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1.
仁增旺姆 《国外畜牧学(猪与禽)》2023,(3):53-55
为了了解海南藏族自治州共和县规模化猪场中仔猪副猪嗜血杆菌分离株的流行情况及对常用抗菌药的耐药情况。本试验于2022—2023年采集海南藏族自治州共和县规模化猪场中患疑似副猪嗜血杆菌病的仔猪鼻拭子、关节液、胸腔积液、肺脏等病料,共计283份。采用细菌分离鉴定、PCR方法对采集的病料进行副猪嗜血杆菌分离鉴定,采用人工感染小鼠试验验证分离株的致病性,采用纸片扩散法(Kirby-Bauer,简称K-B法)检测致病性副猪嗜血杆菌分离株对临床中常用抗菌药的耐药性。结果显示：从采集的283份病料中分离到128株副猪嗜血杆菌,通过致病试验显示,91株副猪嗜血杆菌能引起小鼠不同程度发病与死亡,为致病性菌株;分离的91株致病性副猪嗜血杆菌对磺胺间甲氧嘧啶、阿莫西林、氨苄西林等6种药物的耐药率为85.7%以上,对其他药物的耐药率为3.3%～25.3%,本研究为该地区仔猪副猪嗜血杆菌合理用药及防控提供参考。 相似文献
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为确定湖北省恩施自治州某鹿场致患病鹿蹄腐烂的病原菌,本研究于患病梅花鹿的前蹄病健结合处采集病料并对其进行细菌分离培养,最终分离到一株厌氧菌。对该细菌进行了形态观察、生化试验、16S rRNA基因序列测定、细菌生化鉴定仪鉴定、药物敏感性试验以及小鼠致病力试验等。结果显示该细菌在显微镜下呈革兰氏阴性、丝状、长短不一的杆菌。16S rRNA基因序列测定结果显示该分离菌株与多株坏死梭杆菌参考株的同源性均为99%,将其命名为HNFnf;经Vitek细菌鉴定仪鉴定该细菌为坏死梭杆菌;药敏试验结果显示,该菌对青霉素、头孢类等中度敏感,对阿米卡星、链霉素、庆大霉素耐药。本研究为临床治疗由坏死梭杆菌引起的反刍动物"腐蹄病"与"肝脓肿"提供参考依据。 相似文献
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《中国兽医杂志》2019,(9)
为了解镇江地区副猪嗜血杆菌血清型流行情况与耐药性情况,本试验采集患病仔猪的肺脏、肝脏、关节渗出液等病料组织85份,采用细菌分离、形态学观察、培养特征鉴定、PCR鉴定等方法对副猪嗜血杆菌进行鉴定,采用PCR法和K-B药敏纸片法分别检测副猪嗜血杆菌血清型及耐药性。结果显示,从85份病料组织中分离得到48株副猪嗜血杆菌;48株副猪嗜血杆菌具有7种血清型,其中,血清5型和12型为流行的主要优势血清型,分别占分离菌株的25.0%和31.3%; 48株副猪嗜血杆菌对磺胺间甲氧嘧啶、阿莫西林、庆大霉素等9种药物耐药率在50.0%～100.0%之间,对其他药物耐药率在12.5%～25.0%之间。说明该地区分离的副猪嗜血杆菌血清型流行情况复杂,且耐药性严重。本试验为该地区的副猪嗜血杆菌防控提供研究基础。 相似文献
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副猪嗜血杆菌的分离鉴定与药敏试验 总被引：6，自引：3，他引：3
对广东15个送检的疑似猪传染性副猪嗜血杆菌病的病猪样品,用TSA培养基进行细菌的分离,并对分离菌株进行细菌的形态观察、培养特性和生化试验鉴定,以及用副猪嗜血杆菌16S rRNA基因的特异性引物进行PCR鉴定。试验结果表明,有7株分离菌株扩增出了821 bp的特异性目的条带,结合形态观察、培养特性和生化试验鉴定,结果表明成功分离到了7株副猪嗜血杆菌;药敏试验结果显示,分离菌株对氨苄西林、多粘菌素、庆大霉素等药物较敏感。 相似文献
7.
