利用离子交换层析方法分离与纯化口蹄疫病毒抗原     

马全英  杜平  祝秀梅  刘萍  宋玉霞  董金杰  王超英  张云德 《安徽农业科学》2016,44(22):138-139

[目的]利用离子交换层析方法分离与纯化口蹄疫病毒抗原。[方法]利用阴离子交换树脂制备高纯度的FMDV抗原,通过对样品及缓冲液pH、流速、缓冲液的盐浓度、样品上样体积等条件的摸索,确定最佳的FMDV抗原洗脱条件。[结果]当缓冲液pH为8.0、流速1.2 m L/min、盐浓度450 mmol/L、上样体积1.5 m L时,FMDV抗原的纯化效果最佳。[结论]该研究结果可为离子交换层析在FMDV抗原的分离与纯化提供依据。  相似文献   

GEM技术浓缩纯化O型口蹄疫病毒灭活抗原方法的建立     

汪浩  乔绪稳  陈瑾  李图帅  张元鹏  侯继波  郑其升  孙卫东 《南京农业大学学报》2018,(1)

[目的]验证利用革兰氏阳性增强基质颗粒(GEM)浓缩纯化口蹄疫病毒(FMDV)抗原的可行性。[方法]将含有3个自溶素基序的锚钩蛋白基因(PA)与针对O型口蹄疫病毒特异性纳米抗体基因(VHH)串联克隆入原核表达载体p ET-32a(+)中,构建原核表达载体p ET-VPA,将其转化大肠杆菌宿主菌BL21(DE3),表达获得融合重组蛋白VPA。先将GEM颗粒与重组蛋白VPA在37℃孵育30 min,离心,取沉淀用适量的FMDV抗原液重悬,再经一步低速离心,获得沉淀即为浓缩纯化的口蹄疫病毒抗原。利用SDS-PAGE、Western-blot、蛋白含量测定及146S测定等方法对浓缩纯化方法的可行性进行鉴定,并通过动物免疫试验初步验证浓缩纯化后抗原的免疫原性。[结果]VPA融合蛋白能够在大肠杆菌中部分可溶性表达。作为接头蛋白,VPA既能与GEM颗粒结合,又能与FMDV抗原结合。SDS-PAGE与Western-blot结果表明:FMDV通过GEM法得到有效纯化;146S测定结果表明FMDV的回收效率达到99%;总蛋白含量测定结果显示口蹄疫抗原杂蛋白去除率达到90%;动物免疫试验结果显示GEM技术纯化后的FMDV具有良好的免疫原性。[结论]利用GEM技术浓缩纯化口蹄疫病毒抗原是可行的。  相似文献   

高致病性蓝耳病纯化灭活疫苗的研制(英文)     

唐艳林  ;宋睿  ;李静姬  ;苗丽娟  ;何玉友 《农业科学与技术》2014,(6):937-941

[目的]改进和提高现行高致病性蓝耳病(HR-PRRS)灭活疫苗的纯度和效价。[方法]该研究将经Marc-145细胞培养收获的HP-PRRS病毒原液超滤浓缩50倍,灭活后用Sepharose 4 Fast Flow分子筛柱层析,收集完整的病毒粒子,加油佐剂制成纯化HP-PRRS灭活疫苗。[结果]通过纯化可将HP-PRRS病毒与非病毒蛋白分开,纯化后测定病毒蛋白含量收率为76.7%~82.4%,杂蛋白含量去除率均为96%以上,且纯化疫苗的攻毒保护率达到4/5以上,血清抗体检测阳转率达86%以上,均高于未纯化灭活疫苗,差异显著。[结论]HR-PRRS病毒液经浓缩纯化制成疫苗后,增强了免疫效果,并可有效地去除杂蛋白,避免了疫苗的过敏反应和应激反应。  相似文献   

大孔树脂对樟子松松塔多酚的纯化工艺研究     

刘荣  栾淑莹  方  妍等 《安徽农业科学》2014,(23):7869-7872,7921

[目的]优化樟子松松塔多酚纯化工艺,提高松多酚利用率。[方法]以吸附解析率为衡量指标,确定纯化樟子松松塔多酚的最佳树脂;以多酚回收率和纯度为衡量指标,单因素试验研究纯化过程中各因素对纯化效果的影响,并且利用响应面优化樟子松松塔多酚的纯化工艺。[结果]樟子松松塔多酚的初步纯化最适条件为上样液浓度0.2 mg/ml,上样液体积2.10 ml,样液pH 7,径高比1∶25.8,洗脱乙醇浓度57.75%。在此工艺参数下,樟子松松塔多酚的回收率可达68.78%。[结论]经D4020大孔树脂纯化,樟子松松塔多酚纯度由21.6%升至59.4%,说明D4020大孔树脂适宜用于初步纯化樟子松松塔多酚。  相似文献   

