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1.
将香榧(Torreya grandis‘Merrillii’)的未成熟合子胚置于SH+0.1 mg·L-1 NAA+500 mg·L-1AC+3%蔗糖+0.5 g·L-1 Gln培养基上暗培养45 d,诱导产生半透明颗粒状胚性愈伤组织;将胚性愈伤组织转入SH+20 g·L-1 PEG+10 mg·L-1 ABA培养基中暗培养3个月诱导体细胞胚。采用碘—碘化钾染色和石蜡切片技术对体胚起源、形态发育与细胞组织学进行了观察。结果表明:胚性愈伤组织起源于合子胚胚轴表皮或皮层细胞的对称分裂。胚性愈伤组织含有两类细胞,一种是细胞质浓厚、细胞核大、体积小的圆形胚性细胞,另一种是高度液泡化拉长的细胞。胚性愈伤组织包含由这两种细胞构成的原胚团Ⅰ、原胚团Ⅱ和原胚团Ⅲ,以及一些游离细胞。原胚团Ⅲ在无植物生长调节剂的SH基本培养基上形成原胚,原胚接入成熟培养基,历经球形、棒状、心形、鱼雷形胚后发育成子叶胚。将子叶胚转入萌发培养基后胚根伸长,胚芽发育长出针叶,形成完整的再生植株。同时在离体培养中合子胚胚柄处退化的裂生多胚也能重新发育形成胚体。在初生体胚发育过程中表面常伴有次生体细胞胚的形成。 相似文献
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大蒜未受精子房离体诱导单倍体的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
以苍山大蒜品种‘糙蒜’为试材,通过花茎离体培养获得发育健壮的花器官。以其未受精子房为外植体进行离体培养,研究不同培养基（MS、B5、N6）及外源植物生长调节剂对单倍体诱导的影响,以建立大蒜单倍体诱导体系。结果表明,诱导未受精子房产生愈伤组织的适宜培养基为B5 + 2 mg · L-1 6-BA + 1 mg · L-1 NAA,愈伤组织及雌核发育胚总诱导率可达12.24%;诱导愈伤组织分化不定芽的适宜培养基为B5 + 3 mg · L-1 6-BA + 1 mg · L-1 NAA,不定芽分化频率可达46.15%;将不定芽转移至B5 + 0.05 mg · L-1 NAA培养基中可诱导生根,发育成完整植株。以再生植株叶片为材料,采用流式细胞仪进行倍性鉴定,所得18株再生植株中有16株为单倍体植株。 相似文献
3.
白姜花胚性愈伤组织的诱导与植株再生体系的建立 总被引：1，自引：0，他引：1
将白姜花（Hedychium coronarium）未成熟花丝接种在MS + 4 mg ? L-1 2,4-D + 4 mg ? L-1 NAA + 1 mg ? L-1 6-BA的培养基上,经过180 d的培养,诱导出3种愈伤组织：Ⅰ,浅黄色松散易碎;Ⅱ,白色疏松半透明水渍状;Ⅲ,黄色致密颗粒状。对愈伤组织继代培养基中的2,4-D、NAA和6-BA浓度进行优化,结果表明培养基中含有1 mg ? L-1 2,4-D、0.25 mg ? L-1 NAA、0.25 mg ? L-1 6-BA时可获得胚性状态良好的愈伤组织。胚性愈伤组织在MS无机盐 + 0.25 mg ? L-1 NAA + 0.5 mg ? L-1 TDZ + 维生素B5 + 100 mg ? L-1谷氨酰胺 + 230 mg ? L-1脯氨酸 + 100 mg ? L-1麦芽提取物 + 45 g ? L-1蔗糖的体胚诱导培养基中培养20 d后,转移到MS基本培养基上培养30 d,1 g胚性愈伤组织可获得50 ~ 60个体胚。成熟体胚在MS + 0.2 mg ? L-1 IAA + 0. 5 mg ? L-1 6-BA的萌发培养基上培养20 d时,体胚萌发率为85%。萌发的体胚转移到1/2 MS + 1 g ? L-1活性炭的成苗培养基中可发育成正常植株,植株室外栽培成活率达90%。对100株再生植株的染色体数进行分析,发现3株三倍体（2n = 3x = 51）、6株四倍体（2n = 4x = 68）和2株六倍体（2n = 6x = 102）。 相似文献
