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1.
固氨粪产碱菌野生型Ａ１５０１菌株及其胞外多糖（ＥＰＳ）突变株Ｅｘｏ＋＋（Ａ１５３２）和ＥｘＯ－（Ａ１５３１）,以及ｎｉｆＡ和ｎｔｒＣ－ｎｉｆＡ转化子（Ａ１５１３和Ａ１５２３）的ＥＰＳ,由高分子量（２５０ｋＤ左右）组分（ＥＰＳＨ）和低分子量小于４０ｋＤ组分（ＥＰＳＬ）组成。两个组分中均含有葡萄糖、半乳糖、果糖和戊糖,其主要成分葡萄糖和半乳糖的分子摩尔比：Ａ１５０１－ＥＰＳＨ为２：１、ＥＰＳＬ为３：１;Ａ１５３１－ＥＰＳＨ为２：１、ＥＰＳＬ为１：１;Ａ１５３２－ＥＰＳＨ为８：１、ＥＰＳＬ为５：１;Ａ１５１３－ＥＰＳＨ和ＥＰＳＬ均为４：１;Ａ１５２３－ＥＰＳＨ为４：１、ＥＰＳＬ为８：１。高分子量ＥＰＳ中还含有多肤,其氨基酸组分在各突变株和转化子之间差异明显,而ＥＰＳＬ中仅含有痕量多肽。 相似文献
2.
本研究分离并提纯苏云金芽胞杆菌８０１０菌株的质粒ＤＮＡ，经ＢａｍＨＩ／ＰｓｔＩ双酶解后与ＤＩＧ标记的ｃｒｙＩ基因ＥｃｏＲＩ－Ｆ片段的ＲＮＡ探针杂交，显示出分子量分别为６．５６ｋｂ和４．４ｋｂ的阳性片段。用Ｂｌａｓｓｍｉｌｋ回收４．４ｋｂ的阳性片段并与双功能载体ｐＲＩＴ５重组，转化感受态大肠杆菌ＴＧ１细胞，通过斑点杂交和快检获得含４．４ｋｂ片段的克隆株Ｔ２，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳表明它表达了１３０ｋＤ 相似文献
3.
为了探讨生长因子（ＥＧＦ，ＰＤＧＦ）对牛卵母细胞体外成熟与早期胚胎体外发育的影响，本研究进行了两个实验。实验１：在卵母细胞体外成熟（ＩＶＭ）中，将卵母细胞平均随机的放入表皮生长因子浓度为０，２．５，２５，５０μｇ／Ｌ的成熟培养液和对照组中。实验２：在早期胚胎体外培养（ＩＶＣ）过程中，将受精卵平均随机分配入５个不同培养液的处理组：（１）ＴＣＭ－１９９＋１０％阉公牛血清（ＳＳ）；（２）ＴＣＭ－１９９＋ＥＧＦ＋ＰＤＧＦ；（３）ＴＣＭ－１９９＋ＥＧＦ；（４）ＴＣＭ－１９９＋ＰＤＧＦ；（５）ＴＣＭ－１９９＋无生长因子、其中ＥＧＦ：５０μｇ／Ｌ，ＰＤＧＦ：０．１μｇ／Ｌ。２，３，４，５组有０．１％ＰＶＡ和０．３％ＢＳＡ，并与颗粒细胞单层协同培养。卵母细胞的体外成熟（ＩＶＭ）、体外受精（ＩＶＦ）和早期胚胎体外培养（ＩＶＣ）的方法与Ｌｕ等（１９８７）报道的相同。结果表明：浓度为５０μｇ／Ｌ的处理组分裂率与对照组无差异（８９．０％，９２．４％，Ｐ＞０．０５），而浓度为０，２．５，２５μｇ／Ｌ的处理组分裂率均显著低于对照组（７８．６％，８２．３％，８４．３％，Ｐ＜０．０５），在囊胚率和第７ｄ一级胚胎率上各组均无差异。ＥＧＦ在体 相似文献
4.
