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【目的】对日本抗性黑松体细胞胚成熟的影响因子进行研究,探究各因素在体细胞胚发生过程中的作用,为进一步提高体细胞胚发生的质量和数量提供理论依据。【方法】胚性细胞团在固体增殖培养基上继代生长10天,使用灭菌(75%乙醇擦拭、紫外灭菌30 min)的电子天平称量1 g胚性细胞团,采用50 mL无菌量筒(紫外灭菌30 min)量取30 mL培养液中于100 mL的三角瓶中,将1 g胚性细胞团转至100 mL的三角瓶中,手动搅拌至细胞团分散,置于90 r·min-1摇床上,25℃黑暗培养7～8天。随后,取3 mL沉淀悬浮细胞进行继代增殖,每星期继代增殖一次至胚性细胞全部均匀散落于培养液。将继代4次的胚性细胞充分摇匀,取2 mL(鲜质量约200 mg)胚性悬浮细胞喷洒在不同组分麦芽糖(30、45、60 g·L-1)、脱落酸(ABA)(0、5、10、20、30、50 mg·L-1)、聚乙二醇(PEG8000)(0、50、75、100、125、150 g·L-1)、活性炭(AC)(1、2、3 g·L-1)、琼脂(琼脂6、8、10、12 g·L-1,植物凝胶2、2. 5、3、3. 5 g·L-1)以及麦芽糖、ABA、PEG 3因素的组合固体成熟培养基上。【结果】以#1337为材料的体细胞胚成熟发育过程中,麦芽糖45 g·L-1,获得的体细胞胚数量显著增多。ABA浓度为5～20 mg·L-1,体细胞胚数量呈显著上升趋势,ABA为20 mg·L-1时,获得的体细胞胚最多。125 g·L-1PEG8000为体胚发生最佳浓度; AC 2 g·L-1时,胚性细胞形成结构完整、数量较多的成熟体胚;成熟培养基中添加琼脂粉,培养基不能凝固,植物凝胶更适合作为成熟培养基凝固剂。3 g·L-1植物凝胶为抗性黑松体胚发育成熟的最佳浓度。在设计的9种成熟培养基组合中(胚性细胞#1337、#1537、#1637),胚性细胞产生体细胞胚最多的成熟培养基组合为麦芽糖45 g·L-1、ABA 10 mg·L-1、PEG8000 125 g·L-1。在不同的麦芽糖、ABA和PEG组合中,不同无性系生产体细胞胚数量呈现出不同的变化趋势:胚性细胞系#1337体胚发育成熟的最佳组合为麦芽糖45 g·L-1+ABA 10 mg·L-1+PEG 125 g·L-1;#1537和#1637体胚发育成熟的最佳组合为麦芽糖30 g·L-1+ABA 10 mg·L-1+PEG 125 g·L-1;在3个无性系中PEG的极差最大,对抗性黑松体细胞胚发育成熟的影响最大。【结论】抗性黑松体胚发育成熟过程中,麦芽糖45 g·L-1、ABA20～30 mg·L-1、PEG8000 125 g·L-1、AC 2 g·L-1和植物凝胶3 g·L-1对体细胞胚成熟都具有促进作用。30 g·L-1麦芽糖、10 mg·L-1ABA、125 g·L-1PEG为抗性黑松体胚发育成熟的最佳组合。 相似文献
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本研究以水曲柳不同外植体(无菌苗叶片和下胚轴、未成熟合子胚、成熟和未成熟合子胚子叶)为材料，在胚性愈伤组织诱导、胚性愈伤组织增殖、体胚形成、体胚萌发生根培养基上诱导分化。结果表明，附加了5.0 mg·L-1 NAA和2.0 mg·L-1 6-BA的激素配比的MS培养基，为诱导水曲柳胚性愈伤组织最适培养基；在5种不同的外植体中，成熟和未成熟合子胚子叶更适合作为诱导胚性愈伤组织的外植体；在诱导胚性愈伤组织中，成熟合子胚子叶诱导率为11.7%,未成熟合子胚子叶诱导率为9.7%;胚性愈伤组织在继代培养过程中，WPM为最佳基础培养基，附加0.1 mg·L-1 6-BA和0.15 mg·L-1 2,4-D的激素配比，胚性愈伤组织的增殖系数可达到1.54。在体胚成熟过程中，MS培养基内添加1.0 mg·L-1 ABA时，体胚的诱导率最高，达到55%。在生根萌发的WPM基础培养基中附加1.0 mg·L-1 IBA和1.0 mg·L-1 IAA的激素配... 相似文献