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影响油桃叶片产生胚性愈伤组织的因素 总被引：3，自引：2，他引：3
以早熟油桃华光和曙光为试材,对影响早熟油桃叶片产生胚性愈伤的基本培养基、外源激素、碳源、环境(光照强度,温度,暗培养时间)等因素进行研究,结果表明:碳源对两种油桃叶片胚性愈伤的诱导影响不显著,其他影响因子对油桃叶片胚性愈伤的诱导均显著。其中华光和曙光在暗培养21d时,产生的有效愈伤较其他处理有极显著差异,有利于有效愈伤的产生;外源激素对诱导桃叶片产生胚性愈伤组织影响显著,NAA不是影响胚性愈伤产生的主效因子;基本培养基中,QL,1/2MS培养基有利于华光胚性愈伤的发育,QL,LP培养基有利于曙光胚性愈伤的发育;当温度在24￣27.5℃时,光照强度为2000lx,有利于胚性愈伤组织的诱导及生长;接种方式上,叶背横切,叶面贴于培养基表面的接种方法易产生胚性愈伤。实验中发现:叶背横切,叶面接于G+2.5mg/LBA+0.5mg/LIBA培养基上,暗培养21d,转入1/2MS+2.0mg/lTDZ+2.0mg/LBA+0.5mg/LNAA的培养基中,温度控制在24￣27.5℃,光照强度为2000lx时,愈伤组织发育良好,获得高频胚性愈伤,进一步分化产生8%的不定芽。 相似文献
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长寿花胚性愈伤组织的诱导及胚状体再生 总被引：10，自引：0，他引：10
研究了长寿花胚性愈伤组织的筛选，胚状体的诱导发生、发育过程及植株再生。经过对外观及细胞学观察，看出外观质地疏松、颗粒状的淡黄色愈伤组织细胞圆形且形状规则，是胚性愈伤组织。诱导胚性愈伤组织的最适培养基为：MS+2，4-D 2 mg·L-1 +BA 0.2 mg·L-1；胚状体的诱导培养基为MS+BA 2 mg·L-1 +NAA 0.2 mg·L-1 +活性炭4 g·L-1+蔗糖30 g·L-1，胚状体诱导率可达185个胚状体；胚状体的再生培养基为MS+蔗糖30 g·L-1。利用石蜡切片对胚状体的发生过程进行了观察。 相似文献
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洋葱高频离体再生体系的建立 总被引：2，自引：0，他引：2
以洋葱（Allium cepa L.）品种‘W465’的幼嫩花序和不同发育时期的幼蕾为外植体材料,研究激素配比对其愈伤组织诱导、再生和生根驯化的影响,以建立洋葱高频离体再生体系。研究结果表明,洋葱幼嫩花序为最佳外植体材料,在含有1.0 mg · L-1 2,4-D + 1.0 mg · L-1 6-BA 的B5 培养基上愈伤诱导率为100%,在添加1.0 mg · L-1 TDZ 的B5 培养基上再生芽分化率为78.13%,在1/2 MS + 0.01 mg · L-1 NAA 培养基上可诱导生根,驯化移栽成活率达到95%。 相似文献
7.
以建立月季高频再生体系为目标,以‘月月红’月季叶片为外植体,探索了生长调节剂和光照条件对其体细胞胚胎发生及其植株再生的影响。结果表明：3.0 mg · L-12,4-D + 0.5mg · L-1 TDZ的胚分化培养基上暗培养12周后转入胚成熟培养基,置于红光（光强约为7.2 µmol · m-2 · s-1）条件下培养,能产生较多具肥厚子叶且有高频再生潜力的体细胞胚。暗培养条件下主要产生无子叶的芽状胚。 胚性愈伤组织在含 相似文献
8.
