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相似文献
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1.
D-精氨酸酶法制备工艺研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
以L-精氨酸为原料,经消旋反应得到DL-精氨酸。利用粪链球菌(Streptococcus faecalis)菌体内精氨酸脱亚胺酶对L-精氨酸的专一脱亚胺作用,以87%产率获得D-精氨酸,并以88%产率获得附加产物L-瓜氨酸。测试了转化温度、pH对精氨酸脱亚胺酶活力的影响,实验表明,精氨酸脱亚胺酶的最佳催化条件是:转化体系温度37°C,转化体系起始pH 6.0。1.0 g湿菌体可重复利用7次共转化DL-精氨酸70.0 g,其中D-精氨酸全部保留,而L-精氨酸完全转化为L-瓜氨酸。  相似文献   

2.
【目的】研究耐铁粪肠球菌X4对铁的富集能力,为开发生物有机铁制剂提供依据。【方法】采用单因素试验,以粪肠球菌X4菌体产量和铁富集率为指标,对影响X4铁富集性能的铁离子质量浓度、铁加入时间、X4菌液接种量、培养时间、碳源及氮源种类等发酵条件进行初筛;再采用L18(37)正交试验,以铁富集率为指标,对最佳碳源、氮源添加量及上述其他发酵条件进一步优化;最后在优化的发酵条件下进行15 L发酵罐模拟试验,对X4的铁富集性能进行评价。【结果】粪肠球菌X4铁富集最优发酵条件为:铁离子质量浓度650 mg/L,培养16 h加铁,X4菌液接种量为体积分数18%,培养时间84 h,可溶性淀粉添加量20 g/L,酵母膏添加量15 g/L,氯化铵添加量4 g/L。最优发酵条件下的发酵罐模拟试验结果显示,耐铁粪肠球菌X4的单位菌体产量为5.52 g/L,单位菌体铁富集量101.38 mg/g,铁富集率86.16%,单位菌体有机铁富集量12.67 mg/g,铁有机化率12.5%。【结论】从铁富集量、铁富集率和铁有机化率来看,耐铁粪肠球菌X4具备生产生物有机铁制剂的潜力。  相似文献   

3.
李加友  陈涛 《浙江农业科学》2019,60(9):1651-1653
为了研究黄酒中精氨酸代谢,尤其是其关键酶精氨酸脱亚胺酶对氨基甲酸乙酯形成的影响,对黄酒酿造过程中精氨酸、瓜氨酸含量和精氨酸脱亚胺酶活性开展定期定量分析。结果表明,黄酒酿造过程中,精氨酸脱亚胺酶活性可分为2个阶段显著增加:4~12 d为第1阶段,24~44 d为第2阶段。精氨酸脱亚胺酶活性受温度和pH的影响。当醪液起始pH值为3时,产品中氨基甲酸乙酯的含量仅为醪液起始pH值为3.5时(对照)的35%。由此可知,控制黄酒酿造起始pH可以通过抑制精氨酸脱亚胺酶活性影响精氨酸代谢,从而有效降低产品中的氨基甲酸乙酯含量。  相似文献   

4.
提取精氨酸脱亚胺酶粗酶液,采用硫酸铵分级沉淀法初步分离精氨酸脱亚胺酶,然后通过DEAESephadex A 50柱色谱层析和Sephadex G-100柱色谱层析进一步分离纯化精氨酸脱亚胺酶,并利用SDS-PAGE电泳法来鉴定其纯度,最终达到纯化产碱假单胞菌来源的精氨酸脱亚胺酶(ADI)的目的。结果表明:分离纯化过程中,粗酶液的总酶活为424.43 U,比酶活为0.42 U·mg~(-1);盐析透析酶液的总酶活是222.10 U,比酶活为2.05 U·mg~(-1);离子交换分析活性部位的总酶活为105.83 U,比酶活是5.61 U·mg~(-1);凝胶渗透分析活性部位的总酶活为17.94 U,比酶活为11.80 U·mg~(-1)。纯化得到了电泳纯级别的ADI,其相对纯度为96%。因此,本研究方法可以得到较高纯度和酶活的精氨酸脱亚胺酶。  相似文献   

5.
对产碱假单胞菌产精氨酸脱亚胺酶的发酵条件进行了优化,结果表明,产碱假单胞菌产ADI的最佳发酵条件为:10 g·L-1蔗糖为碳源,6 g·L-1蛋白胨为氮源,10 g·L-1精氨酸诱导物,4%的接种量和30%的装液量,发酵温度29℃,发酵时间24 h,摇床转速为150 r·min-1,发酵液的初始p H8.5。在此条件下,产碱假单胞菌产ADI的酶活最高。  相似文献   