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【目的】研究优化山苍子茎段愈伤组织诱导和植株再生体系的方法,提高不定芽的分化率和生根率,为山苍子良种的工厂化繁育及遗传转化体系的建立提供技术支撑。【方法】本研究以山苍子茎段节间(不带芽)为外植体,通过比较不同植物生长调节剂对其愈伤组织的诱导、增殖以及不定芽的分化、生根的影响,确定山苍子愈伤组织诱导和植株再生的最适培养基。在此基础上,对获得的再生植株进行移栽试验,比较不同基质对移栽成活率的影响。【结果】山苍子茎段愈伤组织诱导的最适培养基为1/2 MS+0.2 mg·L-1 6-BA+0.3 mg·L-1 NAA+30 g·L-1蔗糖+7 g·L-1琼脂,其诱导率为100%;愈伤组织增殖的最适培养基为1/2 MS+0.5 mg·L-1 6-BA+1.0 mg·L-1 NAA+30 g·L-1蔗糖+7 g·L-1琼脂,愈伤组织增殖系数达3.43;诱导不定芽分化的最适培养基为1/2 MS+0.5 mg·L-1<... 相似文献
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[目的]建立和优化火炬松体胚发生技术体系，为火炬松优良基因型体胚繁育及遗传转化体系建立提供技术支撑。[方法]以火炬松优良基因型的未成熟合子胚为材料，从基因型、球果采集期、基本培养基、植物外源激素组合及浓度等方面对胚性愈伤组织诱导条件进行优化；选取增殖效果好、具有胚性胚柄细胞团（ESM）的胚性愈伤组织开展体胚成熟的正交试验，选择发育正常的子叶胚进行萌发，8周后移栽。[结果]基因型、球果采集期、基本培养基和外源激素（PGR）组合及浓度等因子均对胚性愈伤组织诱导有不同程度的影响。火炬松6种基因型中荣山52胚性愈伤组织诱导率最高，达63.33%；处于裂生多胚期的合子胚为外植体的最佳采样期（7月20日左右）；6种基本培养基中，在DCR基本培养基上胚性愈伤组织诱导率最高，达40.00%；不同PGR组合及浓度中，以0.5 mg·L-1 6-BA+1.0 mg·L-1 2,4-D+2.0 mg·L-1 NAA+5.0 mg·L-1ABA的胚性愈伤组织诱导率最高，达50.00%。胚性愈伤组织在基本培养基MLP上培养1... 相似文献
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以宜昌荚蒾叶片作为外植体,研究了培养基种类、不同配比的植物生长调节剂对宜昌荚蒾叶片愈伤组织诱导和小植株再生的影响。结果表明：宜昌荚蒾叶片灭菌最适方法为75%酒精处理30s,再用0.1%HgCl2溶液处理5 min;叶片诱导愈伤组织的最适培养基为1/2MS+6-BA0.05 mg·L-1+NAA1.0 mg·L-1,诱导率100%;再分化的最佳培养基为N6+6-BA0.5 mg·L-1+TDZ0.7mg·L-1+IBA0.5 mg·L-1+IAA0.2 mg·L-1再分化率为100%;最佳生根培养基为1/2MS+6-BA0.05 mg·L-1+NAA0.50 mg·L-1+活性炭1 g·L-1,生根率为100%。 相似文献
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以火草叶片为外植体，研究了愈伤组织诱导与分化的方法。结果表明，火草无菌叶片在WPM+0.6 mg·L-16-BA+0.45 mg·L-1NAA+30 g·L-1蔗糖的培养基中，能诱导出直径0.5 cm、结构致密、质地硬的绿色愈伤组织，愈伤组织在WPM+0.75 mg·L-16-BA+0.15 mg·L-1NAA+30 g·L-1蔗糖的培养基中培养30 d分化出芽，平均每个分化的愈伤组织长出5.78个芽，芽苗转入1/2DKW+1.0 mg·L-1 IBA+0.1mg·L-1 NAA+30 g·L-1蔗糖的培养基中培养30 d后，发育出5—13条不定根，且带有根毛的发达根系。 相似文献
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杂交鹅掌楸体细胞胚胎发生研究 总被引：33，自引：1，他引：33