以‘凤丹’牡丹的幼胚为材料,从取样时期、切割接种方式、基本培养基和植物生长调节剂选择等方面进行再生体系优化。结果表明:授粉后60 d为‘凤丹’牡丹幼胚诱导愈伤的最佳取材时期;完全破碎切割成幼胚薄片比完整胚、1/2胚和1/4胚更容易获得高质量的愈伤组织,且褐化率较低;MS基本培养基添加0.162μmol·L-1 H2O2可提高幼胚愈伤组织诱导率,但会增加褐化率,而在WPM基本培养基中添加不同浓度的H2O2,对愈伤诱导率和褐化率的影响不大;WPM基本培养基比MS更适于‘凤丹’牡丹幼胚再生;WPM+2.5 mg·L-1 2,4-D+0.1 mg·L-1 6-BA是诱导愈伤的最佳植物生长调节剂组合,诱导率可达93.33%;不定芽和不定根诱导的最佳组合分别为WPM+30 g·L-1蔗糖+3 g·L-1植物凝胶+0.5 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 相似文献
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朱顶红体细胞胚胎发生及植株再生研究 总被引：1，自引：0，他引：1
通过诱导朱顶红（Hippeastrum hybridum）小鳞茎形成胚性愈伤组织,建立间接的体细胞胚胎发生途径和植株再生的无性繁殖体系。试验结果表明,0.5 mg · L-1的2,4-D附加0.5 mg · L-1 6-BA对试管小鳞茎外植体初代胚性愈伤组织的诱导和继代增殖有明显的促进作用,初培养松脆愈伤组织诱导率可达83.3%。2.5 ~ 5.0 mg · L-1 的6-BA对体细胞胚胎的发育有显著的促进作用,培养50 d大于20个体细胞胚发生的愈伤组织约为50%;相同浓度6-BA附加不同浓度NAA的试验组间体细胞胚发育无明显差异。 相似文献
10.
以花烛(Anthurium andraeanum Lind. ) 盆花品种无菌苗叶片、叶柄、根段为外植体, 对花烛体细胞胚胎发生及植株再生进行了研究, 建立了花烛体细胞胚胎发生体系。结果表明, 花烛叶片较其他外植体更适宜体细胞胚的诱导; 胚性愈伤组织及胚性结构诱导最适培养基为改良MS + 2, 4-D 2.0～3.0 mg·L - 1 + KT 0.5 mg·L - 1 +蔗糖2% +葡萄糖1% , pH 5.5, 暗培养40 d, 诱导率可达90.3%; 体胚发育适宜培养基为改良MS + 6-BA 0.5 mg·L - 1 +蔗糖3% , 光强20 μmol·m -2 · s-1 , 培养20 d后体胚萌发率达6219%; 萌发的体胚在发育培养基上继续培养30 d后均能发育成完整植株。对不同阶段培养材料的组织结构及超微结构的观察证明了花烛体胚发生过程。 相似文献
11.
以‘Red Lion’朱顶红(Hippeastrum vittatum)的鳞片为外植体进行体细胞胚诱导和形态学与组织学的胚性鉴定。结果表明,鳞片在MS+2 mg·L~(-1) BA+1 mg·L~(-1) NAA+2 mg·L~(-1) TDZ+30 g·L~(-1)蔗糖培养基上胚性愈伤组织诱导率可达90.63%,而不添加TDZ的培养基上胚性愈伤组织诱导率为0。胚性愈伤组织可呈白色松散、透明膨松、透明致密、微棕色松脆和翠绿色松脆等类型;非胚性愈伤组织呈微棕色致密状。胚性愈伤组织中可明显观察到球形胚、心形胚和棒状胚3个发育时期。体细胞胚在不添加植物生长调节剂的MS培养基上可发育形成芽和根,长成完整小植株。 相似文献
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T. R Monteiro E. O Freitas G. F Nogueira 《The Journal of Horticultural Science and Biotechnology》2018,93(2):196-203
The current analysis describes an improved protocol for somatic embryogenesis and plant regeneration in oil palm (Elaeis guineensis) through liquid medium, and assesses the influence of successive subcultures during induction of calluses in three Brazilian oil palm varieties. Calluses were induced in a Murashige and Skoog (MS) medium with 450 Picloram, 0.5 g L?1 glutamine, 2.5 g L?1 activated charcoal, 30 g L?1 sucrose, and solidified with 2.5 g L?1 Phytagel. In a first experiment, the effect of continued subculture of explants every 30 days to fresh culture medium was determined. During a second experiment, part of the embryogenic calluses obtained were transferred to a liquid medium under agitation, consisting of MS with 5 µM picloram or 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D). After 210 days, the calluses were transferred to semi-solid media for differentiating somatic embryos. It was observed that continued subculture of explants monthly was a determinant in stimulating and improving the formation of embryogenic calluses. Embryogenic calluses in liquid medium with 2,4-D significantly improved the percentage of differentiated somatic embryos (up to 80.2%), with the largest amount of torpedo embryos (8.3 per callus). Regenerated plants with roots were individualised and transferred to a greenhouse, with close to 95% survival. 相似文献
