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1.
咖啡因对猪精液冷冻的影响及冷冻-解冻方法的优化 总被引：4，自引：1，他引：3
本试验对猪精液冷冻保护液中添加咖啡因的作用进行了研究,并优化冷冻-解冻程序,提高0.5 mL细管猪精液冷冻解冻后的质量。在预先设计稀释液配方的基础上,使咖啡因终浓度为0、0.2、0.4、0.6 mg/mL,选择最佳咖啡因浓度,选出最优组合与传统的TCG稀释液和商业用Androhep CryoGuardTM冷冻稀释液进行比较,比较3种不同的冷冻曲线对猪冷冻精液解冻后精子品质的影响,最后对38℃下30 s、50℃下13 s 2种解冻方法进行比较。结果表明,咖啡因浓度为0.2、0.4mg/mL的精子冷冻后活力、质膜完整率、顶体完整率显著高于00、.6 mg/mL(P0.05),最佳添加浓度为0.2 mg/mL;预设计的稀释液配方及冷冻方案优于传统的TCG法(P0.05),但与Androhep CryoGuardTM稀释液(美国商业用)有一定差距(P0.05);A曲线在猪精液冷冻-解冻后活力、质膜完整率和顶体完整率方面均显著优于B和C冷冻曲线(P0.05);50℃水浴解冻13 s显著优于38℃解冻30 s(P0.05)。 相似文献
2.
冷冻速率和解冻温度对猪精液冷冻效果的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
为优化冷冻和解冻方法,提高冷冻效果,本试验比较了不同冷冻速率(-100 ℃ 10 min、-120 ℃ 10 min、-140 ℃ 10 min)和不同解冻温度(37 ℃ 30 s、45 ℃ 30 s、52 ℃ 30 s、60 ℃ 30 s)对猪精液冷冻效果的影响。结果表明,采用-120 ℃熏蒸10 min,解冻后精子活力为0.36,质膜完整率和顶体完整率也优于其他2组,且差异显著(P<0.05)。采用37 ℃ 30 s方法解冻,精子活力、质膜完整率显著高于其他3组,顶体完整率也高于其他3组,但差异不显著(P>0.05),其畸形率最低和60 ℃ 30 s组差异明显(P<0.05),但与45 ℃ 30 s组和52 ℃ 30 s组差异不显著(P>0.05)。因此,采用-120 ℃平衡10 min冷冻,37 ℃ 30 s水浴解冻方法更为适合0.25 mL细管猪冻精解冻。 相似文献
3.
在版纳微型猪近交系（BMI）公猪精液冷冻保存稀释液中添加不同浓度甘油,并对不同解冻液配方和解冻方法进行研究,对比解冻后的精子活力、质膜完整率和顶体完整率,优化BMI公猪精液冷冻保存方法。结果表明,解冻后,甘油浓度为2%和3%组的精子活力、质膜完整率、顶体完整率显著高于1%、4%和5%组（P<0.05）;Ⅰ号解冻液解冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率均显著高于Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ号解冻液（P<0.05）;在活力、质膜完整率和顶体完整率方面,40℃ 6 s和50℃ 6 s这两种程序的解冻效果都显著优于38℃ 30 s（P<0.05）。由此可见,2%或3%的甘油作为抗冻保护剂、Ⅰ号解冻液解冻、40℃ 6 s或50℃ 6 s水浴解冻是较为理想的BMI公猪精液冷冻保存方法。 相似文献
4.
本试验对猪精液冷冻保护液中添加咖啡因的作用进行了研究,并优化冷冻－解冻程序,提高0.5 mL细管猪精液冷冻解冻后的质量。在预先设计稀释液配方的基础上,使咖啡因终浓度为0、0.2、0.4、0.6 mg/mL,选择最佳咖啡因浓度,选出最优组合与传统的TCG稀释液和商业用Androhep〖XC1.TIF〗CryoGuardTM冷冻稀释液进行比较,比较3种不同的冷冻曲线对猪冷冻精液解冻后精子品质的影响,最后对38 ℃下30 s、50 ℃下13 s 2种解冻方法进行比较。结果表明,咖啡因浓度为0.2、0.4 mg/mL的精子冷冻后活力、质膜完整率、顶体完整率显著高于0、0.6 mg/mL（P＜0.05）,最佳添加浓度为0.2 mg/mL;预设计的稀释液配方及冷冻方案优于传统的TCG法（P＜0.05）,但与Androhep〖XC1.TIF〗CryoGuardTM稀释液(美国商业用)有一定差距（P＜0.05）;A曲线在猪精液冷冻－解冻后活力、质膜完整率和顶体完整率方面均显著优于B和C冷冻曲线（P＜0.05）;50 ℃水浴解冻13 s显著优于38 ℃解冻30 s（P＜0.05）。 相似文献
5.