GnRH－A诱导泰和鸡母鸡排卵的生殖内分泌机制 总被引：2，自引：0，他引：2
本试验研究了促性腺激素释放激素类似物───［Ｄ－Ｌｅｕ￣６，Ｐｒｏ￣９］－ＧｎＲＨＮ－乙酰胺（ＧｎＲＨ－Ａ）诱导泰和鸡母鸡排卵的生理效应，藉此探讨其生殖内分泌机制。结果表明：（１）ＧｎＲＨ－Ａ具有显著刺激母鸡生殖器官发育的效应，导致母鸡卵巢、输卵管以及肝重增加（Ｐ＜０．０１），但对鸡体重没有显著的影响（Ｐ＜０．０５）；产蛋停止前１周施用ＧｎＲＨ－Ａ可维持母鸡正常产蛋的生殖生理状态。（２）ＧｎＲＨ－Ａ给药后最初２０ｄ诱发出两个鸡血浆促黄体生成素（ＬＨ）释放峰，处理组（ＧｎＲＨ－Ａ组）血浆ＬＨ浓度在此期间显著高于对照组（Ｐ＜０．０１）；然而与对照组相比较，处理组鸡血浆促卵泡素（ＦＳＨ）却没有明显变化（Ｐ＜０．０５）。（３）鸡血浆孕酮（Ｐ４）浓庆在施用ＧｎＲＨ－Ａ后明显上升，显著高于尚处休产期的对照组（Ｐ＜０．０１）。与此相反，给药后的囊初８ｄ内，鸡血浆雌二醇（Ｅ２）浓度明显降低，虽然随后略有回升，但仍低于对照组（Ｐ＜０．０１）。据此可以认为，ＧｎＲＨ－Ａ诱导卵巢和输卵管发育与鸡血浆ＬＨ、Ｐ４以及Ｅ２浓度变化密切相关，ＧｎＲＨ－Ａ是一种有效的制剂，可应用于诱导卵巢和输卵管发育及换羽前产蛋力的改善 相似文献
5.
取广西牛源大片吸虫成虫制备出分泌排泄（ＥＳ）抗原，用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳，考马斯亮蓝染色显出７条蛋白带。免疫印迹试验（ＥＩＴＢ）测出其主要特异性免疫成分分子量为３６．３，２８．５及２５．５ｋＤａ，其中２８．５与２５．５ｋＤａ与法国肝片吸虫ＥＳ的部分抗原成分相同。两种片形吸虫与抗血清可以交叉使用无特异性，但与日本血吸虫抗原及抗血清均无交叉反应，人工感染大片吸虫２周后的兔血清即能识别此抗原。ＥＳ抗原提取方法简便，特异性好，敏感性高，可用于片形吸虫病免疫诊断。 相似文献
6.
蜡质芽孢杆菌超氧化物歧化酶(SOD)的纯化研究 总被引：9，自引：0，他引：9
蜡质芽孢杆菌经培养后,离心收集菌体,将菌体破碎,离心,经（ＮＨ４）２ＳＯ４分级沉淀,Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－７５凝胶过滤和ＤＥＡＥ－５２柱层析所获得的超氧化物歧化酶进行了ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳为一条带,亚基分子量为１７７８３Ｄ,表明制备得到了电泳纯品。将该样品经氰化钾,双氧水,氯仿－乙醇抑制实验和特征吸收光谱分析,鉴定出此酶为Ｆｅ－ＳＯＤ,比活为：１７５３．８ｕ。 相似文献
7.
苜蓿细胞悬浮培养与耐受高浓度PEG变异体的筛选 总被引：10，自引：0，他引：10
本文对紫花苜蓿的细胞悬浮培养、悬浮细胞系的建立、离体辐射效应和高浓度ＰＥＧ耐受性变异体的筛透进行了研究。结果表明：１．高浓度的２，４．Ｄ（５～１０ｍｇ／Ｌ），低浓度的ＡＢＡ（０．１～２ｍｇ／Ｌ），高浓度的蔗糖（６％～９％），较高的离子强度，以及逐步缩短继代时间，均有利于胚性悬浮细胞系的快速建立。相反，细胞分裂素，高浓度的ＮＨ和ＧＡａ的存在，不利于悬浮系的建立。细胞分裂素（４ＰＵ３０，ＫＴ或ＢＡ）可促进细胞的团聚，不利于细胞的分散。此外，低浓度的２，４－Ｄ，４ＰＵ３０（或ＢＡ，ＫＴ）和ＡＢＡ的配合使用，在悬浮培养基中可形成大量的体细胞胚。２．辐射处理悬浮细胞的最适剂量为２０～６０Ｇｙ。３．未经改造的初期悬浮培养物远较悬浮细胞系对高水势敏感。４．胚性悬浮细胞系经２０Ｇｙ的γ射线处理，筛选出了对１５％ＰＥＧ水势（约－１１巴）耐受性的克隆６个，并获得了一批再生植株，从２０％ＰＥＧ（约－１５巴）筛选出１个抗性克隆。抗性细胞系对高浓度ＰＥＧ和ＮａＣｌ产生的水势在细胞水平表现出很强的抗性。 相似文献
8.
