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猪流行性腹泻病毒的分离及适应传代细胞培养病毒株的建立 总被引:9,自引:0,他引:9
作者从广东地区表现有流行性腹泻症状的病猪采集的病料通过在细胞维持液中加入每ml含60μg胰酶量的细胞培养方法,可使Vero传代细胞在培养24小时,60%细胞出现细胞融合,形成合胞体等特征的细胞病变,并且,经过动物回归试验,电子显微镜观察,血清学,病毒核酸型鉴定和理化特性等试验结果表明,分离获得的病毒分离物为猪流行性腹泻病毒分离获得的PEDV,在含有胰酶的细胞维持液条件下,用Vero传代细胞培养传代 相似文献
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猪流行性腹泻弱毒疫苗的研究 总被引:5,自引:1,他引:4
用从广州地区流行性腹泻病猪分离并适应到Vero等传代细胞的猪流行性腹泻病毒G1强毒株,通过Vero、ST细胞株的连续传代,证明第72代毒已被致弱。用83代毒对吃初乳前的小猪以8 ̄10ml剂量口服连续传5代,每代都从接种猪小肠取样接种细胞进行培养鉴定,并于增殖后作为次代接种材料,结果5代毒均未引起小猪发病,证实该代次毒株的安全、稳定、达到了常规弱毒疫苗株要求的标准。 相似文献
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鸡传染性法氏囊病病毒适应于Vero细胞的初步研究 总被引:1,自引:0,他引:1
将国内6个省市(广东、巾东、河北、辽宁、、新疆和北京)的7株鸡传染性法氏囊病(IBD)的法氏囊组织处理后,直接在Vero细胞上盲传3~4代,均能不同程度的产生特征性细胞病变效应(CPE),并通过选用具有广谱性的抗法氏囊病病毒的单克隆抗体(IBI)V-McAb)采用间接免疫荧光(IFA)和碱性磷酸酶—抗碱性磷酸酶桥联酶显色技术(APAAP)的方法对7株分离毒的Vero第8代细胞进行鉴定,又用逆转—聚合酶链式反应(RT-PCR)对7株分离毒的第14代Vero细胞毒进行进一步证实,结果表明这7株IBD囊毒均适应于Vero细胞上,这是国内首次报道将组织毒直接适应于Vero传代细胞上。 相似文献
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猪流行性腹泻病毒适应Vero传代细胞试验 总被引:1,自引:0,他引:1
在细胞培养液中加胰酶,使猪流行性腹泻病毒成功地适应于Vero传代细胞,第6代开始培养液中不含胰酶,仍可稳定出现易于判定致细胞病变作用,第8代毒价达8.0/0.1ml。 相似文献
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间接法Dot-ELISA检测猪流行性腹泻抗体的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
使用非洲绿猴肾(Vero)细胞增殖适应传代细胞培养的猪流行性腹泻病毒(PEDV),并经聚乙二醇(PEG)沉淀法分离纯化PEDV抗原,建立斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)检测猪流行性腹泻(PED)抗体。在最适工作条件下,进行了敏感性和特异性试验,结果表明,该法检测PEDV抗体,敏感、特异、重复性好,且方便、快捷,适用于大批量试样的检测,可作为一种诊断PED的比较理想的方法。采用此方法分别对来自加拿大、台湾省进口的种猪和海南省和广东省内种猪群的血清样共834份进行了检测,检测得PEDV抗体阳性率达21%。 相似文献
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5株已适应鸡胚细胞的AVAV在Vero细胞上传2~5代后各毒株均能产生明显的CPE和较高的病毒滴度,而2株非鸡胚细胞适应株(分别为鸡胚毒和野外组织毒)在Vero细胞上盲传7代,仍无明显的CPE出现。这一结果初步表明Vero细胞能用于已适应鸡胚细胞的毒株的增殖。而不能用于病毒的分离。吸附时间与冻融次数明显影响病毒的适应进程,以吸附1小时、冻融2次以上为佳。AVAVJN-1株能在Vero细胞上产生蚀斑,大小为2.7~4.4mm,出斑时间为接种后4~5天,Vero细胞用于中和试验,测得S(1133)株免疫鸡血清的小和效价为1:80。 相似文献
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猪流行性腹泻病毒适应Vero细胞培养及以传代细胞毒制备氢氧化铝灭… 总被引:1,自引:0,他引:1
采用在病毒培养液中加5-10μg/ml胰酶的培养方法,将猪流行性腹泻毒CV777适应于Vero细胞,并传45代,细胞病毒规律,经免疫荧光检查阳性,电镜观察可见典型冠状病毒粒子,猪传染性胃肠炎免疫荧光检查阴性,猪流行性腹泻血清可抑制细胞病变。PEDV CV777毒株11,25,28,40及44例传代毒的毒价分别为10^3.5,10^5.5,10^7.0和10^7.0TC1D50/0.3ml。以11, 相似文献
