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1.
ELISA在检测动物组织氯霉素残留中的应用 总被引：5，自引：0，他引：5
采用酶联免疫吸附实验 (Enzyme-linked Immunosorbent Assay ELISA)方法,筛查和定量检测氯霉素（Chloramphenicol）。试样经过乙酸乙酯的萃取和正己烷的净化,在温育过程中,将特异性抗体（兔抗CAP）、酶标记CAP（酶结合物）和CAP标准品或样品,加入预先包被了绵羊抗兔IgG抗体的孔内。特异性的抗体便被固定抗体所结合。与此同时,游离的CAP（存在于标准品或样品）和酶结合CAP便互相竟争CAP抗体结合部位（竞争性酶免检测）。然后温育1h洗涤除去非结合（酶标记）试剂。加入底物,结合的酶结合物可将无色的底物转化为有色产物。加入硫酸,终止底物反应。用装有450nm滤光片的酶标仪进行检测,吸光度值与样品中的CAP浓度成反比。试验结果表明,该方法在0.025~2ng/ml范围内相关系数（R2）大于0.995,检测下限0.02 μg/kg,回收率为78.2%。 相似文献
2.
复方杜仲对肉鸡免疫器官发育及ND-HI效价的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]观察不同浓度复方杜仲对肉鸡免疫器官发育及新城疫血凝抑制（ND-HI）效价的影响。[方法]1日龄AA肉鸡400只随机均分4组。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别在饮水添加0 g/L、1.25 g/L、2.5 g/L和5 g/L的复方杜仲。每周末各组随机抽样8只称重、心脏采血、屠宰取胸腺、脾脏和法氏囊称重。[结果] 1至6周胸腺指数、法氏囊指数各组间无差异。14日龄脾指数Ⅱ组高于Ⅰ组(P<0.05);21日龄Ⅱ组高于其他组(P<0.05),其中Ⅱ、Ⅲ组间差异极显著(P﹤0.01);42日龄复方杜仲Ⅱ、Ⅲ组脾指数均低于Ⅰ组(P<0.05),Ⅳ组极显著低于Ⅰ组(P<0.01)。21日龄Ⅲ、Ⅳ组ND-HI抗体水平高于Ⅰ组(P<0.05);28日龄达到最高水平,Ⅱ、Ⅲ组高于Ⅰ组(P﹤0.05),Ⅳ组极显著高于Ⅰ组(P﹤0.01)。[结论] 复方杜仲水煎液对前3周肉鸡脾指数有一定的影响,且以低剂量组效果最佳。对ND-HI效价有增强作用,呈现量效递增关系。 相似文献
3.
布尔山羊公羊身体质量与精液品质和生殖激素之间的关系 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]为了对布尔山羊公羊进行更科学的养殖和更合理的选择与利用,[方法]对24只不同身体质量的2~3岁布尔山羊公羊精液品质和血清生殖激素水平进行了测定。[结果]结果表明：BMI<60kg/m2公羊采精量较低,为0.79±0.03 mL。BMI>80kg/m2公羊虽然采精量较多（1.02±0.07 mL）,但精液密度和活力较差。BMI=60~80kg/m2公羊的采精量居中,为0.95±0.12,但精液密度为28.32±4.08亿/mL,明显高于BMI<60kg/m2组（31.93b±2.06亿/mL）和BMI>80kg/m2组（25.96a±3.23亿/mL）（P<0.05）,而且精子活率高,畸形精子较少。体质量较差的公羊血清睾酮、雌二醇和促卵泡素水平也较低,这三项指标与采精量呈正相关。[结论] 生产中保持公羊良好的体质量是至关重要的。 相似文献
4.
