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北极狐出血性肠炎病原分离鉴定 总被引：1，自引：1，他引：0
从排血便为主要临床特征的濒死期育成北极狐肠内容物中分离到 ５ 株革兰氏阳性大杆菌，各株菌的 ３７℃ ８ 小时厌气肉肝汤纯培养上清液 ０２ｍ ｌ小鼠尾静脉注射，１２ 小时内 １００％ 死亡。生理生化鉴定证实分离菌为产气荚膜杆菌（ Ｂ．ａｅｒｏｇｅｎｅｓｃａｐｓｕｌａｔｕｓ）。血清定型结果表明，分离的 ５ 株菌均为 Ａ 型产气荚膜杆菌。以饲喂狐的变质鱼浸出液静脉注射小鼠引起死亡，并从该浸出液中也分离到 Ａ 型魏氏梭菌，证实该病的发生是饲料传播。 相似文献
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非洲狮产气荚膜梭菌病的病原检测 总被引：1，自引：0，他引：1
北京动物园一头非洲狮突然死亡,死前曾有神经症状,死后立即解剖,主要病变为肺出血,十二指肠出血。从肺和肾组织分离到Ａ型产气荚膜梭菌,用该菌液０．０５ｍｌ腹腔注射小白鼠致死,用该菌的肉肝胃酶消化汤５ｈ培养的上清液０．１ｍｌ静脉注射小白鼠６ｈ死亡。产气膜梭菌除对草食动物有较强致病作用外,对大型猫科动物也有致病性。 相似文献
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为对疑似家兔产气荚膜梭菌病感染死亡的肉兔病例进行病原菌的分离鉴定,并分析其对家兔的致病性,试验采集死亡病例的肠道内容物,划线接种于兔鲜血平板和TSC选择鉴别培养基中,对病原菌进行分离纯化,利用细菌16SrDNA通用引物进行分子鉴定,分析其同源性,构建系统进化发育树,同时,对病原菌进行生化鉴定,并将病原菌腹腔接种30日龄肉兔,分析其致病性。结果表明,从病料中分离纯化到1株革兰氏阳性菌;通过对细菌16S rDNA基因测序分析及生化鉴定确定为产气荚膜梭菌,且在系统进化树中也与其聚为一簇;致病性分析发现,该菌对家兔具有较强的致死性,可使试验组肉兔在攻毒16h后全部死亡。综上所述,本研究成功获得1株具有较强毒性的兔源产气荚膜梭菌,为产气荚膜梭菌致病机制的研究奠定了基础,同时也为疫病诊断和防控提供了理论依据。 相似文献
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无菌采取内蒙古通辽市某羊场病死羊肠道内容物、肝脏和肺脏,进行细菌的分离培养。将从十二指肠内分离到的1株疑似致病菌株进行生化试验、小鼠致病性试验,再将其通过魏氏梭菌多重PCR试验、魏氏梭菌ELISA试验及16S rRNA PCR试验进行鉴定。将PCR产物进行测序并进行了16S rRNA基因的进化树分析。结果显示,经细菌生化试验、多重PCR试验、ELISA试验和16S rRNA试验均证实此分离株为A型产气荚膜梭菌;进化树分析显示该菌与序列号为HQ808749.1(美国)的A型产气荚膜梭菌遗传距离最近。结果表明,该羊病例所分离的致病菌为A型产气荚膜梭菌。 相似文献
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《中国兽医杂志》2016,(5)
通过对死于出血性肠炎的圈养鹿的病原菌进行分离鉴定,为研制产气荚膜梭菌β-毒素单价和多价疫苗奠定基础。采集山西省内不同地区鹿场因出血性肠炎而死亡鹿的病料32例,经病原微生物分离培养、生化试验和血清型鉴定,分离得到C型产气荚膜梭菌,并测定分离菌所产毒素对小鼠的最小致死量。PCR扩增C型产气荚膜梭菌β-毒素基因,构建重组质粒p MD18-T-J28-C,进行酶切鉴定和核苷酸序列分析。结果 32株分离菌中有6株是C型产气荚膜梭菌,占18.7%;其余均为A型,占81.3%。筛选出毒力最强的菌株J28-C,最小致死量(MLD)为5.0×105CFU/m L。PCR扩增和核苷酸序列分析表明,经PCR得到了特异性的β毒素基因片段。表明造成山西省鹿出血性肠炎的病原菌为A型和C型产气荚膜梭菌,以A型为主。 相似文献
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【目的】2023年4月至2023年5月，西藏拉萨市多地出现牦牛严重腹泻、便血甚至死亡的现象。试验旨在确定牦牛腹泻的病原菌并研究其生物学特性，以期为该地区牦牛腹泻病的防治提供参考。【方法】采集新鲜牦牛腹泻粪便样品进行厌氧培养，通过培养特性及染色镜检进行初步鉴定；对可疑阳性菌株进行生化特性、多重PCR毒素基因分型及cpe、netB、cpb2毒素鉴定，并进行cpa、cpb2、16S rRNA基因的遗传进化分析、部分分离株生长曲线测定及动物致病性试验；采用K-B法测定分离株的体外药物敏感性，统计不同分离株的多重耐药结果。【结果】从样品中分离纯化得到8株分离菌，在厌氧培养基中生长旺盛，在TSC培养基、5%脱纤维绵羊血平板、卵黄琼脂培养基上均呈现与产气荚膜梭菌相似的典型菌落，革兰染色为紫色大杆菌，初步判定为产气荚膜梭菌，命名为XZ-1～XZ-8。分离株生化检测结果与产气荚膜梭菌相符；分离株均携带cpa和cpb2基因，为A型产气荚膜梭菌；16S rRNA基因分析结果显示，8株分离株与产气荚膜梭菌参考株的相似性为97.3%～100%,在系统进化树中处于同一分支，而与屎肠球菌、大肠杆菌参考株处于不同分支... 相似文献