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猪白细胞干扰素的研制丁敦志(四川省乐至县畜牧中心,641500)李品齐王劲邓秀兰(四川乐至世红生物制品公司)干扰素是一种广谱抗病毒药物,其疗效在医学临床上已得到普遍肯定[1]。目前,猪病毒性传染病发病率较高,严重地阻碍着养猪业的发展[2]。研制有效的... 相似文献
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猪流行性腹泻病毒适应Vero细胞培养及以传代细胞毒制备氢氧化铝灭活疫苗免疫效力试验 总被引:4,自引:0,他引:4
采用在病毒培养液中加5~10μg/ml胰酶的培养方法,将猪流行性腹泻病毒(PEDV)CV_(777)适应于Vero细胞,并传45代.细胞病变规律.经免疫荧光检查阳性,电镜观察可见典型冠状病毒粒子,猪传染性胃肠炎(TGE)免疾荧光检查阴性,猪流行性腹泻(PED)血清可抑制细胞病变(CPE).PEDVCV_(777)毒株11、25、28、40及44代传代毒的毒价分别为10 ̄(3.5)、10 ̄(5.5)、10 ̄(6.5)、10 ̄(7.0)和10 ̄(7.0)TCID_(50)/0.3ml。以11、21及22代的毒10ml头口服接种未吃初乳仔猪,可使之典型发病,免疫荧光及电镜观察均呈阳性.分别以25、28及31代毒0.5ml/头、1ml/头、2ml/头口服接种3日龄仔猪18头.除0.5ml组有1头反应外,均未发病,攻毒试验的总保护率为87.5%,对照组100%发病.以28代毒制备氢氧化铝灭活苗,后海穴位接种,主动免疫组85.19%保护,被动免疫组85%保护,对照组100%及92.3%发病. 相似文献
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肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7的研究近况潘玲(综述)吴信法(审校)(安徽农业大学合肥230036)肠出血性大肠杆菌(EHEC)包括一些与出血性结肠炎有关的,并能产生Vero细胞毒素的大肠杆菌(VTEC)。VTEC培养物的滤液能使Vero细... 相似文献
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适应Vero细胞传染性腔上囊病毒(IBDV)X毒株,通过对鸡胚的致死作用、病理变化的结果表明,IBDV X毒株在Vero细胞上传代后,各试验代次毒株均能适应鸡胚,并引起鸡胚死亡,对鸡胚的致病性随传代次数的增加而减弱。 相似文献
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CDV93039株感染Vero细胞后主要表现细胞变性、坏死,空泡化、合胞体形成和包涵体的出现。感染后4天可见胞浆包涵体,8天可见核内包涵体,核内包涵体的产生可能与病毒的毒力有关。与文献报道的CDV其他毒株相比,CDV93039株在Vero细胞上的感染速率属中间型。CDV93039株在Vero细胞上增殖后的毒力较高,除不同毒株间可能存在差异外,培养温度的高低亦是原因之一。CDV93039株在Vero细胞上的最佳增殖条件是在33℃培养8~12天。 相似文献
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抗独特型抗体(a-ids)已被成功用于鉴定不同细胞系上牛病毒性腹泻病毒受体,a-ids能特异结合培养细胞并鉴定出一种分子量为50kDa的细胞膜蛋白,这可能就是BVDV的特异受体,在本实验中,流式细胞术中分析表明a-ids能特异地与MDBK,EBK,BT,RK15,MA104和Vero等不同的细胞结合。病毒吸附和复制试验表明,除猴肾细胞MA104和Vero外,BVDV都能吸会并复制,噬斑减少试验结果 相似文献
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CDV93039株在Vero细胞上增殖的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
CDV93039株感染Vero细胞后主要表现细胞变性,坏死,空泡化,合肥体形成和包涵体的出现。感染后4天可见胞浆包涵体,8天可见核内包涵体,核内包涵体的产生可能与病毒的毒力有关。与文献报道的CDV其他毒株相比,CDV93039株在Vero细胞上的感染速率属中间型。 相似文献
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猪两种腹泻病毒混合感染的病原诊断 总被引:1,自引:1,他引:0
对我省流行的疑似猪病毒性腹泻进行了病原诊断,通过细菌培养、RNA电泳和电镜形态观察等辅助诊断和免疫萤光特异性诊断,确诊该病病原为猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)与猪流行性腹泻病毒(PEDV)的混合感染,混合毒代号为TPV3。 相似文献