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多花蔷薇假珠芽诱导、体细胞胚发生及植株高效再生 总被引：8，自引：1，他引：7
以多花蔷薇‘无刺3号’成熟种子为外植体,探讨了假珠芽诱导、体细胞胚发生及植株高效再生的方法。结果表明,种子的子叶在添加2, 4-D 0.5～2 mg·L-1的1/2 MS培养基上暗培养30 d后所产生的愈伤组织,接种到添加TDZ 5～20 mg·L-1的1/2 MS培养基上光培养20 d产生初级假珠芽。假珠芽在添加TDZ 10 mg·L-1和GA3 0.1 mg·L-1的诱导培养基上暗培养20 d后,在含麦芽糖的无激素培养基上光培养产生少量次级假珠芽和胚性愈伤组织。假珠芽保存在诱导培养基上。胚性愈伤组织可发育成大量正常体细胞胚,继而再生正常植物。假珠芽可通过上述方法不断诱导体细胞胚和假珠芽,通过这种方法假珠芽已经保存了2年。 相似文献
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Camellia reticulata L. plantlets were regenerated by direct and indirect somatic embryogenesis from immature zygotic embryos. Initial explants (cotyledon sections and embryonic axes) produced somatic embryos without intermediate callus tissue when grown on Murashige and Skoog’s basal medium with 30 gl-1 sucrose and no growth regulators; the somatic embryos completed their development in 4-6 weeks in the same medium. Embryogénie competence was increased by 0.5 and 1 mg l-1 IBA. Histological observation showed the embryos to originate from epidermal and subepidermal cells of the cotyledon and hypocotyl explants. Secondary somatic embryos developed directly from the cotyledons and hypocotyl region of primary somatic embryos by a process that was morphologically very similar to that occurring on zygotic explants. Direct repetitive embryogenesis was maintained by this system. Up to 40% germination occurred when mature somatic embryos were isolated and incubated in medium supplemented with 1 mgl-1 GA3 + 1 mgl-1 IAA. Indirect somatic embryogenesis was induced in callus differentiated on cotyledon explants after three months’ culture in media containing IBA or NAA and/or BAP, embryogenic capacity being retained by callus subcultured on 0.5 mg l-1 IBA + 1 mg l-1 BAP. 相似文献
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适于制作人工种子的一品红体细胞胚的培养 总被引：2，自引：0，他引：2
MS + 2,4-D 2.0 mg·L - 1 + 6-BA 0.5 mg·L - 1固体培养基较适合一品红苞片诱导愈伤组织。MS+ 2,4-D 1.0 mg·L - 1 + 6-BA 0.5 mg·L - 1 +水解酪蛋白80 mg·L - 1固体培养基上体细胞胚分化率最高。活性炭、MS培养基和悬浮振荡培养有利于高频率体细胞胚发生。球形、心形及梨形胚及时转入添加NAA 0.2 mg·L - 1、6-BA 0.5 mg·L - 1及水解酪蛋白80 mg·L - 1的MS液体培养基中, 有利于高质量体细胞胚发生。子叶期胚及时转入添加ABA 0.5 mg·L - 1的上述培养基中, 会提高正常体细胞胚的百分率。用高质量(子叶期) 的一品红体细胞胚包埋制作人工种子, 在无菌条件下萌发率为58.1%。 相似文献
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中国樱桃‘对樱桃’不定根离体再生植株的研究 总被引：8，自引：0，他引：8