6.
分离鉴定一株疑似乳酸粪肠球菌.通过对表型特性包括培养特性、形态学观察、生化试验等鉴定,同时结合16S rDNA系统进化分析;结果该株革兰氏阳性菌能在10℃和45℃生长.接触酶阴性,发酵葡萄糖产酸不产气,可生长于6.5%NaCl和pH9.6的环境等,16S rDNA系统进化分析与粪肠球菌有最高同源性.结论表明分离株为乳酸粪肠球菌.  相似文献   

7.
绿原酸抑制金黄色葡萄球菌机理研究   总被引:4,自引:0,他引:4       下载免费PDF全文
为探索绿原酸(CGA)抑制金黄色葡萄球菌增殖的机制,通过检测β-半乳糖苷酶的变化反映细菌细胞膜通透性的变化,凝固酶的活性反映细菌致病力;用Bradford法、DNS法和DNP法分别检测可溶性蛋白质量浓度、还原糖利用能力和丙酮酸质量浓度的变化反映细菌代谢的改变.结果显示CGA处理金黄色葡萄球菌后菌液中β-半乳糖苷酶出现泄漏,且漏出量与CGA质量浓度呈量效关系,无血浆凝固现象,菌液中还原糖质量浓度急剧升高,可溶性蛋白质量浓度降低量超过50%,丙酮酸质量浓度升高5.34%,与对照组相比差异极具统计学意义(p<0.01),表明CGA可能通过改变金黄色葡萄球菌细胞膜的通透性,阻碍物质和能量的代谢及细菌蛋白合成而达到抑菌作用.  相似文献   

8.
为研究嗜水气单胞菌对黄鳝Moronecidin基因表达的影响,用不同浓度嗜水气单胞菌菌液感染健康黄鳝,采用荧光定量PCR方法分别检测染菌黄鳝脾脏、肾脏和肌肉中Moronecidin基因在感染后12、24、48 h的表达量。结果表明,Moronecidin基因在健康黄鳝的上述3种组织器官中都有表达;腹腔注射嗜水气单胞菌后,该基因的表达量明显升高。随着感染时间的延长,3种组织器官中Moronecidin基因的表达量在处理1(菌液浓度为1亿CFU/mL)均呈现逐渐升高的趋势,处理2(菌液浓度为2亿CFU/mL)脾脏中Moronecidin基因的表达量随处理时间延长而逐渐升高,而肾脏和肌肉中的表达量则呈先升高后降低的趋势;处理3(4亿CFU/mL)Moronecidin基因的表达量在3种组织器官中均逐渐降低。  相似文献   

9.
重组褐藻胶裂解酶基因工程菌超声波破碎条件研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
褐藻胶裂解酶是制备褐藻胶寡糖的重要工具酶,利用工程菌进行褐藻胶裂解酶基因的克隆与高效表达是提高酶活的主要途径之一。工程酶位于胞内,需采取有效破碎手段获取。对重组褐藻胶裂解酶基因工程菌E.coli TOP10采用超声波破碎,分析了超声波破碎强度、总工作时间、NaCl浓度对菌体破碎程度及酶活力的影响。通过单因素试验和正交试验得出重组大肠杆菌的最佳破碎条件为:菌液浓度40 mg/mL,菌液体积50 mL,超声波工作时间4 s,间歇时间8 s,超声波破碎强度50%,总工作时间6min,NaCl浓度为0.15 mol/L。在该条件下获得褐藻胶裂解酶粗酶液的酶活为21 U/mL。  相似文献   

10.
对2株鸭源肠球菌临床分离株和1株粪肠球菌参考菌株的形态特征、培养特性、生理生化特性、对药物的敏感性等生物学特性进行了初步研究。结果表明,3个被检菌株在光学显微镜下呈球形、革兰氏阳性染色和链状排列方式,能在10℃、45℃和6.5%NaCl肉汤等条件下生长,能耐热60℃30min,其特性均符合肠球菌属的特征,各菌株生化反应特性均与粪肠球菌特性基本一致,3个菌株均可鉴定为粪肠球菌。药敏试验结果表明,3个菌株均对青霉素、万古霉素、庆大霉素、红霉素和氯霉素敏感而对四环素耐药。  相似文献   