以杂交鹅掌楸幼胚为外植体,进行体细胞胚胎发生研究.比较了亲本基因型、发育阶段、培养条件、生长调节物质和渗透压等对体细胞胚胎发生的影响.结果表明在以1/2MS培养基为基本成分,添加2.0～3.0mg@L-12,4-D的培养基上能够成功诱导胚性愈伤组织.以蔗糖为渗透剂,提高渗透压有利于体细胞胚胎发生;以MS为基本培养基附加ZT 1.0～4.0mg@L-1对体细胞胚胎诱导最有效;ABA的使用能有效控制畸形胚的产生;基因型、幼胚发育阶段及光照条件对体胚发生起着重要作用. 相似文献
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植物磺肽素(PSK),是近年来发现的一种新型植物肽类生长调节物质,具有促进单细胞的分裂增殖等生理功能.以杂交鹅掌楸未成熟胚来源的体胚发生体系为材料,探索PSK-α在植物体胚发生中的作用.研究发现PSK-α能够促进细胞分裂和增殖,有利于胚性细胞的形成.在杂交鹅掌楸体胚发生初期添加0.1 mg·L-1的PSK-α可提高未成熟胚的脱分化率并能有效改善培养细胞的状态;0.5 mg·L-1的PSK-α能够促进胚性愈伤组织的形成和增殖;体胚形成后期添加0.8 mg·L-1的PSK-α利于其正常发育以及再生植株的培养. 相似文献
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【目的】建立天山云杉体细胞胚成熟及萌发阶段的适宜培养条件,为该树种的体细胞胚大规模繁殖和工厂化生产提供基础。【方法】以天山云杉成熟合子胚为外植体所诱导形成的胚性愈伤组织为材料,通过14个株系、4种成熟培养基、接种量(100、150、200mg的新鲜胚性愈伤组织)、ABA浓度(1.9、3.8、7.6、19、38μmol·L^-1)等体细胞胚成熟培养条件,以及对不同起源(体细胞胚、合子胚和种子)的幼苗形态特征的比较,筛选出最优的天山云杉体细胞胚成熟与萌发条件。采用SPSS18.0等统计软件对体细胞胚进行统计分析。【结果】1)天山云杉14个株系诱导体细胞胚的结果表明,不同株系在同一成熟培养基上诱导体细胞胚的数量存在差异;其中4个株系及其接种量对体细胞胚形成数量影响的结果表明,不同株系及其接种量诱导体细胞胚的数量也存在差异,当接种量为100mg时,T36株系的体细胞胚诱导数量最高,为3470±546个,显著高于其他接种量和株系(P<0.05)。2)在4种不同成熟培养基上,均形成了成熟的体细胞胚,在1/2BLG+30g·L^-1麦芽糖培养基上形成的体细胞胚数量高于其他培养基,分别为2044个(T6株系)和2282个(T36株系),且与其他培养基差异显著(P<0.05)。3)不同ABA浓度对天山云杉体细胞胚诱导数量的影响无显著性差异(P>0.05),在ABA浓度为1.9~38μmol·L^-1时,其体细胞胚平均诱导数量为2850~2913个,其中以7.6μmol·L^-1ABA的浓度处理效果较好,平均获得2913个正常体细胞胚,高于其他处理。4)将不同起源(体细胞胚、合子胚和成熟种子)萌发的小植株进行对比,结果表明,体细胞胚和合子胚幼苗发育阶段基本一致,但合子胚的幼苗比体细胞胚的幼苗约大1倍,但二者间差异不显著(P>0.05);体细胞胚与合子胚子叶的平均数量一致,二者无显著差异(P>0.05),多数幼苗子叶数量为7~8个。【结论】天山云杉体细胞胚成熟阶段的适宜培养条件为胚性愈伤组织接种量100mg,1/2BLG培养基添加7.6μmol·L^-1的ABA及75%PEG4000、30g·L^-1麦芽糖,并添加750mg·L^-1的L-谷氨酰胺或50mg·L^-1L-天冬酰胺。不同株系在诱导体细胞胚的数量上存在差异。体细胞胚再生植株与合子胚植株在形态上相似。研究结果可为天山云杉体细胞胚的大规模繁殖和工厂化生产提供基础。 相似文献
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《林业科学》2017,(12)