斑点免疫金银染色技术检测鸡传染性法氏囊病毒的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
本研究成功建立了检测鸡传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）抗原的斑点—免疫金银染色技术（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ），并确定了操作流程的最佳试验条件。应用该法对纯化ＩＢＤＶ抗原的最低检出量为０．１９５３ｎｇ／点，其敏感性为Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的８倍。特异性阻断试验和交叉反应试验证明Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ具有较高的特异性。Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ对５４份自然感染法氏囊样品检测的阳性率为９６．３％和９２．５％（χ２＝３．１１７９，Ｐ＞０．０５），统计学分析两者无显著差异。研究表明本法具有敏感、特异性强、经济、安全等优点，可用于ＩＢＤＶ感染的特异诊断。本研究为免疫金技术应用于畜禽传染病的诊断和研究打下了基础 相似文献
9.
中国小麦品种醇溶蛋白Gli—1和Gli—2编码位点等位基因 … 总被引：5，自引：0，他引：5
利用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳（Ａ－ＰＡＧＥ）方法,鉴定分析了我国部分重要小麦品种或种质醇溶蛋白Ｇｌｉ－１和Ｇｌｉ－２编码位点等位基因组成特点。３６个品种的研究结果表明,我国小麦品种在醇溶蛋白几个主要位点上均存在较大的变异度,Ｎｅｉ氏遗传变异系数（Ｈ）达０．７７５。６个位点一共检测到５９个不同的醇溶蛋白等位基因,其中出现频率较高的有８个等位基因,即Ｇｌｉ－Ｂ２ｇ（５５．５６％）、Ｇｌｉ－Ｄ１ｋ（５０％ 相似文献
10.
MBP-狂犬病毒NP融合蛋白在大肠杆菌中的表达及NP的纯化 总被引：2，自引：0，他引：2
将狂犬病毒核蛋白结构基因重组到原核表达质粒ｐＭＡＬ－Ｃ２Ｘ中,经ＩＰＴＧ诱导表达出的ＭＢＰ－ＮＰ融合蛋白分子量约９８ｋＤ;用支链淀粉琼脂糖凝胶亲和层析纯化得到电泳均一的融合蛋白,融合蛋白用因子Ｘａ裂解后,经Ｑ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ离子交换层析可将ＭＢＰ与ＮＰ分开,得到了电泳均一、分子量约５６ｋＤ的ＮＰ蛋白,经Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ分析证实抗原性正确,为进一步利用ＮＰ蛋白制备抗体或单克隆抗体打下了基 相似文献
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斜纹夜蛾核多角体病毒基因组DNA XbaI 2.0 kb片段全序列分析 总被引：2，自引：0，他引：2
报道了斜纹夜蛾核多角体病毒（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｌｉｔｕｒａ ｎｕｃｌｅｏｐｏｌｙｈｅｄｒｏｖｉｒｕｓ,ＳｐｌｔＮＰＶ）基因组ＤＮＡ ＸｂａＩ２．０ｋｂ片段的核苷酸全序列,该片段包括三个完整的读码框（ｏｐｅｎ ｒｅａｄｉｎｇ ｆｒａｍｅ,ＯＲＦ）,即ＯＲＦ１、ＯＲＦ２、ＯＲＦ３及一个不完整的读码框内氨基酸有１８％相同;ＯＲＦ２长５７０个核苷酸,可编码１８９个氨基酸的蛋白质,分子量为２１．６４ｋＤ 相似文献