11.
盐胁迫下不同盐敏感型玉米抗氧化酶活性的变化   总被引:1,自引:0,他引:1  
本试验选用两种不同的玉米品种,在四个不同盐浓度下分析了不同生长期SOD、POD、CAT活性和MDA含量的变化。结果表明,在不同浓度的盐胁迫条件下,SOD活性在三叶期、开花期、灌浆期及掖单22的大喇叭口期均随盐浓度的增加而提高,达到一定限度又降低,而登海9号的大喇叭口期在盐浓度为0~0.6%范围内,随着盐浓度的升高SOD活性逐渐升高。POD活性在三叶期及灌浆期均表现为随盐浓度的增加而提高,达到一定限度又降低;在大喇叭口期及开花期随着盐浓度的升高POD活性逐渐升高。CAT活性在大喇叭口期、灌浆期及掖单22的三叶期表现为随盐浓度的增加而提高,达到一定限度又降低;在开花期及登海9的三叶期随着盐浓度的升高CAT活性逐渐升高。MDA含量逐渐上升。  相似文献   

12.
以猪致病性粪肠球菌染色体DNA为模板,PCR扩增溶血素cylA基因,相应酶切后,克隆到原核表达载体pET32a中,构建pET32a-cylA重组质粒,并将pET32a-cylA质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)。经HindⅢ、XhoI双酶切及测序鉴定,并与已发表的肠球菌溶血素cylA基因序列比较,同源性达99.8%。表明成功构建猪肠球菌溶血素cylA基因的重组表达质粒,为制备单抗、开发疫苗及其致病机制研究奠定了基础。  相似文献   

13.
为研究不同贮藏条件下盐水鸭肉中粪肠球菌R-612-Z1的生长情况,在无菌条件下对巴氏消毒后盐水鸭肉进行以下处理:将粪肠球菌R-612-Z1菌悬液喷洒至鸭肉上,真空包装0℃贮藏(M1)、托盘包装0℃贮藏(M2)、真空包装4℃贮藏(M3)、托盘包装4℃贮藏(M4)、真空包装10℃贮藏(M5)、托盘包装10℃贮藏(M6),分别设置空白对照。在10 d的贮藏过程中,各样品的pH值均显著降低(P<0.05),其中10℃贮藏的样品pH值比0℃、4℃样品pH值显著降低(P<0.05)。在贮藏1 d后,各处理组的pH值均小于对照组。6组处理样品中粪肠球菌和菌落总数均在第4 d显著增加,在第10 d显著降低。M6处理组样品中粪肠球菌和菌落总数最高。各对照组粪肠球菌和菌落总数在储藏期间均呈上升趋势。通过PCR-DGGE可知,粪肠球菌在试验贮藏过程中生长良好,并且对其他菌种有一定的抑制作用。PCR-DGGE图谱显示,处理组样品中菌落多样性比对照组低。贮藏温度对菌相的影响较大,而包装方式对菌相没有显著影响。结果表明,10℃贮藏最适宜粪肠球菌生长,能显著降低鸭肉pH值,抑制样品中某些微生物的生长。  相似文献   

14.
铁对嗜水气单胞菌毒力因子的影响   总被引:7,自引:0,他引:7  
用含不同浓度铁离子的培养基培养嗜水气单胞菌J-1株,36h时检测细菌含量以及毒素、蛋白酶、载铁体的表达量。发现菌液的浓度随着Fe2+浓度的升高而升高,而毒力因子的表达量则相反,当Fe2+的加入浓度为0时,毒素、蛋白酶、载铁体的表达量达最大值。用SDS-PAGE电泳及免疫转印分析细菌的外膜蛋白(OMP),嗜水气单胞菌J-1株在表达载铁体的同时多表达一条OMP,其相对分子质量为71.7×103,应为载铁体的受体。此时,经ELISA检测细菌菌体及抽取物S蛋白为阴性;经超薄切片电镜观察,菌体无S层结构。随着铁离子浓度的降低,J-1株毒素、蛋白酶及载铁体的表达增多,菌体S蛋白消失,并产生相应的OMP条带,显示铁对嗜水气单胞菌毒力因子的产生具有重要影响。  相似文献   

15.
目的 研究诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及一氧化氮(NO)在中性粒细胞淋球菌感染模型中的表达。方法分离正常人外周血中性粒细胞,在10%胎牛血清DMEM培养液上培养3h,A组加入空白培养基,B组加入淋球菌菌液,随后在0、3、8、12h分别以实时定量荧光PCR测定iNOS mRNA表达,用镉还原法检测NO浓度。结果B组中iN08mRNA表达和NO水平均较A组升高(P〈0.01),NO浓度在8h达到高峰。结论中性粒细胞淋球菌感染模型可成功模拟该菌体内微氧感染环境,可用于研究淋球菌致病机制。  相似文献   