为鉴定陕西某规模化场猪场发酵床养殖圈舍仔猪发生严重腹泻症的病原,本研究对病死仔猪肝、脾等脏器进行细菌分离,对疑似致病菌进行生化试验鉴定和16S rDNA测序,并进行小鼠接种试验验证细菌毒力和药敏实验检测敏感药物.结果显示分离菌为鲍曼不动杆菌(Ab),对小鼠具有较强的致病性,对卡那霉素等少数抗生素敏感,对其它多种抗生素具有耐药性.本研究结果表明Ab对仔猪具有较大威胁,特别是对发酵床养殖模式下的仔猪具有更大威胁. 相似文献
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LI Hao-xin DUAN Gang XIANG Xun ZU Fei YANG Zhi-yuan ZHU Qi DAI Fei-yan CHANG Hua 《中国畜牧兽医》2015,42(7):1883-1889
The assay was aimed to investigate the cause of death of diseased and dead piglets,we collected samples and identified by growth characteristics of bacteria in different mediums,biochemistry identification,PCR amplification of 16S rRNA genes and sequence analysis.The results showed that the isolate was Listeria.Drug sensitive test of the isolate to 20 antibiotics was detected.The results showed that this bacterium was highly sensitive to penicillin G,fosfomycin and amoxicillin and so on;However,it was resistant to furazolidone and so on.The growth curve of Listeria showed that the bacterium was in the proliferation period when 37 ℃ cultured 6 to 14 h.The results of this study provided scientific bases for detection and treatment of listeriosis in China. 相似文献
12.
从上海某羊养殖场获得了一株单核细胞增生李斯特菌分离株CMG47。为了确定该单核细胞增生李斯特菌分离株的分子分型,了解其生物学特性,本研究通过多重PCR对该菌株进行谱系和血清型分析,利用多位点序列分型（MLST）方法鉴定其分子分型。采用PCR方法对主要毒力基因进行检测,并通过体外观察和荧光定量PCR对菌株溶脂溶血特性进行分析。将菌株通过腹腔注射ICR小鼠和静脉注射斑马鱼,测定其毒力。研究结果表明该分离株属于谱系Ⅰ,1/2b血清型;序列分型为ST619;携带prfA、inlA、inlB、plcA、plcB、mpl、actA、hly等主要毒力因子;体外无明显溶脂活性,溶血活性较弱;小鼠和斑马鱼试验均显示,该分离株属于强毒株,与强毒参考株EGDe的毒力相当（P>0.05）。该分离株的谱系/血清型为引起李斯特菌病的主要型别,拥有整套主要毒力因子,为单增李斯特菌强毒株。本研究为李斯特菌病散发病例的流行和传播特征分析提供了分子生物学基础,对建立健全李斯特菌监测体系和风险评估意义重大。 相似文献
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Kalorey DR Kurkure NV Warke SR Rawool DB Malik SV Barbuddhe SB 《Comparative immunology, microbiology and infectious diseases》2006,29(5-6):295-300
The isolation of pathogenic Listeria spp. in faecal samples of captive wild animals was studied. Isolation of the pathogen was attempted from the samples by selective enrichment in University of Vermont Medium and plating onto Dominguez-Rodriguez isolation agar, PALCAM agar and modified McBride Listeria agar. Pathogenicity of the isolates was tested by Christie, Atkins, Munch Petersen test, phosphotidylinositol-specific phospholipase C assay, mice inoculation test and chick embryo bioassay. Listeria monocytogenes was isolated from eight (16%) of 50 faecal samples from six different mammals and one bird. Out of eight isolates, one isolate from jackal proved to be pathogenic by all the pathogenicity testing assays. PCR amplification of virulence genes suggested that the isolate was potentially pathogenic. 相似文献
14.
ZU Fei DUAN Gang XIANG Xun LI Hao-xin YANG Zhi-yuan ZHU Qi DAI Fei-yan CHANG Hua 《中国畜牧兽医》2015,42(11):2902-2908
In this study,the dung samples of a sick cattle from an animal hospital were detected by bacteria cultivation.The bacteria were cultured by different differential media,and analyzed by biochemical test,16S rDNA gene was amplified by PCR,then sequenced and constructed phylogenetic tree,drug sensitivity test and growth curve were carried out.The results showed that the bacteria could grow smooth bulge,rounded edges,different size,different colors of the bacterial colonies in blood agar,chocolate agar,LB agar and so on,but could not grow in MRS agar and high salt mannitol agar.The results of lactose,maltose,mannitol and so on were negative,the results of glucose,simmon's citrate and urea were positive,this bacteria were identified as Streptococcus bovis by these preliminary results,and confirmed by phylogenetic tree construction.This isolate exhibited 99% nucleotide sequence identity with Streptococcus bovis RD09.The drug sensitivity test result of Streptococcus bovis showed that it was extremely sensitive to doxycycline and kanamycin,highly sensitive to erythromycin,sensitive to streptomycin,novobiocin,cotrimoxazole,ceftriaxone and gentamycin,resistant to chloramphenicol,cephalosporins cefradine and amoxicillin.The growth curve of Streptococcus bovis indicated that a rapid growth phase of the bacteria was from 2 to 23 h,the stationary phase was from 23 to 28 h,the decline phase was after 28 h.These experimental data provided the prerequisite for further study of Streptococcus bovis. 相似文献
15.