采用中国樱桃‘对樱桃’( Prunus pseudocerasus) 无菌生根苗的不定根作为外植体, 成功诱导了胚性愈伤组织, 实现了通过分化不定芽和诱导初生体细胞胚两种方式再生植株。根切段在MS + NAA1.0 mg/L + BA 0.05 mg/L + IBA 0.05 mg/L 培养基诱导获得胚性愈伤组织, 诱导频率达54.2 % , 该愈伤组织在MS + NAA 1.0 mg/L + BA 0.5 mg/L 培养基上不定芽分化率为100 % , 不定芽在MS + BA 0.5 mg/L + IBA 0.1mg/L 培养基上生长发育良好, 转入MS + NAA 0.02 mg/L + IBA 0.02 mg/L 生根培养基生根率达100 %; 整体不定根系统在MS 附加2 ,4-D 1.0～3.0 mg/L 和BA 0.5 mg/L 的培养基上同时诱导初生体细胞胚发生和单极不定芽发生, 每外植体上平均体细胞胚数5～25 个, 不定芽3～22 个。体细胞胚转到MS + BA 0.5 mg/L +IBA 0.1 mg/L 培养基上发育为完整植株, 植株再生率100 %。 相似文献
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以欧洲葡萄‘无核白’（Vitis vinifera‘Thompson Seedless’）未开放的小花蕾为外植体,研究0、1.0、2.0、3.0 mg ? L-1褪黑素（Melatonin）对其体细胞胚的诱导效果。结果表明：‘无核白’小花蕾在 MS + 1.0 ~ 3.0 mg ? L-1 褪黑素 + 2.0 mg ? L-1 6-BA + 30 g ? L-1蔗糖 + 3 g ? L-1植物凝胶的培养基上继代培养30 d时愈伤组织诱导率较好,为73.67% ~ 89.10%,显著高于2,4-D处理,愈伤组织形成所用时间较2,4-D处理缩短了14 d。愈伤组织诱导120 d时,不同浓度褪黑素均出现体细胞胚,其中,以MS + 1.0 mg ? L-1褪黑素 + 2.0 mg ? L-1 6-BA + 30 g ? L-1蔗糖的培养基体细胞胚的发生率最高,180 d时达12.05%。体胚在 MS + 60 g ? L-1 蔗糖 + 0.5 g ? L-1活性炭的X6培养基中萌发30 d后,将萌发的子叶胚转移至MS + 0.2 mg ? L-1 6-BA + 0.1 mg ? L-1 NOA + 30 g ? L-1 蔗糖 + 0.5 g ? L-1活性炭的成苗培养基上,其中,1.0 mg ? L-1褪黑素诱导产生的体胚发育正常的数量较多,为14.84%。不同浓度褪黑素处理的体胚诱导率均于180 d后增长较快,且低浓度的褪黑素有利于体胚萌发与正常发育,2,4-D诱导的愈伤组织无体胚形成。 相似文献
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Anandamoy Dam Chayanika Bhattacharya 《The Journal of Horticultural Science and Biotechnology》2017,92(4):411-423
An efficient indirect somatic embryogenesis and Agrobacterium-mediated transformation protocol for Limonium sinense has been established, wherein neomycin phosphotransferase II (npt II) and β-glucuronidase (GUS) genes were used as selectable and screenable markers, respectively. The efficiency of plantlet regeneration from transformed tissue was compared between direct embryogenesis from leaf and indirect embryogenesis from callus. Embryogenic callus (EC) was initiated from leaf explants on MS medium supplemented with 6.7 μM 2,4-D and 2.22 μM BA. The somatic embryos were induced, matured, and germinated when ECs were transferred onto MS medium supplemented with 4.44 μM BA and 1.07 μM NAA. Agrobacterium tumefaciens strain LBA 4404 containing the vector pBI121 was used for the transformation. Transient GUS expression frequency was evaluated and putative transgenic plants were successfully grown on culture medium in presence of kanamycin (80–100 mg L?1). PCR analysis of putative transgenic plants confirmed the presence of GUS and nptII genes. The transformation efficiency obtained through indirect embryogenesis from calluses (4%) was much higher than through direct embryogenesis from leaf explants (0.9%). 相似文献