外源α-淀粉酶对肉仔鸡消化器官发育及小肠消化酶活性影响?的后续效应 总被引：1，自引：0，他引：1
选取1日龄AA肉鸡330羽,随机分成3个组,每组5个重复,每个重复22羽,分别饲喂基础日粮（对照组）和在基础日粮中添加1,000U/kg（250mg/kg）、9,000U/kg（2250mg/kg）α-淀粉酶的试验组日粮至7日龄后,停止饲喂加酶日粮,改饲对照组（不添加酶）的日粮,饲喂3周,分别考察在停喂淀粉酶后的第3、7、14d肉鸡消化器官重量及小肠消化酶活性的变化。结果表明：饲喂淀粉酶对7日龄肉鸡肝脏、胰腺、肌胃、腺胃相对重量和小肠相对长度均无明显影响,但小肠相对重增加了4.2%~47.6%,停饲淀粉酶后第3d（10日龄）和第7d（14日龄）,各试验组肉鸡小肠相对重量仍分别高出5.4%~34.0%（P<0.05）和13.8%~20.4%,第14d（21日龄）有所恢复;7日龄肉鸡小肠内容物淀粉酶和总蛋白酶活性活性亦未受影响,但在停喂淀粉酶后7d（14日龄）,试验组小肠内容物中的淀粉酶活性均显著下降（P<0.05）。提示外源淀粉酶对内源酶活性的影响有后续效应。 相似文献
5.
以五周龄昆白系小鼠为试验动物,在饲喂小鼠普通日粮基础上每天灌喂一定量铅（Pb）、维生素C（Vc）、Vc+Pb,Vc用量200mg/kg,Pb四个浓度分别为1.2g/L 、0.4g/L、0.13g/L、0.043g/L,饲喂期三周,检测小鼠肝脏中铅与丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)的活性变化。结果表明：铅在小鼠肝脏中大量蓄集,并引起MDA含量增加;加Pb组与空白对照组相比SOD酶活性降低,且随着铅浓度的降低而升高;CAT活性测定显示： Pb1、Pb2组与空白对照组相比差异显著（p<0.05）,Pb3组差异极显著(p<0.01),除Vc+Pb4组与Pb4组相比差异不显著(P>0.05)外,其他Vc+Pb组与其对应加Pb组比较,均差异显著（p<0.05）;POD活性测定表明：Vc组与空白组相比差异极显著(p<0.01),Pb1、Pb3组与空白组比较差异显著（p<0.05）,Pb2、Pb4与空白组比较差异极显著(p<0.01),除Vc+Pb1组与Pb1组差异不显著(P>0.05),其他Vc加Pb组与单独加Pb组相比差异极显著(p<0.01)。因此,Pb可增强小鼠肝脏脂质过氧化,而Vc可减轻铅引起的过氧化损伤 相似文献
6.
溴氰菊酯人工抗原合成及鉴定 总被引：2，自引：0，他引：2
以二溴菊酸和3-[(4-硝基苯)氧基]苯甲醛为原料经4步反应合成了溴氰菊酯半抗原1-氰基[3-(4-氨基苯)苯基]甲基-2,2-二甲基3-(2,2-二溴乙烯基)环丙烷羧酸酯;用重氮化法将溴氰菊酯半抗原分别与牛血清白蛋白（BSA）和卵清白蛋白（OVA）相偶联制备免疫抗原和包被抗原,紫外吸收法估算偶联比分别为11:1和8:1;以BSA偶联物作免疫抗原免疫日本大耳白兔制备溴氰菊酯多克隆抗体,间接非竞争ELISA法测定2个抗血清效价分别为100000和80000,间接竞争ELISA法初步测定农药浓度50μg/ml时抑制率达到80%以上,为研究建立溴氰菊酯农残免疫快速测定方法奠定了基础。 相似文献
7.
采用覆盖20条染色体的68对多态性引物在120个大豆品种（系）[包括67个中国大豆品种（系）和53个引自美国的品种（系）]进行遗传多样性及亲缘关系分析。结果表明,120份大豆材料具有丰富的遗传多样性（Na=1.9852,Ne=1.4343,H=0.2776,I=0.4361）;中国大豆比美国引进大豆遗传多样性水平高;7个群体遗传多样性由高到低为,黄淮海地区组>引种资源组>热带亚热带地区组>长江流域地区组>北方春大豆组>西南山区组>鲜食大豆组;7个群体间总遗传多样度（Ht）为0.2807,群体内遗传多样度（Hs）为0.2361,群体间遗传分化系数（Gst）为0.1589,基因流（Nm）为2.6468,群体间存在中低度遗传分化,遗传变异主要存在于群体内部,群体间Nm较丰富;以群体和单个品种（系）为单位进行UPGMA聚类的结果基本一致,部分材料相互交错。大豆种质遗传多样性与地理来源具有一定相关性的同时,不同地区间存在丰富的基因交流;黄淮海地区、西南山区、热带亚热带地区和长江流域地区的大豆材料遗传距离较近;引进大豆、北方春大豆和鲜食大豆与其他群体遗传距离较远,可作为拓宽中国栽培大豆遗传背景的物质遗传基础。 相似文献
8.