16.
采用PCR技术从致羔羊脑炎粪肠球菌XJ05基因组中扩增得到甲硫腺苷/S-腺苷高半胱氨酸核苷酶(Pfs)基因的全序列,对其功能序列进行分析,同时与其他细菌相应序列及编码的氨基酸进行同源性分析,构建该基因的原核表达载体,对表达蛋白进行反应原性分析。结果显示:XJ05的Pfs基因全长696bp,与XJ01、XJ08、XJ11,与屎肠球菌TX 2466之间的同源性在99.1%以上,其中,XJ05与V583为100%,且关键的功能序列相同,与肺炎链球菌同源性在55.8%以上、霍乱弧菌同源性在55.0%以上;pfs基因编码231个氨基酸,XJ05、XJ01、XJ08、XJ11与肺炎链球菌、霍乱弧菌、粪肠球菌V583、屎肠球菌TX 2466的同源性在86.43%以上;构建的重组质粒经诱导后表达蛋白分子量为28ku,Western blot检测显示特异性条带。结果表明,表达的融合蛋白具有良好的反应原性。  相似文献   

17.
弓形虫微线体蛋白MIC3基因在大肠杆菌内的高效表达研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
江涛  董秀均  汪长城 《安徽农业科学》2008,36(17):7157-7158
[目的]探讨弓形虫微线体蛋白MIC3基因在大肠杆菌内高效表达的条件。[方法]通过SDS-PAGE分析,研究不同菌液密度、诱导剂IPTG浓度和诱导时间对MIC3基因在大肠杆菌中表达量的影响。[结果]MIC3基因在大肠杆菌中最适表达条件为:菌液密度OD600为0.4,诱导剂IPTG终浓度为0.4mmol/L和诱导时间3.5h。在该条件下表达的融合蛋白经初步分离提纯后,1 L培养液约含融合蛋白143mg,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的49%。[结论]该研究为研究和制备弓形虫病的rMIC3诊断试剂奠定了基础。  相似文献   

18.
目的了解重症监护病区革兰阳性球菌感染的病原菌特点及其耐药性。方法回顾性调查本院2011-2012年重症监护病区革兰阳性球菌感染的病原菌构成和分布,参照CLSI M100-S22抗菌药物分组原则进行耐药性分析。结果 452株革兰阳性球菌感染病原菌以金黄色葡萄球菌(43.81%)、粪肠球菌(18.14%)、溶血葡萄球菌(9.07%)、肺炎链球菌(7.30%)和屎肠球菌(6.64%)常见,主要分布在下呼吸道感染(50.22%)、伤口和皮肤软组质织感染(28.10%)、泌尿道感染(11.28%)和血流相关感染(7.74%)。溶血葡萄球菌对A组抗菌药物的耐药性普遍强于金黄色葡萄球菌,屎肠球菌对A组和U组抗菌药物的耐药性均明显强于粪肠球菌,肺炎链球菌对C组抗菌药物和A组的青霉素耐药率均低于30%。结论及时掌控病区病原菌流行趋势和耐药特点,早期、经验、合理用药,有助于感染控制和缩短病程。  相似文献   

19.
为研究精氨酸代谢的关键酶精氨酸脱羧酶(Arginine Decarboxylase,ADC)和一氧化氮合酶(Nitric-oxide Synthase,NOS)mRNA在鹅等级前卵泡中的表达情况。采用高通量测序技术对鹅等级前卵泡进行转录组测序分析,并通过荧光定量PCR对结果进行验证。通过FPKM值计算分析,这2个基因在鹅等级前卵泡中均有表达,且随着卵泡的发育,NOS mRNA的表达呈现先降低后增加再降低的趋势,在初级卵泡中的表达量达到最高值,在中白卵泡中的表达量最低。ADC mRNA的表达则呈现先增加后降低再增加的趋势,在初级卵泡中的表达量最低,在小白卵泡中的表达量最高。荧光定量PCR结果与转录组测序结果基本相同。  相似文献   

20.
乳酸菌(Lactic acid bacteria,IAB)主要是通过发酵产能的,但是有研究发现,在添加氯化高铁血红素后乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)能形成一条呼吸链,在乳酸乳球菌(L.lactis)IL1403中发现了能够编码呼吸链蛋白的基因,同样的现象在粪链球菌中(Strepto coccus feacalis)也有发现。当氧出现在电子传递链中,质子的排出和质子运动势(PMF)的产生都会加倍。相比较其他的兼性或者专性厌氧菌,乳酸乳球菌(L.lactis)的呼吸作用可以促进代谢能量的产生,由于这种呼吸作用,乳酸乳球菌(L.lactis)有更好的生长得率和显著的存活率,这表明在发酵条件下产生的代谢能量不足,从而会限制乳酸乳球菌(L.lactis)的生长。氧在呼吸链中扮演了重要的有益角色,而不是起毒害作用。  相似文献   

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