本研究对某动物医院的一头病牛粪样进行细菌分离鉴定,PCR扩增细菌16S rDNA基因并测序,构建进化树,对该菌进行药敏试验分析及生长曲线的测定。结果显示,该菌在血琼脂、巧克力琼脂、LB琼脂等培养基上均能长出光滑凸起,边缘圆润,大小各异,颜色不同的菌落,而在MRS琼脂、高盐甘露醇琼脂上却不生长;生化鉴定结果显示,乳糖、麦芽糖、甘露醇等均为阴性,葡萄糖、西蒙氏柠檬酸盐、尿素均为阳性,上述结果初步鉴定此菌为牛链球菌;进化树的构建进一步证明了分离菌属于牛链球菌,其与牛链球菌RD09的同源性为99%;药敏试验结果显示,牛链球菌对强力霉素、卡那霉素极敏感,对红霉素高度敏感,对链霉素、新生霉素、复方新诺明、头孢曲松、庆大霉素均敏感,对氯霉素、头孢拉定、阿莫西林均耐药;从牛链球菌生长曲线可看出2~23 h是牛链球菌的高度繁殖期,23~28 h是稳定期,28 h以后开始衰退。本试验结果为进一步研究牛链球菌奠定基础。 相似文献
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【目的】确定引起新疆石河子地区集约化牛场常发性肺炎的主要病原同时进行病原的体外药物敏感性分析。【方法】采集有典型咳嗽、流涕症状的牛鼻拭子10份和病死牛肺脏组织1份,用牛支原体特异性引物进行PCR检测,将检测为阳性的样本进行病原培养纯化,对纯化后的分离株菌落进行形态学观察、Dienes染色、生化试验及16S rRNA测序和进化分析,通过测定颜色变化单位(CCU)测定分离株生长曲线,并对分离株进行药物敏感性试验。【结果】PCR结果显示,10份鼻拭子中检测出7份牛支原体阳性样本,1份病死牛肺脏组织也检测为阳性;在涂有肺脏组织研磨液培养液的PPLO固体培养基上长出针尖状的菌落,纯化后分离株菌落形态为典型的煎蛋状;Dienes染色可见明显的深蓝色中心脐;生化试验结果显示,分离株不水解明胶、精氨酸、七叶苷,不发酵乳糖、葡萄糖和甘露醇,不分解尿素,可还原氯化三苯基四氮唑;16S rRNA测序结果显示,分离株与牛支原体国际标准株PG45相似性为99.7%,与国内牛支原体地方流行株XBY01、Ningxia-1、NM2012、Tibet-10的相似性最高,均为99.9%;生长曲线测定结果显示,分离株在培... 相似文献
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本研究旨在对山东泰安地区鸡毒支原体的流行菌株进行分离培养及鉴定和纯化,并针对该分离株筛选体外敏感的中药,为后续进一步研究提供材料。采用液体培养法与固体培养法从病鸡组织样品中分离、培养和纯化鸡毒支原体,并通过瑞士染色和姬姆萨染色、血清学方法及分子生物学方法对分离株进行初步鉴定,在此基础上,采用微量稀释法测定8种中药对分离菌株的最小抑菌浓度（MIC）,从而筛选到对分离菌株敏感的中药。结果显示,分离菌株在鸡毒支原体液体培养基中增殖后,培养基颜色由红变黄且呈半透明状态,在固体培养基中培养后呈典型的"煎蛋"样儿菌落,均符合鸡毒支原体培养特性;瑞士染色和姬姆萨染色结果显示,菌体形态符合鸡毒支原体的特征;血清学鉴定结果显示,分离株与鸡毒支原体阳性血清发生凝集;分子生物学鉴定结果显示,所扩增的核酸序列与鸡毒支原体匹配度高达99%;MIC测定结果显示,中药黄连和黄柏对分离的鸡毒支原体的抑菌活性较强,属敏感范畴,其MIC分别为≤0.98和0.39 mg/mL,而中药金荞麦和鱼腥草对鸡毒支原体中度敏感,MIC均≥125 mg/mL,板蓝根、白鲜皮、当归、艾叶对鸡毒支原体均不敏感。综上所述,本研究成功分离到1株鸡毒支原体,并且筛选出4种对该菌株敏感的中药,分别为黄连、黄柏、金荞麦和鱼腥草,为后期进一步研究防治鸡毒支原体病的中药组方时提供参考依据。 相似文献