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2020年5月,江苏省某养殖场饲养的220只山羊疑似感染产气荚膜梭菌,共死亡25只。为鉴定感染的产气荚膜梭菌复合群类型,采集大肠、小肠内容物以及肠系膜淋巴结、肝、脾、肾等组织病料进行细菌分离鉴定,并对分离菌株进行药敏试验及致病性试验。结果显示：分离菌株为革兰氏阴性短杆菌,经生化试验和16S rRNA试验鉴定为豚鼠气单胞菌;该分离株对多种常用抗菌药物耐药,仅对呋喃唑酮敏感;该菌能造成小鼠发病死亡。此次从临床发病羊病料中分离到致病性豚鼠气单胞菌,在国内较为少见,截至目前未见类似报道,本研究为避免此类疫病的临床误诊以及做好该病防控提供了帮助。 相似文献
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牛羊产气荚膜梭菌多联浓缩苗的免疫效果观察陈兴生海南定安县兽医诊断室海南定安５７１２００１９９２年以来，我县发生了牛猝死症，经济损失巨大，严重影响了畜牧业的发展和农业生产。我们从病死牛中分离到致病性产气荚膜梭菌，用标准阳性血清进行中和试验鉴定为Ｃ和Ｄ型... 相似文献
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测定了制苗菌液中外毒素对小白鼠的最小致死量,并将该制苗菌液按《兽用生物制品规程》（以下简称《规程》）[1]方法制成A型产气荚膜梭菌灭活疫苗,按《规程》方法进行安全和效力检验。结果表明：6批疫苗安全检验全部合格;疫苗保护率与疫苗中类毒素含量呈正相关。 相似文献
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建立一种快速鉴别诊断不同型产气荚膜梭菌的PCR检测方法,为动物产气荚膜梭菌病的快速诊断及流行病学调查提供有效的技术手段。克服传统鉴定方法耗时长、费用高的缺点,提高了检测效率。通过对产气荚膜梭菌α毒素、β毒素、ε毒素和ι毒素基因序列分析,利用Premier5.0软件设计并合成了5对特异性引物,建立了针对5种不同型产气荚膜梭菌的PCR鉴别诊断方法。通过反复试验确定了最佳退火温度为53℃。通过灵敏度试验表明,PCR检测方法最低能检测到的DNA浓度α毒素为308pg/μL,β毒素、ε毒素为30.8pg/μL,ι毒素A为0.122pg/μL,ι毒素B为0.05pg/μL。通过特异性试验表明,本方法具有较高的特异性。同时,通过对本方法检测出的阳性样品16S rRNA序列分析发现,与GenBank中的其他产气荚膜梭菌的16S rRNA序列同源性均在98%以上。表明建立的检测方法灵敏度高、特异性强,可以应用于动物产气荚膜梭菌病的实验室诊断。 相似文献
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建立了多重PCR检测产气荚膜梭菌α、β、ε和ι毒素基因的方法。该方法具有良好的特异性和敏感性,只有产气荚膜梭菌呈现阳性,被检验的其他梭菌以及大肠杆菌、葡萄球菌均为阴性;将肉汤菌液样品10倍系列稀释后进行检测,检测灵敏度达到1.2×104CFU/mL。收集40份牛粪便样品,进行PCR检测,32份样品中成功扩增出589 bp的α毒素基因片段,阳性率为80%。结果显示,建立的多重PCR检测方法可取代血清中和试验,用于产气荚膜梭菌分型,同时表明A型产气荚膜梭菌在当地奶牛场中较为普遍。 相似文献
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By the use of the electrophoretic casein precipitating inhibition test (CPI-test) the serological relationship between proteolytic enzymes produced by different species within the genera Clostridium and Bacillus has been tested. The proteases produced by Clostridium botulinum types A, B, C, D and F cross-reacted with each other. Clostridium botulinum strain 84 was inhibited by antiproteases produced against Clostridium sporogenes, Clostridium botulinum types C and F (protease F I and F II), but not by antiproteases