【目的】研究脱落酸、PEG、肌醇、碳源、凝固剂及培养方式等对抗松材线虫病赤松体细胞胚发育及成熟萌发的影响。【方法】通过对抗松材线虫病赤松种质资源库的调查与分析,选用诱导和增殖状态良好的抗松材线虫病赤松无性系22#-1和13#-1为供试材料,通过不同培养条件的对比试验,筛选出最优的抗病赤松体细胞胚发育及成熟萌发条件。采用SPSS17.0等软件对体细胞胚进行统计分析。【结果】添加15 mg·L~(-1)ABA和140 g·L~(-1)PEG8000的LP培养基上,正常体细胞胚数达到171个·g~(-1),高于其他处理;在渗透剂方面,肌醇的浓度为8.0g·L~(-1)时,抗病赤松的正常体细胞胚数最多,达到179个·g~(-1),胚性愈伤组织直接放置于添加了肌醇的成熟培养基中,没有在中间过渡培养基中培养,因此可以缩短2~3周培养时间,在8周前后就形成了成熟的子叶胚;在碳源方面,添加60 g·L~(-1)麦芽糖的LP培养基上,正常的体细胞胚数达到235个·g~(-1),高于其他处理;在凝固剂方面,植物凝胶浓度为3.0 g·L~(-1)时,培养基凝固,软硬适中,产生的子叶胚生长良好,而培养基中添加了聚乙二醇(PEG),凝固剂琼脂从6.0 g·L~(-1)添加至12.0 g·L~(-1)时,培养基均不能凝固,愈伤组织无法生长,也无子叶胚形成;在培养方式方面,采用液-固增殖-固成熟方式培养时,胚性愈伤组织经11~12周发育为成熟体细胞胚,其中22#-1的正常体细胞胚数最多达到239个·g~(-1),高于其他处理;在体细胞胚萌发培养基上产生的体细胞胚的萌发率和植株转化率分别为67.2%和46.5%,再生植株移栽3个月后成活率为32.7%。【结论】将抗松材线虫病赤松胚性愈伤组织置于15.0 mg·L~(-1)ABA、140 g·L~(-1)PEG8000、8.0 g·L~(-1)肌醇、60 g·L~(-1)麦芽糖、3.0 g·L~(-1)植物凝胶的LP培养基上,以液-固增殖-固成熟培养方式培养,成功获得了正常的体细胞胚和再生植株,同时可缩短2~3周培养时间,加快抗松材线虫病赤松体细胞胚胎发生的进程。研究结果可为抗病赤松的大规模繁殖和工厂化生产提供技术支持。 相似文献
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白刺花胚性愈伤组织诱导及体细胞胚发生 总被引：1，自引：0，他引：1
【目的】探讨不同植物生长调节剂对白刺花胚性愈伤组织诱导的作用,以及培养基中氮源和无机盐浓度对白刺花体细胞胚发生和植株再生的影响,以期建立白刺花体细胞胚发生、发育及调控技术体系,为白刺花种苗快速繁殖体系建立及遗传转化研究提供参考。【方法】以白刺花叶片为外植体,研究生长调节剂2,4-D(1.0、2.0、3.0、4.0 mg ·L -1 )、NAA(0、0.5、0.8、1.0 mg ·L -1 )、6-BA(0.2、0.5、1.0、2.0 mg ·L -1 )和TDZ(0、0.2、0.5、1.0 mg ·L -1 )组合对胚性愈伤组织诱导,及NAA(0、0.2、0.5 mg ·L -1 )、6-BA(0、0.5、1.0 mg ·L -1 )和TDZ(0、0.2、0.5 mg ·L -1 )组合对体细胞胚发生的调控作用,筛选最优生长调节剂组合;并研究培养基中KNO 3和NH 4NO 3比例对体细胞胚发生的作用,及MS培养基中无机盐浓度(1/5MS 、1/4MS、1/3MS、1/2MS)对体细胞胚萌发的影响,筛选最佳的体细胞胚发育及成熟萌发条件。【结果】白刺花叶片外植体胚性愈伤组织诱导适宜培养基为MS + 2,4-D 3.0 mg ·L -1 + NAA 0.5 mg ·L -1 + 6-BA 0.2 mg ·L -1 + TDZ 1.0 mg ·L -1 +蔗糖40 g ·L -1 +琼脂7.0 g ·L -1 ,诱导率为42.0%。采用MS基本培养基时,最佳的体细胞胚发生培养基为MS + NAA 0.5 mg ·L -1 + 6-BA 1.0 mg ·L -1 + TDZ 0.5 mg ·L -1 +蔗糖40 g ·L -1 +谷氨酰胺100 mg ·L -1 +琼脂7.0 g ·L -1 ,体细胞胚发生率为78.46%,总胚数为对照的3.6倍;MS培养基中,KNO 3浓度提高1倍、NH 4NO 3降至1/2时,体细胞胚发生率可提高至91.33%,总胚数为采用MS基本培养基时的1.4倍;1/3MS培养基有利于体细胞胚的萌发,萌发率为82.75%,幼苗长势良好,单株平均鲜质量为76 mg,幼苗驯化移栽1个月后成活率达90%以上。【结论】白刺花叶片接种于添加2,4-D、NAA、6-BA和TDZ不同组合的诱导培养基上,可脱分化形成愈伤组织或胚性愈伤组织,2,4-D浓度对愈伤组织形态和质地有较大影响。TDZ有利于体细胞胚的形成,适宜浓度的生长素与细胞分裂素组合及硝态氮和铵态氮的比例对体细胞胚的形成和发育具有调控作用,降低MS无机盐浓度可提高体细胞胚萌发率,本试验体系的再生植株移栽成活率达90%以上。 相似文献
