三酯、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白含量显著高于L10和L13组(P0.05),而葡萄糖和胆固醇含量以及乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶、谷草转氨酶和碱性磷酸酶活性则显著低于L10和L13组(P0.05)。综合以上试验结果,在本试验条件下,黄姑鱼幼鱼饲料中适宜的脂肪水平为7.04%。 相似文献
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试验旨在探讨稳定可靠的贮精腺上皮细胞分离及原代培养方法,为研究鸡贮精机理提供细胞模型。以鸡输卵管的子宫阴道交接部组织样为材料,采用酶消化法和组织块培养法分离培养母鸡贮精腺上皮细胞,观察母鸡贮精腺上皮细胞的培养情况,比较不同细胞培养方法获得贮精腺上皮细胞的生长情况。结果表明,用胶原酶或胰酶单独消化母鸡子宫阴道交接部组织,经100目过滤后获得的贮精腺上皮细胞24 h后可贴壁,但48～72 h后细胞死亡;用胶原酶Ⅺ(0.01 g/mL)与胰酶(0.25%)先后消化母鸡子宫阴道交接部组织后再经100目过滤获得的贮精腺上皮细胞贴壁性良好,24～48 h细胞出现明显增殖,72 h后细胞增殖速度减慢,开始死亡;用组织块培养法7 d可获得鸡贮精腺上皮原代细胞,该细胞可传2～3代;用组织块培养法获得的细胞进行免疫组化试验,发现细胞表达贮精腺差异表达基因编码的NXPH1蛋白,该蛋白在培养细胞内的表达符合其分泌蛋白特性,表明组织块培养法所获细胞可用于后续研究。综上,用组织块培养法获得的鸡贮精腺上皮细胞可为研究母鸡贮精腺机制提供细胞模型。 相似文献
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通过比较组织块贴壁培养法、组织块再移法、胰蛋白酶消化法、胶原酶Ⅱ消化法和胶原酶消化配合组织块贴壁法分离、培养、纯化山羊乳腺上皮细胞,绘制细胞生长曲线并计算细胞群体倍增时间,研究乳腺上皮细胞培养效果。结果显示,利用胶原酶消化配合组织块贴壁法不能获得正常生长的乳腺上皮细胞;利用组织块贴壁培养法、组织块再移法和胶原酶Ⅱ消化法获得大量的乳腺上皮细胞,所得到的上皮细胞生长曲线呈典型的＂S＂型,符合细胞生长的一般规律。组织块再移法不仅可快速获得大量纯化的乳腺上皮细胞,而且所得到的细胞经传代后,细胞群体倍增时间最短、增殖能力最强,表明,该法是获得山羊乳腺上皮细胞最适宜的方法。 相似文献
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目的：建立荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞的分离培养方法。方法：采用组织块种植法培养奶牛乳腺上皮细胞,利用胰蛋白酶差时消化法分离、纯化上皮细胞。结果：成功培养出奶牛乳腺上皮细胞,显微镜下观察,纯化的乳腺上皮细胞呈典型上皮细胞形态,细胞之间排列紧密,呈鹅卵石铺路样,形态均一,多角形的单层聚集。通过荧光免疫细胞染色方法对细胞骨架蛋白-角蛋白18进行鉴定,呈现阳性反应。乳腺上皮细胞增殖旺盛,经25次以上传代后长势仍然良好。结论：采用组织块种植法结合胰酶差时消化法成功获得纯化的奶牛乳腺上皮细胞。 相似文献
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Long AC Agler A Colitz CM Zhang J Hayek MG Failla ML Bomser JA 《Veterinary ophthalmology》2008,11(1):38-42
OBJECTIVE: The purpose of this study was to characterize the proliferation and differentiation of primary canine lens epithelial cells (LEC) under standard culture conditions. PROCEDURE: Canine LEC were isolated by mechanical dissection of the canine globe and enzymatic digestion of the lens capsule from fresh lenses. Isolated capsules and cell suspensions were seeded in laminin-coated culture flasks. Canine LEC proliferated and formed monolayers, which could be passaged and maintained for approximately 2 weeks. Cells were characterized morphologically and cell lysates examined for expression of protein markers of epithelial origin and differentiation. RESULTS: Canine LEC exhibit morphologic characteristics of epithelial cells when cultured on laminin/lysine coated flasks. Expression of epithelial cell marker, cytokeratin 5, was highest at passage 1 and diminished with increasing passage number. Expression of gamma-crystallin, a protein found only in differentiated lens fiber cells, increased at passage 6. A laminin/lysine-coated surface supported optimal proliferation of canine LEC. Both an initial seeding density of 1 x 10(5) cells/cm(2) and culture in Dulbecco's modified essential media (DMEM) supplemented with 10% FBS supported a doubling time of less than 48 h in canine LEC. CONCLUSION: This study demonstrates that primary canine LEC retain the characteristics of lens epithelial cells prior to passage 6 under the described culture conditions and represent a suitable in vitro model for investigating lens physiology and cataractogenesis. 相似文献
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从动物耳皮肤组织采样 ,采用将组织块剪碎后直接贴附于培养瓶底部的方法进行原代培养 ,该方法使原代细胞出现率及可传代率均达到 10 0 %。根据上皮样细胞和成纤维样细胞贴壁紧实程度的不同 ,用 0 .0 5 %的胰蛋白酶-EDTA对其进行消化 ,可将两种不同类型的细胞进行分离和纯化。通过脂质体介导 ,以BLG -hINS(含乳球蛋白调控基因的人胰岛素原基因 )基因作为目的基因、GFP(绿色荧光蛋白 )基因作为标记基因共转染绵羊成纤维细胞 ,经G - 4 18筛选后 ,得到转染细胞。对转染的细胞分别用单细胞显微操作法和有限稀释法进行细胞克隆 ,两种方法均可得到克隆细胞。选形态正常、生长均匀的 5个细胞克隆进行PCR检测 ,结果 5个克隆均转有GFP基因 ,其中两个转有BLG -hINS基因。高代培养细胞、转染细胞和克隆细胞经核型分析后 ,染色体数目均为 2 7对 ,表明绵羊耳的成纤维细胞建立细胞株后 ,可以作为外源基因转染的有效供体细胞。 相似文献