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1.
用差速离心法提纯ＰＲＲＳ病毒，利用ＮＣ膜作为载体，在国内外首次成功建立了检测ＰＲＲＳ血清抗体的斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）。抗原包被浓度为１００μｇ／ｍｌ，被检血清工作浓度为１∶１０，酶标兔抗猪ＩｇＧ工作浓度为１∶６００。对７２份北京地区猪血清分别用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和ＩＦ检测，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测阳性率为３３．３％，ＩＦ检测阳性率为３０．６％，与ＩＦ符合率较高，对部分待检血清检测结果表明：６１份１９９１年进口美国猪血清阳性率为０％，１８２份１９９５年进口加拿大猪血清阳性率为４．９４％。本法不需特殊仪器，适用于基层兽医部门和猪场对该病的血清学诊断和流行病学普查 相似文献
2.
Dot—ELISA检测猪生殖和呼吸综合征抗体的研究 总被引：10，自引：3，他引：7
用差速离心法提纯ＰＲＲＳ病毒，利用ＮＣ膜作为载体，在国内外首次成功建立了检测ＰＲＲＳ血清抗体的斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）。抗原包被浓度为１００μｇ／ｍｌ，被检血清工作浓度为１：１０，酶标兔抗猪ＩｇＧ工作浓度为１：６００。对７２份北京地区猪血清分别用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和ＩＦ检测，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测阳性率为３３．３％，ＩＦ检测阳履率为３０．６％，与ＩＦ符合率较高，对部分待检血清检测 相似文献
3.
分别用血清中和（ＳＮ）试验和单克隆抗体（ＴＧＥｍＡｂ和ＴＧＥ／ＰＲＣＶｍＡｂ）阻断酶联免疫吸附试验（Ｂ－ＥＬＩＳＡ）对８１头美国进口猪血清作猪传染性胃肠炎（ＴＧＥ）抗体检测。ＳＮ试验检出７份阳性血清，检出率为８．６４％；Ｂ－ＥＬＩＳＡ试验检出７份ＰＲＣＶ抗体阳性血清，检出率为８．６４％，无ＴＧＥ阳性。ＳＮ试验检出７份ＴＧＥ抗体阳性血清与Ｂ－ＥＬＩＳＡ试验检出的７份ＰＲＣＶ抗体阳性血清完全重合。结果证明，应用单克隆抗体进行的Ｂ－ＥＬＩＳＡ可鉴别诊断ＴＧＥ与ＰＲＣＶ感染，优于ＳＮ试验 相似文献
4.
衣原体单克隆抗体在牛羊血清诊断上的应用 总被引：1，自引：0，他引：1
采用淋巴细胞亲交瘤技术，研制出的抗衣原体单克隆抗体，应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）方法，对本地区所采集的１２８份羊血清、９０份牛血清进行检测，结果，羊血清阳性检出率为２５．８％，牛血清阳性检出率为３２．２％，选择５０份羊血清、５０份牛血清用已建立的检测衣原体抗体ＥＬＩＳＡ与间接血凝试验（ＩＨＡ）进行比较，牛血清ＥＬＩＳＡ阳性检出率为３２．０％，ＩＨＡ为２４．０％，ＥＬＩＳＡ比ＩＨＡ试验高出８个百分点；羊血清ＥＬＩＳＡ阳性检出率为２６．０％，ＩＨＡ为２２．０％，ＥＬＩＳＡ比ＩＨＡ高出４个百分点。 相似文献
5.
从水牛盱眙病病肝和淋巴结提纯病毒抗原，用双层间接ＥＬＩＳＡ和免疫扩散（ＩＤ）检测盱眙病抗体，结果在２９头病牛血清中ＩＤ阳性率为８％，ＥＬＩＳＡ阳性率为９３．１％；５４头疫区牛血清中，ＩＤ阳性率为１．９％，ＥＬＩＳＡ阳性率为１１．１％；非疫牛则两法均为阴性。以淋巴细胞免疫吸附试验证实病牛淋巴细胞的细胞膜上存在有病毒抗原。以病水牛血清和健康水牛对比作免疫电泳，发现病牛血清中缺少ＩｇＭ带 相似文献
6.