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栓皮栎体胚的增殖、成熟和萌发 总被引：1，自引：0，他引：1
以栓皮栎实生苗叶片为外植体诱导体细胞胚胎发生,调查碳水化合物、渗透剂和植物生长调节剂对体胚增殖、成熟和萌发的影响,建立体胚增殖、成熟和萌发的培养基方案.叶片外植体在附加1.0 mg·L-1NAA和0.5mg·L-1BA的起始培养基上诱导形成前胚性团块.这些胚性团块在增殖培养基上培养6周,在附加1 mg·L-1BA、0.25 mg·L-1NAA和3%蔗糖的MS培养基上增殖效果最好.将单个体胚转接到成熟培养基上进行培养,蔗糖浓度对栓皮栎体胚成熟以及后续的萌发有显著影响.成熟培养基中附加5%的蔗糖,体胚成熟率和萌发率分别达到63.5%和33.8%.虽然在成熟培养基中附加ABA有利于体胚成熟,但对体胚的进一步萌发没有促进作用.为了提高萌发率,成熟体胚在附加植物生长调节剂的萌发培养基上进行培养,以及进行预冷处理.成熟体胚4℃冷处理没有促进胚根和上胚轴的发育萌发.在附加0.5 mg·L-1BA和0.25 mg·L-1 IBA的1/2 MS萌发培养基上,体胚萌发率达到65.9%,再生植株转化率达到9.4%. 相似文献
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【目的】植物体细胞胚胎发生和植株再生受多重因素影响。为了完善樟树体细胞胚胎发生培养技术,提高其遗传转化效率,满足樟树用材的需要。【方法】本研究以樟树未成熟种子为试材,探讨了预处理、不同采种时间、活性炭、肌醇及激素浓度对樟树胚萌发早期的影响,并对不同种源樟树胚性愈伤组织诱导体细胞胚胎发生、分化、生根等进行研究。【结果】预处理对樟树幼胚萌发无显著性影响;不同的采种时间对胚萌发率和平均出芽数影响很大;随着活性炭浓度的升高,胚萌发率呈现先升高后下降的趋势;肌醇浓度对樟树幼胚萌发率和平均出芽数均无显著性影响;对6-BA、NAA、IBA和链霉素进行正交设计试验,其影响的主次顺序为:6-BA> NAA>链霉素> IBA;长沙和郴州种源樟树胚性愈伤组织诱导率最高,达66.67%,但生长情况最好的是长沙和岳阳种源胚性愈伤组织;岳阳、郴州、醴陵、长沙、怀化、娄底愈伤组织诱导体胚发生最大诱导率分别为56.41%、42.31%、48.96%、64.71%、63.25%、56.31%;各种源樟树生根率良好,长沙种源有最高生根率89.25%,郴州和醴陵种源樟树最佳生根激素配比为1 mg/L IBA+0.1 mg/L IAA,其余种源生根最适激素均为1 mg/L IBA+0.1 mg/LNAA。【结论】浸泡处理不利于幼胚后期生长发育;附加150 mg/L的活性炭,培养基褐化率较低;6-BA对幼胚早期萌发占主导作用;实验时选择7月未成熟合子胚的长沙种源樟树最佳。 相似文献
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刺槐未成熟合子胚的体细胞胚胎发生和植株再生 总被引：3，自引：0，他引：3
以刺槐不同胚龄的未成熟合子胚为外植体,采用混合正交试验设计,研究幼胚胚龄和不同外源激素种类及质量浓度对刺槐胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚分化、萌发的影响.结果表明:开花后8周(55天左右)是胚性愈伤组织和体胚诱导的最佳外植体取材时期;MS+2,4-D 5.0 mg·L-1 +BA0.5 mg·L-1是诱导胚性愈伤组织的最佳培养基,出愈率最高为95.42％±0.02％;MS +NAA0.5 mg·L-1 +BA0.5 mg·L-1+谷氨酰胺250 mg·L-1+水解酪蛋白500 mg·L-1是体细胞胚诱导和分化的最佳培养基,直接体细胞胚发生率最高为92.40％±0.12％,通过愈伤组织诱导体细胞胚发生的频率最高为90.73％ ±0.49％.一旦形成球形胚,将培养物转接到不含任何生长调节剂的MS培养基上,体细胞胚经成熟萌发可进一步形成完整小植株. 相似文献