基于大孔吸附树脂富集法的肿节风粗黄酮纯化研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

周斌  李雁霞  李忠贵  曾宪仪  朱才庆  余华  魏东芝 《安徽农业科学》2010,38(17):9000-9001

[目的]筛选适用于肿节风（Sarcandra glabra）粗黄酮类物质纯化的大孔吸附树脂。[方法]比较12种大孔吸附树脂对肿节风总黄酮的静态吸附率和解吸率,用不同梯度浓度的乙醇洗脱HPD-600大孔吸附树脂,并计算总黄酮回收率和纯度。[结果]HPD-600大孔吸附树脂的回收率为86.56%,纯度可达68.7%。[结论]HPD-600树脂综合性能良好,适用于肿节风粗黄酮类物质的分离纯化。  相似文献   

费菜总黄酮分离纯化方法研究     

薛志忠  杨雅华  张国新  张薇 《安徽农业科学》2017,45(18)

[目的]开发高纯度费菜总黄酮的分离纯化工艺。[方法]以大孔树脂为载体,对上样量及层析条件进行优化,再进一步采用结晶的方法进行纯化。[结果]选用聚合物纳米微球PS RPC-300作为最佳层析填料,洗脱速度为5 m L/min,洗脱剂为70%乙醇,上样量为5.0 g/kg填料,结晶溶剂为丙酮;在此优化条件下所得产品的纯度为95.1%。[结论]此分离纯化方法简便可靠,分离效果好。  相似文献   

大孔树脂对板蓝根中表告依春的纯化工艺研究     

熊清平  张强华  徐燕萍  石莹莹  张丹雁 《安徽农业科学》2011,39(30):18542-18544,18568

[目的]优选板蓝根中表告依春的最佳纯化工艺。[方法]以吸附率和解吸率为指标,利用静态吸附试验对6种大孔树脂进行筛选,并通过静态吸附和动态吸附的单因素影响试验,优选树脂的最佳分离纯化条件。[结果]ADS-7大孔树脂的分离纯化效果最好,其最佳纯化条件为：样品浓度为8.00 mg/ml,温度为45℃,pH值为9.0,洗脱液为浓度40%的乙醇溶液;动态吸附流速为1.5 BV/h,动态洗脱流速为2.0 BV/h,洗脱液用量为4.0 BV。[结论]该方法简便、可靠,可用于板蓝根中表告依春的纯化。  相似文献   

荔枝皮多酚纯化工艺的优化研究     

周秋艳  唐方华  蒋旭红  郑志鹏  谢小燕 《安徽农业科学》2019,47(22)

[目的]以荔枝皮为原料,优化荔枝皮多酚的纯化工艺,提高荔枝多酚资源利用率。[方法]以多酚纯度及收率为衡量指标,通过对比7种大孔树脂的静态吸附与解吸,确定纯化荔枝皮多酚的最佳树脂;通过大孔树脂动态吸附与洗脱,考察吸附量、洗脱溶剂、洗脱溶剂用量、洗脱速度等因素,确定荔枝皮多酚纯化的最佳工艺。[结果]筛选出DM21大孔树脂作为最佳纯化材料,DM21纯化荔枝皮多酚的最佳工艺如下:吸附量93.4 mg/mL、洗脱溶剂为90%乙醇、洗脱溶剂用量1.5 BV、洗脱速度1.5 BV/h。在此最优条件下,荔枝皮多酚平均纯度为32.27%,平均转化率为69.03%。[结论]大孔树脂DM21纯化荔枝皮多酚效果良好,值得推广应用。  相似文献   

大孔吸附树脂纯化蒺藜总皂苷的工艺研究     

杨帆  朱才庭  程丹  周斌 《安徽农业科学》2011,39(26):15939-15940

[目的]通过对10种大孔吸附树脂筛选,寻求适用于纯化蒺藜总皂苷类成分的大孔吸附树脂。[方法]比较不同种大孔吸附树脂对蒺藜总皂苷的静态吸附率和解吸率;用不同浓度的乙醇进行洗脱并计算总皂苷回收率和纯度。[结果]HPD-300大孔吸附树脂的回收率为87%,纯度可以达到68%。[结论]HPD-300树脂综合性能最好,适宜于蒺藜总皂苷的分离纯化。  相似文献   