应用ＳｅｐｈａｄｃｘＧ－２００层析法纯化鸡减蛋综合症病毒，利用ＮＣ膜作为载体，成功建立了检测ＥＤＳ－７６血请抗体的斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）。抗原包被浓度为２μｇ／ｍｌ，被检血清浓度为１：２０，酶标兔抗鸡１ｇＧ浓度为１：２００．底物溶液最适ｐＨ值为７．２。对Ａ－Ｆ６个养禽场随机抽检血清１６０份，分别用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ、ＨＩ和ＡＧＰ检测，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检出阳性率为５１．９％，ＨＩ检出阳性率为４６．９％，ＡＧＰ检出阳性率为３１．９％。对１４０日龄鸡人工感染试验，测定抗体消长规律。本方法不需特殊仪器。适用于基层兽医部门和养鸡场对ＥＤＳ－７６的血清学诊断和流行病学调查。 相似文献
7.
斑点酶联免疫吸附试验检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体方法的建立 总被引：6，自引：0，他引：6
首次建立了斑点－酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ，美洲株）抗体的方法。特异性鉴定表明，ＰＲＲＳＶ不与猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒阳性血清反应；与美国进口的ＰＲＲＳＶ抗体ＥＬＩＳＡ诊断试验盒检测结果比较，３５份猪血清的阴、阳性检出总符合率为８２．９％（２９／３５），其中Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的阳性检出率略高于进口试剂盒的检出率。 相似文献
8.
间接酶联免疫吸附试验检测猪生殖与呼吸系统综合征血清抗体的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
本研究建立了检测猪生殖与呼吸系统综合征（ＰＲＲＳ）血清抗体的间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），其抗原包被浓度为２μｇ／ｍｌ，血清最适稀释度为１∶１００。试验结果表明：ＥＬＩＳＡ的敏感性高于间接免疫荧光抗体试验（ＩＦＡ），是一种切实可行的诊断方法。 相似文献
9.
以醋酸纤维素膜作为固相载体，辣根过氧化物酶标记鸡抗传染性法氏囊病病毒抗体（ＩＢＤ—ＩｇＧ），饱和二氨基联苯胺为底物显色，建立了鸡传染性法氏囊病双抗体夹心Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ诊断法。经方阵实验确定最佳反应条件为：ＩｇＧ的包被液为０．０５ｍｏｌ／Ｌ（ｐＨ９．６）碳酸盐缓冲液，包被浓度为１：５０；酶标抗体的工作浓度为１：１００；洗涤液为含０．０５％吐温—８０的０．０２ｍｏｌ／Ｌ（ｐＨ７．４）磷酸盐缓冲液；封闭液为含０．２％明胶的洗涤液；封闭时间、抗原及酶标抗体的作用时间均为３７℃３０ｍｉｎ。应用本方法和琼扩试验同步检测２０份已知阳性病料、１２０份待检病料和胚毒尿囊液、１０份正常鸡样品，结果表明，Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ阳性率为９０％，而琼扩试验为４０％；凡琼扩试验阳性者，Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ均呈强阳性，而在Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ阳性样品中，只有４４％呈琼扩试验阳性，Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ的敏感度为琼扩试验的１００倍。 相似文献
10.
I—ELISA特异诊断棘球蚴（包虫）病的研究 总被引：1，自引：1，他引：0
采用亲和层析技术纯化的兔抗棘球蚴抗体，建立了酶联免疫吸附抑制试验（Ｉ—ＥＬＩＳＡ）。取代反应和阻断反应均无非特异反应；检测健康对照血清１２６份（人３６，猪９０），均为阴性；与猪囊尾蚴病血清１３６份（人４６，猪９０）、细颈囊尾蚴病血清３８份（羊２２、猪１６）无交叉反应；对棘球蚴病血清１８３份（人６１、羊７１、猪５１）进行检测，其阳性符合率分别为８８．５％（５４／６１）、９８．６％（７０／７１）、９６．１％（４９／５１）。 相似文献
11.