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花曲柳体胚发生和植株再生 总被引：1，自引：0，他引：1
以花曲柳合子胚的单片子叶为外植体成功诱导出体胚并获得再生植株。未成熟合子胚的子叶在添加400mg·L-1水解酪蛋白、0.25mg·L-16-BA、1.5mg·L-1NAA、70g.L-1蔗糖和6g·L-1琼脂的MS1/2培养基上可以成功诱导产生体胚,诱导率达到34.7%,每个外植体上体胚数量为2～9个。成熟合子胚的子叶在添加0.25mg·L-16-BA、2mg·L-1NAA的MS1/2培养基(其他成分同上)上可以成功诱导产生体胚,诱导率为10.0%。体胚在MS1/2培养基上经过成熟培养后可以正常萌发,萌发率87.6%。萌发的体胚植株在MS1/2+0.01mg·L-1NAA培养基上生长较好,具备实生幼苗的外观特征。经炼苗后的体胚苗移植到栽培基质(草炭土:蛭石:珍珠岩体积比为5:4:1)中可以正常生长,成活率为75.0%。 相似文献
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Wang Xiao-xiong Lu Long-dou Hao Huai-qing Teng Nian-jun Chen Tong Guo Yi-ming Yang Ying-gen Guo Zhong-chen Lin Jin-xing 《中国林学(英文版)》2007,9(3):182-188
A high-efficiency somatic embryogenesis protocol of Japanese larch (Larix leptolepis Gordon) has been established in our investigation. Calli were induced from immature zygotic embryos of female cones of L. leptolepis and then subcultured regularly on to a modified Gupta and Durzan (DCR) basal medium for 5 years. Embryogenic tissues showed distinct morphological changes dur-ing somatic embryo development when they were transferred to a maturation medium supplemented with abscisic acid (ABA) com-pared with the morphology in a medium lacking ABA. Histological observations indicated that polyembryony was a characteristic feature during early embryogeny and somatic embryos at later stages showed normal histodifferentiation. In addition, histochemical analysis revealed that abundant starch granules and proteins accumulated in mature embryos, indicating that they played important roles in the development and regeneration of normal plantlets from somatic embryos on hormone-free germination media 相似文献