大孔树脂AB-8纯化麦冬多糖工艺的研究     

毛讯 《安徽农业科学》2010,38(14):7308-7308,7338

[目的]研究大孔树脂纯化分离麦冬多糖的优化工艺条件。[方法]比较了不同pH值、流速对麦冬多糖的纯化效果。[结果]确定大孔树脂纯化麦冬多糖的层析条件为：上柱溶液pH值为8,洗脱溶液pH值为8,流速为1.0ml/min,在此条件下麦冬多糖纯度可达到81.0%,回收率71.2%。[结论]该优化工艺条件可以作为麦冬多糖的纯化方式进行推广。  相似文献   

FPA 98型树脂对肝素钠的吸附特性研究     

刘生峰  刘毅  杨俊  肖进文  李应国  聂福平  王昱  谭科  唐伏伦 《安徽农业科学》2013,41(16):7190-7191,7196

[目的]筛选适宜的离子交换树脂,并优化提取工艺条件。[方法]通过比较4种阴离子交换树脂对肝素钠的吸附效果,研究吸附时间、温度、溶液pH、盐浓度对FPA 98型树脂对肝素钠的吸附率的影响。[结果]FPA 98型大孔树脂对肝素钠的吸附效率最高。在吸附温度60℃、pH为8.8、盐浓度3%的条件下吸附7.0 h,FPA 98树脂对肝素钠的吸附率达92%。[结论]FPA 98型树脂对肝素钠的吸附特性研究为肝素钠的生产提供了参考。  相似文献   

香菇废菌棒多糖树脂脱色工艺研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

肖建中  刘青娥  陈海燕  钟仙龙 《安徽农业科学》2013,41(8):3647-3649

[目的]利用大孔树脂对香菇废菌棒粗多糖进行脱色。[方法]以香菇废菌棒为材料,以脱色率和多糖损耗率为考察指标,比较6种大孔树脂在香菇废菌棒脱色方面的性能,并选择脱色效果最佳的树脂进行单因素试验。[结果]研究表明,717型阴离子树脂对香菇废菌棒的脱色效果最佳,其最佳的脱色工艺为:717型树脂用量6%,脱色时间3 h,pH 3,脱色温度40℃,在此条件下,香菇废菌棒的脱色率为82.07%,多糖损耗率为12.63%。[结论]研究可为香菇废菌棒多糖的理论研究及工业化提取中的脱色操作提供理论依据。  相似文献   

大孔树脂纯化青钱柳多糖的研究   总被引：3，自引：0，他引：3       下载免费PDF全文

陈木森  上官新晨  徐睿庸 《西北农业学报》2007,16(4):275-278

研究了8种树脂对青钱柳多糖的静态吸附性能，筛选出一种吸附较好的树脂，并利用柱层析进行青钱柳多糖的纯化研究。结果表明：D301R树脂对青钱柳多糖吸附量最大；D301R树脂在吸附液30℃，pH为7，浓度为4mg／mL，吸附流度为1．5mL／min时吸附较强；用0．4mol／L氯化钠洗脱效果最好，洗脱率可达到82．12％。  相似文献   

大孔吸附树脂分离纯化桂花总黄酮工艺研究   总被引：2，自引：1，他引：1  

郁建生  罗显华 《安徽农业科学》2012,40(2):748-751

[目的]研究大孔吸附树脂分离纯化桂花总黄酮的工艺条件。[方法]以贵州产桂花为原料,以桂花总黄酮吸附量及回收率等为考察指标,选用AB-8型大孔吸附树脂对桂花总黄酮进行分离纯化,分别采用静态试验和动态试验等考察AB-8型大孔树脂对桂花总黄酮的分离纯化最佳工艺条件及效果。[结果]pH值、洗脱剂、温度、上柱液浓度、径高比、流速、总黄酮与树脂质量比等工艺条件对桂花总黄酮的吸附洗脱量和回收率等影响很大。AB-8型大孔树脂分离纯化桂花总黄酮最佳工艺条件为上柱液pH值4～5;洗脱剂为浓度70%乙醇,料液比为1∶4(g/ml),上柱总黄酮质量与树脂质量比为1∶9.4,上柱液总黄酮浓度为17.86 mg/ml,流速为2～3ml/min;冲洗杂质用水体积2～3 BV,流速为3～4 ml/min;径高比为1.5∶21.6;温度升高,吸附量下降但洗脱率加大。[结论]优选出了大孔吸附树脂分离纯化桂花总黄酮工艺条件,为桂花总黄酮的工业化生产提供试验依据。  相似文献   