《浙江畜牧兽医》2020,(1)
本试验用0.5 mL细管作为冷冻载体对金华猪精液进行冷冻保存研究,比较3种冷冻稀释液及不同冷冻方法、解冻程序对金华猪精液冷冻的效果,以解冻后的精子活力、畸形率和质膜完整率为判定指标。结果表明:Ⅱ、Ⅲ号冷冻稀释液处理组解冻后精子的活力、畸形率和质膜完整性都明显地高于Ⅰ号冷冻稀释液(P0.05);Ⅱ号冷冻稀释液和Ⅲ号冷冻稀释液处理组之间没有明显差异(P0.05)。采用程序冷冻仪冷冻法,使用Ⅲ号冷冻稀释液冷冻保存精子,并在60℃,8 s条件下水浴解冻精子后,精子活力和质膜完整率最高分别为42.3%和50.3%,畸形率最低为17.7%。因此,采用程序冷冻仪冷冻法,使用Ⅲ号冷冻稀释液,在60℃,8 s条件下水浴解冻方法较为适合0.5 mL细管金华猪精液冷冻保存及解冻。 相似文献
6.
《中国畜牧杂志》2021,(9)
实验旨在比较解冻后解冻稀释液(Tris-柠檬酸-葡萄糖稀释液)的添加比例(1:0、1:1、1:2)对精液品质的影响,并比较了4种孵育温度(37、34、25、4℃)对精子寿命及精子活力的影响,探索合适的冷冻-解冻后犬精液的孵育条件。结果显示:解冻稀释液的添加与否及添加比例对解冻后孵育30 min的精子活力、活率、质膜完整率及顶体完整率均无显著影响;解冻后,在不同温度下孵育30 min,4组精子活率和质膜完整率无显著差异,而4℃孵育温度下精子活力和顶体完整率高于37℃(P0.05);解冻后孵育2 h,4℃孵育温度下的精液品质(精子活率、精子活力、质膜完整率、顶体完整率)最佳(P0.05),34℃和25℃组之间差异不显著,而37℃组的精液品质最差。结果表明,解冻稀释液对解冻后精液的孵育效果无影响,而解冻后精液的孵育温度以4℃最佳。 相似文献
7.
8.
在BF5稀释液中分别添加不同水平的牛血清白蛋白(BSA)(0.5,1,1.5 g/L)、二甲基乙酰胺(DMA)(0.5%,1%,1.5%)、甲基-β-环糊精载胆固醇(CLC)(1,2.5,5 g/L),对成年健康猪精液进行冷冻保存,于不同温度(37,50,70℃)解冻后分别检测冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性、项体完整率、线粒体活性.结果显示,0.5 g/L BSA组冷冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性均高于其他组,但差异不显著(P0.05).1% DMA组冷冻后精子活率和活力显著优于1.5%DMA组(P＜0.05),同时也高于对照组(3%甘油)冻后精子活率和活力,但差异不显著.不同质量浓度CLC组冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性和线粒体活性与对照组相比差异不显著.50℃和70℃解冻组精子的活率和线粒体活性显著高于37℃解冻组的精子;50℃解冻组精子的活力和质膜完整率显著高于其他2组.因此,在猪精液冷冻稀释液中,用DMA可以代替甘油作为渗透性保护剂,且以1%DMA,50℃解冻最佳. 相似文献
9.
10.
为了探究萨能奶山羊细管冻精最适冷冻程序,本试验设置5个不同的冷冻程序[在5～-10℃温区内,各组降温速率相同（6℃/min）,在-10～-140℃危险温区内设置5个不同梯度的降温速率（25℃/min,35℃/min,40℃/min,55℃/min,65℃/min）]用于程序化冷冻中。试验利用全自动细管精液程控冷冻仪编制冷冻程序,通过casa系统测定精液在不同冷冻程序下精子活力变化,同时利用特异性荧光探针（异硫氰酸镧-花生凝集素,FITC-PNA)检测解冻后精子顶体完整率,用低渗精子肿胀法（HOST)检测解冻后精子质膜完整率。结果表明,冷冻程序C组（5～-10℃,降温速率6℃/min;-10～-140℃,降温速率40℃/min）解冻后精子活力、质膜完整率和顶体完整率最高,分别达到60.75%、38.10%和71.01%,均显著高于其他组（P<0.05）。在危险温区内,降温速率为40℃/min可以较好地保证冷冻萨能奶山羊精子的活力和质膜功能,同时利用程序化冷冻程序C组可显著提高精子的受精能力,C组的降温速率可以提高冷冻萨能奶山羊解冻后精液质量。 相似文献
11.