为了研究脂多糖与β葡聚糖的协同免疫促进效果,本论文重组表达了迟钝爱德华氏菌的一个高效亚单位疫苗候选蛋白甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）,利用纯化的重组GAPDH（rGAPDH）蛋白单独或混合脂多糖和β葡聚糖免疫牙鲆,免疫后通过检测牙鲆抗体水平、免疫相关基因表达及免疫保护力三方面指标变化对脂多糖和酵母β葡聚糖的免疫促进效果进行研究。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测结果显示,脂多糖和β葡聚糖与rGAPDH蛋白共免疫组牙鲆的抗体效价在免疫后第14和30天均显著高于单独免疫rGAPDH蛋白的牙鲆,在第30天时其效价为211.76;荧光定量PCR检测结果显示,相比PBS对照组,牙鲆在注射免疫后脾脏组织中IL-1β、IL-6、MHC-IIα、IgM、TCRα及C型溶菌酶6种免疫相关基因表达量均出现不同程度的上调,而其中脂多糖和β葡聚糖与rGAPDH蛋白共免疫组牙鲆在免疫后多个时间点其基因表达水平均显著高于单独免疫rGAPDH蛋白的牙鲆;免疫保护性实验结果同样显示,脂多糖和β葡聚糖与rGAPDH蛋白共免疫组牙鲆在攻毒后累计死亡率显著低于对照组和单独免疫rGAPDH蛋白组,直至第14天累计死亡率为30%,相对免疫保护率为68%。研究表明,脂多糖和β葡聚糖作为疫苗免疫刺激剂使用可显著增强牙鲆的免疫应答水平,提升亚单位疫苗的免疫效果。 相似文献
9.
玉屏风散颉颃镉致鸡肝脏氧化损伤作用的研究 总被引：1，自引：1，他引：0
为了研究玉屏风散对镉对鸡肝脏氧化损伤的颉颃作用。将150只30日AA公鸡随机分为3组：对照组（A：饲喂基础日粮）、加镉组（B：组饲喂基础日粮+CdCl2 150 mg/kg）和玉屏风散加镉组（C：饲喂基础日粮+ CdCl2 150 mg/kg的基础上每天灌服玉屏风散1 mL）,所有动物自由采食,染毒后15,30,45,60天时分别从以上3组中取10只鸡剖杀,用于肝脏组织相关指标的检测。结果表明：随着镉作用时间的延长,试验组的GSH-Px、SOD的活性降低,MDA生成量增加;试验组与对照组差异显著(P<0.05)或极显著(P <0.01),C组各项指标数据介于A组和B组之间。因此,玉屏风散可减轻镉中毒对机体抗氧化功能的影响,对镉中毒有颉颃作用。 相似文献
10.
为探明甘露寡糖对三黄鸡免疫功能和盲肠菌群的影响及替代抗生素的可行性,选用1日龄三黄鸡216只,随机分为 6 组, 每组3 个重复, 每重复12 只鸡, 分别饲喂6 种不同日粮, 自由采食和饮水,第Ⅰ 组为空白对照组, 第Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ,Ⅵ组为试验组, 在基础日粮的基础上分别添加600 mg/kg林可霉素, 1 g/kg甘露寡糖,2 g/kg甘露寡糖,4 g/kg甘露寡糖和8 g/kg甘露寡糖。结果表明：（1）添加4 g/kg甘露寡糖,可显著提高胸腺指数(P<0.05),有提高脾脏和法氏囊指数的趋势,但差异不显著(P>0.05);（2）饲料中添加600 mg/kg林可霉素或4 g/kg甘露寡糖,均能显著提高血清溶菌酶活性(P<0.05),而8 g/kg甘露寡糖组血清新城疫抗体滴度均显著高于对照组和林可霉素组(P<0.05);（3）添加甘露寡糖,可显著提高盲肠乳酸杆菌的数量,降低沙门氏菌的数量(P<0.05),大肠杆菌的数量有增加的趋势但差异不明显(P>0.05);（4）甘露寡糖可替代林可霉素在三黄鸡养殖中的应用。 相似文献
11.