大孔吸附树脂富集·纯化粟米草总皂苷工艺研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘可越  刘海军 《安徽农业科学》2009,37(17):7981-7982

[目的]研究大孔吸附树脂富集、纯化粟米草总皂苷的工艺。[方法]利用大孔吸附树脂技术,通过对4种不同型号（AB-8、D101、HPD100、HPD600）的树脂进行选择,采用静态吸附方法确定适合的树脂型号;采用动态吸附方法,以总皂苷的得率为指标,考察其纯化富集的工艺条件。[结果]4种树脂型号中,D101型大孔吸附树脂对粟米草总皂苷具有良好的纯化富集作用,对粟米草总皂苷的洗脱率达80．9％,其工艺条件为：洗脱溶剂用体积分数为60％的乙醇,料液质量浓度为0．5g/ml,洗脱速率为2BV／h,树脂药材质量比2：1。[结论]用D101型大孔吸附树脂富集和纯化粟米草总皂苷的工艺具有吸附量较大、洗脱率较高、树脂再生简便等优点,在粟米草皂苷的富集纯化和生产中具有推广应用价值。  相似文献   

大孔树脂对木瓜鞣质的吸附及解吸附性能研究     

杨艳红  鲁秀敏  余瑛 《安徽农业科学》2011,39(8):4509-4510,4681

[目的]筛选出一种大孔树脂,并研究其对皱皮木瓜鞣质的吸附和解吸附性能,从而确定大孔树脂分离纯化皱皮木瓜鞣质的最优工艺条件。[方法]通过静态吸附试验从5种大孔树脂中筛选最佳树脂,并通过单因素和正交试验确定该树脂在静态和动态试验中对皱皮木瓜鞣质的最优吸附和解吸附条件。[结果]HPD-100树脂对木瓜鞣质的吸附量最大,其吸附最佳条件为：洗脱液pH值5.0,静态吸附4 h;动态吸附流速为2.0 BV/h,吸附体积达到6.0 BV时为吸附终点,最优条件下的吸附率为87.90%。静态解吸附最佳条件：洗脱液pH值为6.0,洗脱时间为6 h,洗脱乙醇浓度为75%;动态解吸附流速为1.0 BV/h,解吸附体积达到1.6 BV时为解吸附终点,最佳条件下的解吸附率为62.40%。[结论]HPD-100大孔吸附树脂对木瓜鞣质具有良好的富集作用,适于皱皮木瓜鞣质的分离纯化。  相似文献   

D-101-1大孔树脂吸附纯化杜仲总黄酮研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

潘莹 《安徽农业科学》2010,38(15):7860-7861

[目的]筛选D-101-1大孔树脂吸附纯化杜仲总黄酮的最佳工艺。[方法]在80℃条件下,用70%乙醇（料液比为1∶10）回流提取2次,每次2h,以杜仲总黄酮的纯度和得率为考察指标,对D-101-1净品型大孔树脂吸附纯化杜仲总黄酮的工艺进行了筛选。[结果]洗脱溶剂为70%乙醇时,杜仲总黄酮的分离纯化效果最好,杜仲总黄酮的纯度为54.43%,得率为2.61%。[结论]该方法操作简便,树脂再生容易,方法可取。  相似文献   

活性炭与大孔树脂对美洲大蠊脱脂膏的脱色效果比较(英文)     

李洪文  陈俊雅  刘光明 《农业科学与技术》2012,(8):1637-1640

[目的]探讨活性炭及大孔树脂两种脱色工艺对美洲大蠊脱脂膏的脱色效果,对比两种脱色工艺的优缺点。[方法]美洲大蠊脱脂膏用活性炭和大孔树脂脱色后,进行冷冻干燥得到固体脱色物,然后通过考察收得率、脱色率、蛋白保留率及脱色的操作过程,比较两种脱色工艺的有缺点。[结果]两种方法均能用于脱色。从收得率及蛋白保留率看,大孔树脂优于活性炭;从脱色率及操作过程看,活性炭脱色优于大孔树脂。[结论]该研究结果表明,若试验所需成分以蛋白为主,可采用大孔树脂脱色;若所需成分不是以蛋白为主,则可采用活性炭脱色。  相似文献