冷冻家猫附睾精液效果初探 总被引：1，自引：0，他引：1
为了筛选出适宜冷冻家猫精液的稀释液、冷冻保护剂和解冻温度,本试验采用家猫附睾精液,分别用2种不同的稀释液,3种不同的冷冻保护剂进行稀释、冷冻和解冻。结果显示,Ⅱ号稀释液冷冻效果优于Ⅰ号稀释液。用乙二醇作为冷冻保护剂,解冻后家猫精子活率达到52.7%±4.9%,畸形率为37.3%±4.2%,顶体完整率为52.4%±4.1%,各项指标均显著高于甘油组和二甲基亚砜组（P<0.05）;其中甘油组解冻后活率为35.5%±7.6%,顶体完整率为39.8%±4.4%,高于二甲基亚砜组的33.6%±7.3%和39.1%±4.1%,但两者之间差异不显著（P>0.05）。37 ℃水浴解冻后顶体完整率为36.4%±8.7%,显著高于30 ℃水浴解冻后的25.3%±6.7%（P<0.05）,但它们之间的活力,畸形率差异不显著,总体上37 ℃的解冻效果优于30 ℃。因此,乙二醇和稀释液Ⅱ配合使用冷冻家猫附睾精液效果较好,37 ℃为较优解冻温度。 相似文献
12.
实验旨在探讨在猪精液于4℃平衡2 h过程中0.2 g/L咖啡因与精液共孵育2 h、1 h和0.5 h,对颗粒冻精解冻后精子活率、活力、质膜完整性和顶体完整性以及解冻后精子体外存活时间等指标的影响,以期进一步提高猪颗粒冻精质量。实验结果表明,在精液冷冻之前,咖啡因不同平衡时间组的精子活率和活力都呈现出升高趋势,但与对照组差异不显著;咖啡因与精液共孵育2 h、1 h和0.5 h组的精子顶体完整率和质膜完整率显著低于对照组,前3组之间差异均不显著。而颗粒冻精解冻后,咖啡因与精液共孵育2 h、1 h和0.5 h组精子活率和活力均显著高于对照组,其中共孵育1 h组显著高于其他3组(P0.05),共孵育2 h组和0.5 h组间差异不显著(P0.05);共孵育2 h组精子顶体完整率和质膜完整率显著低于对照组和共孵育0.5 h、1 h组(P0.05),但后3组之间差异不显著;共孵育2 h组精子存活时间显著低于对照组、共孵育1 h和0.5 h组(P0.05),其中共孵育1 h组精子存活时间最长,达7 d以上。总之,在精液4℃降温平衡过程中咖啡因与精液共孵育1 h对冷冻后精子质量最有利,解冻后精子活率和活力显著高于其他各组,且解冻后精子体外存活时间最长。 相似文献
13.
为了探究不同冷冻稀释液及抗氧化剂对金华猪精液冷冻效果的影响,试验通过手握法采集健康的20月龄纯种金华猪公猪精液,采用两种常用的商品冷冻稀释液(A、B)稀释精液,然后液氮冻存1 d,解冻后测定精液精子活力、顶体完整率和质膜完整率指标,筛选最适金华猪精液冷冻保存的稀释液;在最适冷冻稀释液中添加20,30,40,50μmol/L表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate, EGCG),以未添加EGCG和上述添加EGCG的冷冻稀释液稀释金华猪精液,然后液氮冷冻保存精液1 d,解冻后测定精液精子活力、顶体完整率、质膜完整率及抗氧化指标[包括活性氧(reactive oxygen species, ROS)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和过氧化氢酶(catalase, CAT)活性],筛选EGCG的最适添加量。结果表明：两种商品冷冻稀释液的精子活力、顶体完整率、质膜完整率差异不显著(P>0.05),但考虑到价格成本,选择B冷冻稀释液作为后续试验的冷冻稀释液。随着EG... 相似文献
14.
本试验研究了0.5 m L细管冷冻保存犬精液过程中液氮熏蒸时间对精子冷冻效果的影响。试验分为5组,将精液细管置于液氮液面上方2 cm处,分别熏蒸0 min(直接投入液氮)、1 min、2 min、4 min、8 min。解冻后通过活率、活力、畸形率及顶体完整率对精子进行评估。结果:液氮蒸汽熏蒸0 min和1 min组精子活率和活力显著低于其它各组(P0.05)。与直接投入液氮相比,在液氮蒸汽中预冷冻超过2 min能够提高精子顶体完整率(P0.05)。本试验表明在使用0.5 m L细管冷冻犬精子时,液氮熏蒸时间在4~8 min较为适宜。 相似文献
15.