为了检测肉种鸡开产前免疫两不同的鸡新城疫-传染性支气管炎-传染性法氏囊病-病毒性关节炎四联灭活疫苗（ND-IB-IBD-Reo四联苗）后的抗体水平差异,在鸡群20周龄分别用A、B疫苗免疫,免疫后28 d和56 d 用HI检测ND抗体水平和ELISA检测IB、IBD和Reo的抗体水平。结果显示,免疫后28 d和56 d,B疫苗的IBD和REO抗体效价效价显著高于A疫苗（P﹤0.05）,ND和IB的抗体效价虽较A疫苗高但差异不显著（P﹥0.05）。结果表明,B疫苗的免疫抗体水平优于A疫苗,该研究为肉种鸡ND-IB-IBD-Reo四联灭活疫苗的筛选和合理免疫程序的制定提供依据。 相似文献
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二氟沙星单克隆抗体的研制及其免疫学特性的鉴定 总被引：3，自引：0，他引：3
采用改进的碳二亚胺法,将半抗原二氟沙星(DIF)与载体牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联,,制备得到二氟沙星全抗原DIF-BSA和DIF-OVA。采用紫外（UV）,凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定; 用BSA-DIF免疫 BALB/C小鼠, 间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠;应用杂交瘤技术制备二氟沙星单克隆抗体（DIFmAb）,并对其效价、亲和力和特异性等进行鉴定。结果表明,BSA与DIF偶联成功,分子结合比为1：4.7,筛选出1H10、2F12、4D8共3株敏感特异的杂交瘤细胞, 间接ELISA效价细胞培养上清分别为1:5.12×102、1：3.2×101、1：2.56×102,腹水效价分别为1：2.56×105、1：1.28×105、1：6.4×104。同种亚型分别为IgG1、IgG1、IgG2a,亲和常数（Ka）分别为2.94×1010 L/moL、1.72×1010 L/moL和1.35×1010 L/moL.亲和力最高的1H10对DIF的IC50为1.64ng/ml,单抗与其他氟喹诺酮类药物和磺胺类药物无交叉反应。通过试验获得高效价、敏感、特异的mAb,适用于动物性食品中DIF的残留检测的免疫学试验 相似文献
14.
旨在体外表达淀粉磷酸化酶,免疫小鼠制备单克隆抗体。用PCR扩增木薯淀粉磷酸化酶基因,将其克隆到原核表达载体(pET28a)中,经E.coli表达纯化淀粉磷酸化酶。用纯化的淀粉磷酸化酶蛋白免疫Babl/c小鼠,间接ELISA测定小鼠血清效价,取小鼠脾细胞与小鼠SP2/0细胞融合,制备能产生抗淀粉磷酸化酶单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并检测其亚型和抗体稳定性。重组质粒在E.coli中能高效表达淀粉磷酸化酶,免疫小鼠后取效价高的3#小鼠脾脏细胞和SP2/0细胞融合,共获得15株抗体效价均达到10~5以上,能稳定分泌抗淀粉磷酸化酶抗体的细胞株,与钙调蛋白、牛血清白蛋白无交叉反应,抗体亚型鉴定其中13株为IgG型抗体,其中2株抗体性能非常稳定。本实验制备的淀粉磷酸化酶单克隆抗体效价高、特异性强、稳定性好,为后续木薯中淀粉磷酸化酶研究奠定基础。 相似文献
15.
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为了研究PEDV的新型亚单位疫苗,提高PEDV亚单位疫苗的免疫原性,选取免疫增强剂CVC1302、CVC1303与国家兽用生物制品工程技术研究中心构建的可溶性表达PEDV S蛋白核心表位COE的重组蛋白(p QZCOE-LTB)混合乳化制成疫苗,免疫4周龄的ICR小鼠,首免14 d后加免1次,随后采集首免14(加强免疫前),21,28,55 d的小鼠血清,分别用琼扩试验的方法定性检测血清IgG抗体以及用ELISA试剂盒定量检测小鼠血清IgG抗体滴度动态变化,肠组织sIgA抗体滴度。结果表明,重组蛋白与CVC1303配合使用免疫小鼠能产生显著高于灭活苗(CV777)阳性对照组的IgG和sIgA抗体水平,说明CVC1303免疫增强剂能有效增强该重组蛋白的免疫原性,提高亚单位疫苗免疫效果。 相似文献
17.
