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目前,PCR已成为实验室中的一项常规技术,是分子生物学家们不可缺少的工具。本文介绍了PCR的历史、反应原理、成分以及这项技术在医学中的广泛应用。 相似文献
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聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）是20世纪80年代中期发展起来的一种体外基因扩增技术，该技术在体外可在短时间内获得大量特定目的基因片段，从而大大简化了传统的分子克隆技术。随着科学技术的迅猛发展，PCR仪自动化程度的不断被提高，使PcR成为具有特异、敏感、产率高、快速、高通量、简便、易自动化等突出优点的常规操作技术之一。 相似文献
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多聚酶链反应(PCR)技术是诞生于80年代的一项体外酶促扩增 DNA 新技术,具有特异性和敏感性高、操作简便、快速高效等特点,现已经广泛用于畜禽传染病和遗传病诊断、生物工程、法医鉴定等诸方面,本文仅就 PCR 技术发展近况及其在家畜病毒性疾病诊断与研究应用概况作一概述。 相似文献
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PCR技术在禽病诊断中应用的研究进展 总被引：1，自引：0，他引：1
聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction,PCR),又称体外基因扩增技术,是80年代中期由Mullis.发明的一种新的分子生物学技术,与传统的检测方法如生物化学、细菌学、病毒学和血清学方法等相比较,PCR方法具有特异性和敏感性高、操作简便、快速高效等特点,而且应用广泛。在病原方面,它既可作病原体的检测,也可同时进行不同病原或同一病原不同株的检测。特别适合难以培养的病毒和细菌的检测。经过近20年的发展,目前已开发出多种PCR技术,以适应不同试验需要,现综述PCR技术在禽病诊断中的应用。1PCR原理PCR是由三个基本反应组成的反复循… 相似文献
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随机扩增多态性DNA技术的原理及应用 总被引：4，自引：0，他引：4
1985年,美国人Kary Mullis等发明了PCR技术,两年后PCR自动化装置仪器的完成使基进入实际应用的阶段,该装置用于扩增特定的模板DNA,使DNA的量成倍增加,可用于各种用途的DNA分析。1990年,由杜帮公司的Williams等人基于PCR技术之上首次推出了一种简便、灵敏可行的新的遗传标记技术——随机扩增多态性DNA（Random amplified poly-morphic DNA,RAPD）[1]。尽管RAPD技术诞生的时间很短,但由于其独特的检测DNA多态性的方式以及简便快速的特点,且具有可用引物数量大,检测区域几乎覆盖整个基因组,多态信息含量大等,使得该技术已渗透到分子生物学领域基因研究的各个方面。可以预料,该技术的发展会使分子遗传学得到更广泛的应用。 相似文献
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实验在大肠杆菌产生的志贺样毒素2型变异体(Shiga-like toxin Ⅱ e,Stx2e)研究的基础上,设计了一对特异性引物,通过优化,建立了以PCR为基础,高效快速检测猪水肿病的PCR试剂盒.该试剂盒扩增的阳性条带为172 bp的特异性DNA片段,最低检出菌体量为120 CFU,在-20℃至少可保存12个月,重复性良好.应用猪水肿病PCR快速检测试剂盒对22份新鲜样本进行了检测,结果显示,其中的5个样本含Stx2e阳性大肠杆菌,PCR检测结果与剖检、细菌学和生化检验结果相一致. 相似文献
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聚合酶链反应(Polymerasrchainreaction,PCR)作为一种快速体外基因扩增技术,因其操作简便、敏感性好、结果可靠等优点,近年来在生物医学的各个领域得到广泛应用。本文就PCR技术在原虫病诊断中的应用,做一综述。 相似文献
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实时荧光PCR技术在动物疫病诊断中的应用 总被引：1，自引：0，他引：1
近年来，实时荧光PCR技术在动物疲病诊断中的应用得到了进一步的发展，在诊断动物的病毒性、细菌性和寄生虫性疫病中得到了广泛的应用。实时荧光PCR不仅实现了常规PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，实时荧光PCR技术由于多使用了一条可与模板互补配对的荧光探针，提高了特异性，并且由自动化仪器收集荧光信号，避免了肉眼判断的主观性，又可进一步提高灵敏度；实时荧光PCR技术全封闭反应，无须PCR后处理，避免污染，保证了结果的可靠性和重复性。随着实时荧光PCR试剂盒的进一步开发，实时荧光PCR技术将会在动物疫病诊断中得到更加广泛的应用。 相似文献
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PCR是近年来发展起来的一项分子生物学新技术 ,具有灵敏、特异、快速、简便和适用面广等优点 ,因而在分子生物学检测与研究中具有广阔的应用前景。目前 ,PCR被广泛应用于众多领域 ,其在支原体检测中的应用与发展已经取得了可喜的成绩。文章简要介绍 PCR在动物支原体检测中的应用 ,包括应用通用 PCR引物与特异性引物检测支原体 ,以及 PCR在禽类、牛和猪支原体检测中的应用现状。表明在实验室和临床中应用 PCR检测支原体是一种有效的方法。 相似文献
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本文概述了马梨形虫病的流行特点及其诊断方法，并分析了各种诊断方法的优缺点。病原学诊断可快速诊断病例，但大量检测时操作较为困难；ELISA 技术已经十分成熟，是世界动物卫生组织推荐的标准诊断方法；CFT可准确诊断早期（急性）感染，但无法识别经过药物已产生抗补体反应的个体；PCR方法可直接检测病原体核酸，敏感性较高，但操作较为复杂；real-time PCR特异性强、灵敏度高、稳定性强，但所需仪器昂贵；LAMP技术敏感、简便、快速，但常出现假阳性结果。除病原学检测外，以上方法大多不适于田间检测。因此，需要建立一种操作简便、诊断准确、成本低廉的田间检测方法，未来研究方向将主要侧重于免疫学和分子生物学。 相似文献