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Sun Bi-po Zhang Wan-jun Dong Jiang-li Jin Yong-sheng Wang Tao State Key Laboratory of Agro-biotechnology China Agricultural University Beijing P. R. China 《中国林学(英文版)》2006,8(4):25-29
A protocol was discussed for high efficient plant regeneration from seven bluegrass (Poa pratensis L.) cultivars via an indirect callus induction and somatic embryogenesis method. Mature seeds were used as explants for callus initiation. Callus induction and proliferation efficiencies were investigated on NB, modified MS (MMS) and MS media, supplemented with 2.0 mg·L-1 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D). The MMS medium performed best. Based on the MMS medium, direct and indirect callus induction effects of bluegrass from mature seeds were compared at the range of 1-5 mg·L-1 2,4-D contained in the medium. Under the direct callus induction method, the most suitable 2,4-D concentrations varied among cultivars. Under the indirect callus induction method, a significantly high callus induction frequency (93.33%-98.33%) was obtained and there were barely any statistically significant differences among the tested genetically diverse cultivars. Somatic embryos were promoted on the MMS medium supplemented with 3 mg·L-1 2,4-D, 0.1 mg·L-1 kinetin and 0.8 mg·L-1 CuSO4. Embryogenetic calli developed into plantlets on the MMS medium containing different concentrations of thidiazuron (TDZ), and the differentiation frequencies varied in the range from 20.15% to 77.65%. The 0.25 mg·L-1 TDZ was generally the most suitable concentration for the tested cultivars. 相似文献
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以杂交鹅掌楸体细胞胚为材料,研究体胚不同发育阶段、大量元素和维生素C、基因型、激素组合以及移栽基质对体胚苗萌发和移栽存活的影响。结果表明：鱼雷型胚萌发效果最好;3/4 MS培养基较适合体胚苗的萌发;Vc有利用保持体胚苗维持正常形态。不同基因型体胚苗萌发差异较大,基因型1×5002萌发效果最好,成苗率为84.26%;而1×4088仅有13.24%。KT 0.1 mg/L＋IBA 0.1 mg/L有利于促进体细胞胚的萌发。不同基因型体胚苗移栽存活率有差异,黄心土较混合泥炭土更适合体胚苗移栽。 相似文献