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将经过２０～２４ｈ体外成熟培养后的牛卵母细胞在含５％ＣＯ２，９５％空气，最大相对饱和湿度和温度分别为３７℃（Ｇ１），３８℃（Ｇ２）和３９℃（Ｇ３）的培养条件下进行体外受精，以观察受精温度对牛体外受精及其随后胚胎发育的影响。结果显示，不同受精温度对牛卵母细胞体外精子入卵率（９３．６％～１００％）及受精卵裂率（７８．５％～８０．３％）无明显影响；而早期胚胎卵裂发育速度、体外囊胚发育速度及体外囊胚发育率和孵化率均随着受精温度的升高呈上升趋势。在ＩＶＦ４２～４６ｈ，Ｇ３发育到５细胞以上卵裂周期阶段的早期胚胎比率（４０．３％）非常显著地高于Ｇ２（２４．３％）和Ｇ１（１８．８％，Ｐ＜０．００１）；而相应处于２细胞阶段的胚胎比率（Ｇ３为１４．６％）则十分显著地低于Ｇ２（２５．２％）和Ｇ１（３０．１％，Ｐ＜０．０１）。Ｇ３的囊胚体外孵化率（７５．８％）也非常明显地高于Ｇ２（５１．９％）和Ｇ１（４７．９％，Ｐ＜０．００）。结果表明，受精温度（３７～３９℃）主要影响早期胚胎的质量，从而影响到其随后的囊胚发育率、发育速度及其孵化率，而对卵母细胞的受精、卵裂率无明显影响。 相似文献
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本文研究了苄嘧黄隆和甲黄隆的气相色谱分析方法。采用（１）５％ＯＶ－１０１／Ｃｈｒｏ－ｍｏｓｏｒｂＧＡＷＤＭＣＳ（０．２５～０．１８ｍｍ）；（２）５％新戊二醇己二酸聚酯／ＣｈｒｏｍｏｓｏｒｂＧＡＷＤＭ－ＣＳ（０．２５～０．１８ｍｍ）的两条色谱柱，邻苯二甲酸二戊酯为内标，氢火焰离子化检测器，标准偏差（ＳＤ）≤０．０６４％，变异系数（ＣＶ）≤２．１％，平均回收率为９６．７％～９８．８％。 相似文献
15.
应用样品一个稀释度间接ＥＬＩＳＡ法对产蛋母鸡及其小鸡进行传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）抗体效价测定，同时用病毒中和试验（ＶＮ）作比较检测。结果表明，该ＥＬＩＳＡ法比ＶＮ法敏感、精确、简便，所有样品只测定一个稀释度的Ｐ／Ｎ值，再根据线性回归方程（ｒ１=０．８８９８，Ｐ≤０．０５）计算抗体效价，达到省时省力、节约材料、减少试验误差和一次可进行大批样品检测的目的。２种方法相关性较高（ｒ３=０．８４９２，Ｐ＜０．０１），小鸡母源抗体衰减与日龄呈线性关系（ｒ２=－０．８７５８，Ｐ＜０．０１），ＩＢＤＶ母源抗体半衰期为６．３ｄ。 相似文献
16.
通过两个试验对体外培养成熟的牛卵母细胞进行玻璃化冷冻。试验１用１０％丙二醇（ＰＧ）加上不同浓度（０％～２０％）的乙二醇（ＥＧ）作为细胞内玻璃化溶液（ＶＳ１），２５％ＰＧ＋２５％ＥＧ作为细胞外玻璃化溶液（ＶＳ２）对卵母细胞进行冷冻。结果卵母细胞的体外受精分裂率（０．９％～２３．４％）均显著低于对照组（７５．０％）。在处理组中，以１０％ＰＧ＋５％ＥＧ和１０％ＰＧ＋１０％ＥＧ作为ＶＳ１的效果较好，分裂率分别为２３．４％和２２．２％，均显著高于其他处理组。试验２以１０％ＰＧ＋５％ＥＧ作为ＶＳ１，２５％ＰＧ＋２５％ＥＧ作为ＶＳ２进行冷冻。解冻后在０．５ｍｏｌ／Ｌ或０．２５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖溶液中１～２步或在含防冻剂的溶液中经２～３步稀释防冻剂。卵母细胞经体外受精后，分裂率在１８．２％～３０．６％之间。在０．２５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖溶液中一步脱防冻剂的卵母细胞经体外受精、体外培养后，２５个早期胚胎中有３个发育成囊胚，其它组均未发现囊胚。这些结果表明玻璃化过程对卵母细胞造成了损伤。引起损伤的原因可能是玻璃化溶液的化学毒性作用及脱防冻剂过程中卵母细胞受到的渗透压损伤。 相似文献
17.