against Clostridium botulinum types B and F (protease II), Clostridium bifermentans and Clostridium perfringens. The protease of the newly described Clostridium botulinum strain 89 (type G) was inhibited by Clostridium sporogenes antiprotease, but not by any of the other antiproteases. It is not possible to differentiate between Clostridium botulinum, Clostridium sporogenes and Clostridium perfringens by use of serological differentiation of their proteolytic enzymes. The protease of Clostridium bifermentans is not serologically related to any of the species tested in this investigation. Proteases produced by different Bacilli were not inhibited by antiproteases from Clostridium botulinum types B, C and F, Clostridium sporogenes, Clostridium bifermentans, and the two strains of Clostridium perfringens tested. This investigation indicates a serological relationship between proteases from different Clostridium species, but not a serological relationship between proteases produced by the Clostridium species and Bacillus species tested. 相似文献
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Tillotson K Traub-Dargatz JL Dickinson CE Ellis RP Morley PS Hyatt DR Magnuson RJ Riddle WT Bolte D Salman MD 《Journal of the American Veterinary Medical Association》2002,220(3):342-348
OBJECTIVE: To determine the percentage of broodmares and foals that shed Clostridium perfringens in their feces and classify the genotypes of those isolates. DESIGN: Prospective cross-sectional study. ANIMALS: 128 broodmares and their foals on 6 equine premises. PROCEDURES: Anaerobic and aerobic bacteriologic cultures were performed on feces collected 3 times from broodmares and foals. All isolates of C. perfringens were genotyped. RESULTS: Clostridium perfringens was isolated from the feces of 90% of 3-day-old foals and 64% of foals at 8 to 12 hours of age. A lower percentage of broodmares and 1- to 2-month-old foals shed C. perfringens in their feces, compared with neonatal foals. Among samples with positive results, C. perfringens type A was the most common genotype identified (85%); C. perfringens type A with the beta2 toxin gene was identified in 12% of