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【目的】 查明江苏某鹅场鹅发病及死亡原因。【方法】 剖检病死鹅，运用细菌分离纯化、染色观察、生化试验、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）鉴定、16S rDNA测定方法进行病原菌分离鉴定，通过药敏试验和小鼠致病性试验探究分离菌株的特性。【结果】 从患病鹅肝脏分离到1株革兰氏阴性短杆状细菌；生化试验结果显示，此菌株可发酵葡萄糖、麦芽糖、枸橼酸盐、尿素；MALDI-TOF MS鉴定结果显示，此菌株为类志贺邻单胞菌；16S rDNA序列对比分析发现，分离菌与类志贺邻单胞菌相似性最高，达98%以上；药敏试验结果显示，分离菌对左氧氟沙星、美罗培南、头孢西丁、庆大霉素等10种抗菌药敏感，对四环素、头孢吡肟、头孢他啶、头孢唑林表现为中介，对阿奇霉素、复方新诺明、氨苄西林等6种药物表现为耐药，是典型的多重耐药菌；小鼠致病性试验结果显示，分离菌对小鼠的半数致死量为5.0×106.5 CFU。【结论】 本试验首次报道了从鹅体内分离到致病性类志贺邻单胞菌，通过药敏试验筛选了左氧氟沙星、美罗培南、头孢西丁等有效的临床常用抗菌药，分离株对小鼠致病性较强，提示其带来的潜在风险不可忽视。 相似文献
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为探究从四川某动物园1例病死浣熊肝脏中分离到的1株细菌的特性和耐药程度,本试验采用病原分离、革兰氏染色、生化鉴定、16S rRNA测序、致病性试验、药敏纸片扩散法及耐药基因扩增的方法对该分离株进行了形态学及生化鉴定、致病能力和耐药程度分析。结果显示,分离株在普通LB培养基上呈现表面光滑、圆形凸起、边缘整齐、针尖大小的半透明菌落。经革兰氏染色在油镜下观察到蓝紫色球菌,测序结果与GenBank登录号为KY003107.1粪肠球菌（Enterococcus faecalis）的同源性高达99.5%,形态学与生化鉴定特性与粪肠球菌特性相符。致病性试验表明,该菌可导致肝细胞肿胀、变性,具有一定的致病能力;药敏纸片和耐药基因扩增试验表明,该菌对14种常见的抗生素头孢西丁、头孢哌酮、头孢曲松、头孢吡肟、头孢噻肟、氨苄西林、卡那霉素、链霉素、奈替米星、丁胺卡那、阿奇霉素、红霉素、多西环素、四环素耐药,仅对万古霉素和庆大霉素中度敏感。四环素耐药基因tetC检测为阳性;tetM、tetA检测为阴性,氨基糖苷类耐药基因aac （6'）/aph（2″）检测为阳性,aph（3'）-Ⅲ、ant（6）-Ⅰ检测为阴性;大环内酯类耐药基因ermB检测为阳性,ermA、ermC检测为阴性;万古霉素耐药基因vanA、vanB和β-内酰胺类耐药基因TEM检测均为阴性。该试验从浣熊肝脏分离的粪肠球菌表现出多重耐药特性并具有一定的致病能力,结果可为动物园临床肠球菌感染的病例提供一定的药物选择参考,制定合理的感染防治方案。 相似文献
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鄂尔多斯市某羊场发生羊不明原因死亡的疫情,为了寻找病因并制定治疗方案和防治措施,本研究通过临床检查和实验室病理及分子生物学诊断方法确诊并提供治疗方案。试验以病死羊为试验材料,首先对其进行临床检查,包括尸体剖检和病理组织学采样。随后,采用常规无菌操作方法取回其脑组织至实验室,进行触片、染色镜检和分离细菌。病死羊剖检发现,肺脏淤血实变、心外膜点状出血、肾脏质地变软如泥、脑严重水肿等。选取脑组织制备病理切片,在镜下可观察到大脑皮质中性粒细胞浸润及中性粒细胞性血管管套现象;深层脑组织进行触片染色后,在镜下可见单个或成对排列的革兰氏阳性球菌,并分离出1株可疑细菌,命名为NEF1;采用Mega 6.0生物软件依据该分离株的16S rRNA基因而绘制的遗传进化树分析结果显示,分离株NEF1与屎肠球菌的国内分离株（MT197247.1）和伊朗分离株（KM495939.1）聚类在同一分支上,而与GenBank中其他屎肠球菌参考菌株遗传距离较远;药物敏感性试验结果表明,分离株NEF1只对环丙沙星呈现中度敏感,而对青霉素等其他选定的抗生素类药物均呈现明显的耐药性。本试验从病死羊脑组织中成功分离并鉴定了1株屎肠球菌NEF1,同时通过药物敏感性试验方法筛选出来的敏感药物有效控制了该病在发病羊场的进一步蔓延,为该地区羊细菌性疾病的有效防治提供了行之有效的试验数据。 相似文献