应用重组猪生殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白为抗原建立I—ELISA检？… 总被引：2，自引：0，他引：2
用重组杆状病毒表达的钎生殖和呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）Ｎ蛋白作为抗原，建立了诊断猪生殖和呼吸综合征（ＰＲＲＳ）的Ｉ－ＥＬＩＳＡ，与ＩＤＥＸＸ公司试剂盒检测结果的符合率为９７．３％，与间接 光抗体试验９ＩＦＡ）的符合率为１００％。用该方法的检测国内猪血清８５份，阳性率为１８．８％；能检出ＰＲＲＳ疫苗免疫猪６ｄ的血清抗体，；与猪瘟、伪狂犬病、猪巴氏杆菌病、猪霉形体病阳性血清无交叉反应。 相似文献
12.
二种方法检测猪传染性胃肠炎病毒抗体的比较 总被引：3，自引：0，他引：3
分别用血清中和试验和单克隆抗体阻断酶联免疫吸附试验对８１头美国进口猪轿清作猪传染性胃肠炎抗体检测。ＳＮ试验同７份阳性血清，检出率为８．６４％，Ｂ－ＥＬＩＳＡ试验检出７份ＰＲＣＶ抗体阳性血清，检出率为８．６４％，无ＴＧＥ阳性。ＳＮ试验检出７份ＴＧＥ抗体阳性血清与Ｂ－ＥＬＩＳＡ试验检出的７份ＰＲＣＶ抗体阳性血清完全重合。结果证明，应用单克隆抗体进行的Ｂ－ＥＬＩＳＡ可鉴别诊断ＴＧＥ与ＰＲＣＶ感染，优于Ｓ 相似文献
13.
本文建立的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ对猪衣原体ＩｇＧ的最小检测量为１．３３×１０－９ｇ．与间接补体结合试验（ＩＣＦ）比较；检测１１０头份猪血清样品，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检出５２份（４７．２７２％，效价≥６４），ＩＣＦ法检出３２份（２９．０９％，效价≥８）．用异种动物衣原体标准阳性血清作阻断试验，证明Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ特异性好（阻断可使原效价下降至少８个单位以上），诊断膜与猪瘟阳性血清、猪水疱病阳性血清、猪口蹄疫阳性血清、猪弓形体阳性血清不出现有意义的交叉反应（效价≤１６）．诊断膜片置室温（２５℃左右）、４℃和－２０℃保存１个月后反应效果不变，对照反应均成立，重复性好（重复符合率为９０．９％），反应效果不受不同批次微量反应板的影响，反应板可重复使用多次，试剂用量较常规ＥＬＩＳＡ大大节省，各步骤均可做到严格定量，操作简便（３小时内可完成），不需要特殊检测仪器，结果客观，肉眼易于判断，是微生物和传染病及寄生虫病诊断技术标准化很有前途的新技术之一． 相似文献
14.
禽流感病毒重组核蛋白ELISA诊断技术的研究 总被引：48，自引：1，他引：47
用表达禽流感病毒（ＡＩＶ）核蛋白基因的杆状病毒感染Ｓｆ９昆虫细胞。以其表达产物制备抗原,建立了以杆状病毒系统表达的ＡＩＶ核蛋白为抗原的禽流感间接酶联免疫吸附试验诊断技术（ｒＮＰ－ＥＬＩＳＡ）。其抗原最适包被量为０．６μｇ／孔,等检血清最适稀释度为１：２００,酶标抗体使用浓度为１：１０００。根据对１４０份ＳＰＦ鸡血清检测结果的统计分析,确定其判定标准为ＯＤ均为阴性;检测Ａ型ＡＩＶ１５个不同亚型（Ｈ１￣Ｈ１５）毒株的特异性血清均为阳性;对人工接种ＡＩＶ的ＳＰＦ鸡第３天即能检出抗体,到第１６２天试验结束时检测仍为阳性。其批内和批间重复试验的变异系数分别在２．９％￣７．２％和３．４％￣９．８％之间。对３１３８份鸡血清进行监测,ｒＮＰ－ＥＬＩＳＡ与全病毒间接ＥＬＩＳＡ与全病毒间接ＥＬＩＳＡ（ＡＩＶ－ＥＬＩＳＡ）、琼脂扩散 相似文献
15.