samples, C. perfringens type A with the enterotoxin gene was identified in 2.1% of samples, and C. perfringens type C was identified in < 1% of samples. CONCLUSIONS AND CLINICAL RELEVANCE: Clostridium perfringens was identified from the feces of all but 6 foals by 3 days of age and is likely part of the normal microflora of neonatal foals. Most isolates from broodmares and foals are C. perfringens type A; thus, the clinical relevance of culture results alone is questionable. Clostridium perfringens type C, which has been associated with neonatal enterocolitis, is rarely found in the feces of horses. 相似文献
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在兔源肠致病性大肠杆菌WF-03-B3菌株和兔源A型魏氏梭菌XT-04-X5菌株原生质体融合的研究中,为了对融合子进行选择鉴定,在呼吸缺陷选择的基础上WF-03-B3菌株02r(氧气抗性);XT-04-X5菌株02s(氧气敏感性),再应用定性和定量药物敏感性试验,对两种菌原生质体融合的耐药性遗传标记进行了筛选.结果表明,WF-03-B3菌株对丁胺卡那霉素AKNs(丁胺卡那霉素敏感);XT-04-X5菌株对丁胺卡那霉素AKNr(丁胺卡那霉素抗性),在此基础上,测定了丁胺卡那霉素在选择培养基中的适用浓度。筛选出兔源肠致病性大肠杆菌WF-03-B3菌株的遗传标记为(AKNs,02r)和兔源A型魏氏梭菌XT-04-X5菌株的遗传标记为(AKNr,02s)。 相似文献
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本研究旨在获得产气荚膜梭菌α毒素（CPA） C末端（第247－370位氨基酸,CPAC）三拷贝串联融合蛋白,并评价其免疫原性。对已知的A型产气荚膜梭菌CPAC编码基因（GenBank登录号：AY823400.1）进行优化设计,以同向串连的方式串联成三拷贝基因（GCPAC3）,片段之间用柔性氨基酸linker （GGGS）连接,经人工合成后克隆至原核表达载体pET-30a （＋）中进行表达与纯化,获得CPAC的三拷贝重组蛋白（rCPAC3）。利用Western blotting方法检测rCPAC3与A型产气荚膜梭菌毒素抗血清的反应性。将rCPAC3与Montanide ISA 201佐剂混合乳化制备疫苗,免疫4只健康家兔,检测一免及二免后兔血清的中和抗体效价。在二免21 d后,对家兔经耳缘静脉注射1个家兔最低致死剂量（MLD）的A型产气荚膜梭菌毒素,检测rCPAC3对家兔的免疫保护效果。结果显示,rCPAC3主要以包涵体的形式表达,且能与A型产气荚膜梭菌毒素抗血清反应;每毫升的一免抗血清可中和30~50个、二免抗血清可中和70~100个小鼠MLD的A型产气荚膜梭菌毒素。采用1个家兔MLD的A型产气荚膜梭菌毒素攻毒后,对照组家兔100%（4/4）死亡,免疫组得到了100%（4/4）的保护。以上结果说明,rCPAC3具有良好的免疫原性,为A型产气荚膜梭菌病基因工程疫苗的研制提供了重要的试验数据。 相似文献
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几种培养基对A型产气荚膜杆菌产毒效果的比较 总被引：1，自引：0，他引：1
本文以四种培养基，对同一A型产气荚膜杆菌分离株G3的生长曲线和培养液pH值变化进行了测定，并比较了四种培养基的产毒效果。结果表明：A型产气荚膜杆菌在四种培养基上的生长内线基本一致，但pH值变化有差异，其中以疱肉培养液的pH值变化幅度最小，且其毒素产量最多，活性最高。由此可见，疱肉培养基可作为A型产气荚膜杆菌的产毒培养基。 相似文献
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产气荚膜梭菌肠毒素的分子生物学研究进展 总被引：1，自引：0，他引：1
产气英膜梭菌(Clostridium perfringens)是一种重要的人兽共患病的病原体,它是一类革兰氏阳性产芽孢的厌氧梭菌,可引起人的食物中毒和肠毒素相关腹泻.近年来,研究人员发现由产气英膜梭菌导致腹泻的主要原因与该菌在芽孢形成过程中产生的一种肠毒素有关.文章重点针对产气英膜梭菌肠毒素的生物学特性和致病机制等方面的研究做一综述. 相似文献