低剂量γ射线辐照对鸡胚胎发育的刺激效应 总被引：3，自引：0，他引：3
用０．５，１．０，Ｇｙ＾６０Ｃｏγ射线孵前辐照滨白蛋鸡和ＡＡ肉鸡商品代种蛋，孵化试验表明，低剂量γ射线照射对鸡胚胎发育有明显的刺激效应，使一些在孵化中不能发育的受精卵得到正常发育，滨白蛋鸡辐照组种蛋胚胎发育的卵数比对照组高５．４６％～６．７２％（Ｐ〈０．０１），孵化率比对照组高４．４％（Ｐ〈０．０１）。ＡＡ肉鸡种蛋辐射组胚胎发育的卵数比对照高５．４６％～５．５４％（Ｐ〈０．０１），孵化率０．５Ｇｙ 相似文献
18.
小麦醇溶蛋白基因的HPCE和A—PAGE染色体定位及其比较分析 总被引：7，自引：0，他引：7
利用高效毛细管电泳（ＨＰＣＥ）技术分离中国春醇溶蛋白获得了４５个不同组分（峰或峰肩），通过过中国春第１，４，６，７部分同源群染色体ＮＴ系和ＤＴ系的ＨＰＣＥ分析，确定了各个醇溶蛋白组分的编码基因所在染色本臂，结果显示，全部蛋白组分均由第１，部６部分同源染色体短臂上的基因编码（即Ｇｌｉ－１和Ｇｌｉ－２位点），其中Ｇｌｉ－Ａｌ，Ｇｌｉ－Ｂ１和Ｇｌｉ－Ｄ１分别编码５，１０和１２个组分Ｇｌｉ－Ａ２，Ｇｌｉ－ 相似文献
19.
指导的基因在动物乳腺特异性表达载体的构建 总被引：1，自引：0，他引：1
为了实现外源蛋白质在动物乳腺中特异性表达,采用ＰＣＲ法扩增了ＢＬＧ ３’端含第６,７外显子及ｐｏｌｙ（Ａ）加尾信号下游约２００ｂｐ的０．８７ｋｂ片断。以山羊ＢＬＧ ５’的３．２ｋｂ（含第１,２外显子）启动子,山羊ＢＬＧ ３’０．８７ｋｂ序列,鸡α－珠蛋白基因簇π基因上游的－２．４￣－５．３ｋｂ ＨｉｎｄⅢ序列,绿色荧光蛋白ＧＦＰ及原核载体ｐＧＥＭ－７ｚｆ构建了ｐＧＥＭ－７ｚｆ－ＧＦＰ－ＭＡＲ－５’ 相似文献
20.
水分胁迫下，３个测试的玉米杂交种（玉单３５８，南校８号，桂三２号）幼苗叶片束缚水含量（ＢＷＣ）有所提高，以玉单３５８的ＢＷＣ升幅最高。自由水含量（ＦＷＣ），总含水量ｔＴＷＣ）和叶片相对含水量（ＲＷＣ）均有所下降．下降水平为南校８号＞桂三２号＞玉单３５８。叶片可溶性糖和游离脯氨酸含量增长水平为玉单３５８＞桂三２号＞南校８号．膜脂过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）增加幅度和质膜相对透性大小为南校８号＞桂三２号＞玉单３５８．超氧物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化物酶（ＰＯＤ）和过氧化氢酶（ＣＡＴ）等保护酶活性则为：玉单３５８＞桂三２号＞南校８号。上述结果表明，花粉植株杂交种玉单３５８的抗水分胁迫能力比桂三２号和南校８号强． 相似文献