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为探索可靠、灵敏的转基因动物及其产品检测技术,从核酸检测和蛋白检测两个方面,综述了转基因动物及其产品不同检测技术的原理、特点及应用,提出了每种检测技术的不足及今后转基因检测技术的发展趋势和研究方向。目前,已经研发的核酸检测技术主要包括多种PCR方法、环介导等温扩增技术、Southern blot技术和染色体原位杂交技术等,蛋白检测方法主要包括酶联免疫吸附检测技术、免疫层析试纸条、Western blot技术、免疫组织化学和免疫荧光技术等。三代测序技术是近年来提出的一种新型基因检测技术,适用于对未知序列转基因动物的分析。随着转基因技术的发展,转基因动物及其产品越来越多,高通量、高灵敏度和低成本的检测技术将成为未来转基因动物及其产品检测的研究重点。 相似文献
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转基因小鼠的多重PCR快速检测技术 总被引：3，自引：0，他引：3
转基因检测技术的标准化可以为转基因法规的制定和转基因产品的标识提供技术支持.采用碱裂解法快速提取鼠尾基因组DNA,用PCR方法检测其中的外源基因结构如cytomegalovirus(CMV)启动子、hGH polyA终止子及目的基因跨膜蛋白66(Transmembrane protein 66,Tmem66),筛选到阳性样品.优化了多重PCR引物退火温度及缓冲液浓度,并探讨了扩增速率对多重PCR的影响.结果表明,此多重PCR方法可得到很好的扩增效果,可用于转基因小鼠外源基因的检测,同时为哺乳动物检测标准的建立提供参考. 相似文献
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经过几十年的发展,转基因作物已逐步从实验室研究阶段走向大面积的生产应用,转基因作物及其产品的安全性则一直是人们争论的焦点。转基因技术的发展与应用与养蜂业密切相关。虽然转基因蜜蜂的生产应用为时尚早,但转基因作物的大量种植,给蜜蜂的安全带来了隐患,也使得蜂产品中可能掺入转基因成分。及时评估转基因植物对蜜蜂的影响不仅有助于保护养蜂业,也有助于减轻甚至避免由转基因植物带来的生态风险。欧盟和日本对转基因作物及其产品的谨慎态度,使得转基因食品的安全性成为一个新的贸易壁垒。我国养蜂业应尽早应对,研究完善涉及转基因植物的蜂产品生产制度及建立相应的检测标准。 相似文献
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随着我国食品科学技术发展及对外贸易需要,食品检测和分析工作已提高到极其重要地位。特别是转基因食品技术迅猛发展,转基因食品安全性问题逐渐被人们所重视,转基因食品是否安全、转基因食品标识制度能否被严格执行,关键在于是否有准确、可靠检测技术作保障。 相似文献
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1前言2002年9月5日,国务院办公厅转发《农业部关于促进饲料业持续健康发展若干意见的通知》,通知中要求:“在逐步提升现有的饲料原料和产品质量标准的基础上,加紧修订完善饲料卫生安全强制性标准,尽快制定转基因和动物性饲料检测方法标准。”饲料安全关系到食品安全,而食品安全关系到人类的身体健康。由于转基因饲料大量为动物所食用,对其安全性进行全面评价迫在眉睫。我国对转基因问题一直持谨慎态度,已于2001年颁布了相应法规,这些法规一般都是针对转基因作物以及直接以转基因作物作为原料而生产的非动物性食品;但是,对于转基因作物作为饲… 相似文献
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《中国兽医学报》2017,(8):1605-1612
外源基因拷贝数是转基因动物检测中的重要内容。本实验室使用PiggyBac(PB)转座子系统获得Tβ4-GFP、FGF5s-GFP、VEGF164-GFP 3种转基因类型陕北白绒山羊,为研究其外源基因整合情况,利用荧光定量PCR方法对其外源基因copGFP的整合拷贝数进行检测。以Gluc为内参基因,建立外源基因和内参基因的标准曲线方程,对转基因陕北白绒山羊DNA进行荧光定量PCR,将copGFP/Gluc的比率作为外源基因的拷贝数。同时,选取Tβ4-GFP转基因绒山羊对其整合位点进行检测,以验证拷贝数结果。结果显示:copGFP与Gluc的标准曲线方程分别为,y=-3.230 6x+39.216(R~2=0.998 8)、y=-3.564 8x+38.440(R~2=0.996 0);成功得到9只转基因绒山羊的整合拷贝数;Tβ4-GFP转基因绒山羊整合位点数目和拷贝数检测结果一致。结果表明,利用荧光定量PCR检测转基因绒山羊外源基因整合拷贝数,操作简单、灵敏方便,是一种切实可行的检测方法。 相似文献
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转基因阳性个体的鉴定工作是转基因动物生产过程中一个重要的环节。在本中,结合本实验室检测转基因鸡阳性个体的研究情况,主要叙述了几种目前用的鉴定转基因阳性个体的方法。并在最后简要介绍了一种新的鉴定技术——定量PCR。 相似文献
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4月4日，江苏检验检疫局动植物与食品检测中心转基因实验室收到国际权威的转基因检测机构——德国基因时代公司的授权证书，成为其在中国惟一指定实验室，这标志着江苏省乃至中国转基因检测技术已经达到国际先进水平。 相似文献
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本研究旨在建立转基因奶牛多重PCR快速检测方法,为转基因动物及产品出入境检测技术平台的建立提供技术支持,并为转基因动物及产品检测技术标准的制定提供参考。根据牛物种特异性基因(mtDNA)设计奶牛内源基因引物,根据外源基因人乳铁蛋白基因(human lactoferrin,hLF)和新霉素磷酸转移酶基因(NPT Ⅱ)设计特异性引物,优化反应条件,建立转基因奶牛多重PCR检测方法。本方法敏感、快速、特异,一个反应可以检测多个基因片段,可有效用于转基因奶牛外源基因的检测。 相似文献
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《中国兽医学报》2016,(1)
以GFP转基因猪为研究对象,以转铁蛋白受体基因为内参基因,通过SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR建立针对外源基因GFP和内参基因的双标准曲线和方程。对转基因猪基因组DNA中外源基因和内参基因的拷贝数同时定量检测,外源基因与内参基因起始模板拷贝数的比值即为外源基因在转基因猪中的整合拷贝数。同时,利用Southern-blot进行验证分析。结果显示:实时荧光定量PCR法检测2头转基因阳性猪外源基因拷贝数分别为3和2,2头转基因阴性猪外源基因拷贝数均为0,结果同Southern-blot检测一致。结果表明:实时荧光定量PCR法高通量、灵敏、方便,可以更好的用于转基因猪外源基因整合拷贝数的检测。 相似文献