维生素E对秦川牛冷冻精液的抗氧化保护作用 总被引：5，自引：0，他引：5
本试验旨在研究维生素E对秦川牛细管冷冻精液品质和精浆中抗氧化酶活性的影响.在稀释液中分别添加0.00、0.02、0.04、0.06、0.08、0.10 mg·mL~(-1)的维生素E,将细管冻精解冻(37.5℃,30 s)后用伟力精子分析系统分析精子活力和精子顶体完整率等标准参数,并用相关试剂盒测定精浆中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)、谷胱甘肽还原酶(GR)和过氧化氢酶(CAT)的活性.结果表明:当维生素E添加量为0.04mg·mL~(-1)时,精子活力与对照组相比差异显著(P<0.05),SOD、GSH、CAT 3种酶活性与对照组相比差异显著(P<0.05).当维生素E的添加量为0.06 mg·mL~(-1)时,冷冻-解冻后精子活力显著高于对照组(P<0.05),顶体完整率极显著高于对照组(P<0.01);GR和CAT酶活性与对照组相比均差异显著(P<0.05).当维生素E的添加量为0.08 mg·mL~(-1)时,精子活力、活率及顶体完整率与对照组相比差异显著(P<0.05),GSH与对照相组比差异极显著(P<0.01),GR及CAT与对照组相比差异显著(P<0.05).在冷冻精液稀释液中添加维生素E可以有效提高冷冻-解冻后秦川牛精液品质及精浆中SOD、CAT、GSH、GR酶的活性,稀释液中维生素E的适宜添加量为0.04～0.08 mg·mL~(-1). 相似文献
16.
17.
18.
利用计算机辅助精子分析系统(CASA)结合顶体完整率(NAR)的检查,研究了长白猪0.5 m L细管冻精4种解冻程序后精液的质量,综合评价不同解冻方法。结果表明:1)精子冷冻-解冻后在曲线速度(VCL)、直线速度(VSL)、平均路径速度(VAP)、直线性(LIN)、前向性(STR)、鞭打频率(BCF)以及A+B类精子比例的检测性状上降低,差异极显著(P0.01);精子头侧摆幅度(ALH)也显著减小(P0.05),活率(Motile rate)变化差异不显著(P0.05);2)四组解冻程序中,38℃20 s解冻组的活率(Motile rate,MR)、VSL、VCL、STR、A+B精子比例指标均极显著(P0.01)优于42℃20 s、50℃15 s、62℃5 s解冻组,VAP、LIN与NAR差异不显著(P0.05);3)Topsis综合评价的结果表明38℃20 s组在孵育2 h、4 h、6 h之后检测性状优于其他解冻组。由此推论,虽然解冻后精子在运动参数发生较大变化,但是38℃20 s的解冻效果优于其他解冻条件。 相似文献
19.
本试验旨在研究白藜芦醇Res和MnCl2对驴精液冷冻质量的改善效果.用假阴道法采集种公驴精液,用添加不同浓度的Res(0、5、10、20、40、100μm)和MnCl2(0、0.1、0.5、2、5、10μm)的冷冻稀释液稀释后进行0.25 mL细管分装,以不添加抗氧化剂组为对照组,在4℃平衡110 min后,将细管于液氮蒸气中熏蒸降温,最终在液氮中保存.37℃水浴解冻后测定精子活力、顶体完整性、膜完整性、ROS、细胞内抗氧化酶含量等指标.结果表明:当Res浓度为40μm时冷冻效果最佳,其活力、质膜完整率、顶体完整率显著高于对照组(p<0.05),ROS含量显著低于对照组(p<0.05),抗氧化酶活性(SOD、CAT、GSH-Px)显著高于对照组(p<0.05).当MnCl2浓度为5μm时冷冻效果最佳,其活力、质膜完整率、顶体完整率显著高于对照组(p<0.05),SOD和CAT的酶活性显著高于对照组(p<0.05). 相似文献
20.
常永梅 《青海畜牧兽医杂志》2008,38(6)
对陶赛特肉羊的精液经过细管分装冷冻后,用不同的水浴温度进行解冻,通过精子活力和存活时间的比较,寻找出最佳的解冻温度为40~44℃(8 s)水浴解冻。 相似文献