动物类人乙型肝炎的调查 总被引：3，自引：0，他引：3
作者采用人的乙型肝炎ＥＬＩＳＡ诊断试剂盒检测动物的乙型肝炎。结果ＨＢｓＡｇ检测黄牛血清４３份，阳性率为２．３％（１／４３）；肝浸液４３份，阳性率为２７．９％（１２／４３）；肌浸液４３份，阳性率为９．３％（３／４３）；鸡血清７２份，阳性率为１２．５％（９／７２）；牛奶３７份，阳性率为１０．８％．ＨＢｅＡｇ检测黄牛血清４３份，阳性率为２．８％（２／７２）。其结果表明黄牛，鸡，奶牛均感染类人乙型肝炎病毒 相似文献
16.
家兔黄艾美耳球虫血清抗体ELISA检测法的建立 总被引：2，自引：0，他引：2
应用制备的孢子化卵囊可溶性抗原作了包被抗原建立了兔球虫血清抗体的ＥＬＩＳＡ检测法。其最适条件为：抗原包被浓度，２００μｇ／ｍＬ；包被温度，３７℃（２ｈ）；血清反应时间，１．５ｈ；酶标抗体标准工作浓度，１：１０００；反应时间，１ｈ待检血清稀释度，１：１００：ＥＬＩＳＡ试验的规定吸收值为０．０６，孢子化卵囊可溶性抗原比非孢子化卵囊可溶性抗源更适于作为ＥＬＩＳＡ包被抗原。 相似文献
17.
旋毛虫病McAb快速ELISA诊断盒的研制与应用 总被引：7，自引：0，他引：7
本研究建立了ＭｃＡｂ快速诊断猪旋毛虫病的ＥＬＩＳＡ试剂盒，应用旋毛虫单克隆抗体系和层析纯化抗原（ＰＡＡ）与旋毛虫肌幼虫排泄－分泌抗（ＥＳ）作常规ＥＬＩＳＡ平行检测６１头人工感染旋毛虫病猪血样，阳性率均为１００％，检测健康猪血样１０８２头，阴性率也为１００％，检测疫区自然感染猪血样１２５３头，阳性率分别为１．４４％和１．１２％，随机抽采１７５头猪血样和肉样作旋毛虫病消化法，常规法和快速法对比试验，诊 相似文献
18.
应用商品化酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）试剂盒和血球凝集抑制（ＨＩ）试验同时测定１８７份常规鸡新城疫（ＮＤ）抗体血样。结果显示，二种方法的抗体效价呈显著相关，其相关系数为０．８３。在此基础上，以ＨＩ法为标准方法对ＥＬＩＳＡ的临床检测结果进行了分析。ＨＩ法的测定结果表明，该试验群的抗体阳性率为５４．５％。按试剂盒提供的阴、阳性临界点判定结果，ＥＬＩＳＡ的相对灵敏度为９７．１％，相对特异性为６１．２％ 相似文献
19.
用蔗糖不连续梯度纯化的减蛋综合征＊（ＥＤＳ－７６）病毒包被ＥＬＩＳＡ板，建立了检测ＥＤＳ－７６抗体的间接ＥＬＩＳＡ法。经测定，抗原最适包被浓度为１μｇ／ｍＬ，待检血清最佳稀释度为１：２００，以ＯＤ４９０〉０．３，Ｐ／Ｎ〉２．１判为阳性结果。对４个鸡场的１２０份鸡血清进行检测，阳性率分别为０，４３．３３％，８０．００％和９３．３３％。 相似文献
20.
应用单抗间接ELISA检测兔出血症病毒的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
建立了用于检测脏器组织中兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）抗原的单抗间接ＥＬＩＳＡ法，并与血凝试验（ＨＡＴ）和多克降双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法进行比较，在被检的７８９份样品中，种方法检测结果皆为阴性的有５５１份，皆为阳性者１７３份；单抗间接ＥＬＩＳＡ和多克隆双体夹心ＥＬＩＳＡ均为阳性者３１份；公多克隆双抗体夹心ＥＬＩＳ为阳性者３１份；仅ＨＡＴ为阳性者２份；仅单抗间接ＥＬＩＳＡ为阳性者１份。实验结果证实，单抗间接 相似文献