猪生长激素ELISA检测体系的建立 总被引：1，自引：1，他引：0
本文分别以自制猪生长激素单克隆抗体及兔抗猪生长激素IgG就影响检测elisa(酶联免疫吸附法)体系因素进行探讨,建立了检测猪生长激素的elisa方法。猪生长激素单克隆抗体的最适操作参考值为：单抗最佳包被浓度为3μg/mL,包被条件为4℃过夜,5%羊血清封闭1h,兔抗猪生长激素IgG 最佳工作浓度为2μg/mL。 相似文献
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氯霉素多克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定 总被引：3，自引：0，他引：3
将氯霉素（CAP）进行化学修饰引入羧基活性基团,合成具有半抗原结构特征的氯霉素半琥珀酸酯（CAP-HS）;采用混合酸酐（MA）法将CAP-HS与牛血清白蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）偶联合成人工免疫原BSA-CAP-HS和包被原OVA-CAP-HS,用红外（IR）、紫外（UV）、凝胶电泳（SDS-PAGE）进行鉴定;用BSA-CAP-HS免疫新西兰白兔和SPF鸡制备多克隆抗体（pAb）,间接ELISA测定其效价,阻断ELISA鉴定其敏感性,琼脂双扩散试验、WestGold膜杂交试验和交叉反应试验鉴定其特异性。结果表明,BSA-CAP-HS偶联成功,其分子结合比为15.6∶1,获得了高价、敏感、特异的CAP pAb,为CAP残留免疫学检测方法的建立奠定了基础。 相似文献
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目的 用B.melitensis 16M提纯的LPS和O链抗原作为检测抗原，研制出针对B.melitensis 16M的单克隆抗体（McAb），将其标记胶体金，建立一种诊断布病的胶体金免疫层析方法。方法 B.melitensis 16M全菌免疫Balb/C小鼠，采用杂交瘤细胞技术制备McAb，测定免疫球蛋白亚类及亲和力。用HiTrap Protein G HP亲和层析纯化抗体并用胶体金标记，建立胶体金免疫层析方法。选择最佳反应模式组装成试纸条，对其特异性、敏感性、稳定性、阳性病料试验。结果 筛选出能稳定分泌抗B.melitensis 16M的种特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株2D10、3C6、1E10，单抗亚类分别为IgG2a、IgG1，亲和常数（k）介于1×10-8~2.6×10-10。根据配对实验，以3C6为最佳包被抗体，2D10为最佳金标抗体。抗体IgG标记浓度为30μg/ml时，检测效果最佳。同时，与B.melitensis 16M多抗IgG作为包被抗体、2D10为金标抗体的检测体系对比，两种包被方法组装的试纸条最低检出量为5.0×103CFU/ml，且不与其它菌发生交叉反应，保持期≥100d。以荧光定量PCR为参照，试纸条检测80份阳性病料，检检出率为100%。结论 建立的胶体金免疫层析方法检测B.melitensis 16M快速、简便、可靠，有望开发成为布病快速诊断试剂盒。 相似文献
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β-激动剂多组分残留的酶免疫分析方法 总被引：2，自引：0，他引：2
制备并筛选能和多种β-激动剂反应的簇特异性抗体,建立能同时检测多种药物的酶免疫分析方法,为研制多组分残留检测试剂盒奠定基础。选取沙丁胺醇、克伦特罗和多巴胺3种代表性β-受体激动剂,分别与钥孔血蓝蛋白（KLH）偶联作为免疫抗原,与牛血清白蛋白（BSA）偶联作为检测抗原,免疫家兔获取抗血清,ELISA检测抗血清交叉反应率,筛选交叉反应性最大的抗体作为簇特异性抗体,用于建立ELISA方法并制作标准曲线。经测定获得的3种抗血清,其中的抗沙丁胺醇抗血清除对沙丁胺醇具有100%的反应之外,还对克伦特罗具有128%的交叉反应性,具有部分簇特异性。用沙丁胺醇抗血清建立了同时适用于沙丁胺醇和克伦特罗的ELISA分析方法,为多组分残留检测试剂盒的研制奠定了基础。 相似文献