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3株分离自高寒草甸根际芽孢杆菌的分子鉴定及其生物活性 总被引：1，自引：0，他引：1
为青海省退化草地植被恢复、提高地上生物量筛选优良的生防芽孢杆菌菌源,采用16SrDNA及gyrB基因序列分析法,鉴定分离自青海省黄南州高寒草甸高山嵩草(Kobresia pygmaea)根围的3株芽孢杆菌菌株;平板对峙试验检测菌株拮抗病原真菌活性;菌悬液(细胞浓度为106 cfu·mL-1)浸种以检测菌株对植物催芽及促生效果;CMC、Gram染色法及DNS法检测菌株降解纤维素活性,并扩增菌株降解纤维素酶编码基因。结果表明,菌株HNC3被鉴定为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus),菌株HNC8、HNC11被鉴定为苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis);3株菌株对小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)、瓜类枯萎病菌(Fusarium oxysporum)具有明显的拮抗活性(抑菌圈平均直径均≥11mm);3株菌株对小麦(Triticum aestivum)种子具有明显的催芽及促生效果;小麦种子经菌株HNC3菌悬液处理后,芽长、根长增加率分别达55%、80%;菌株HNC3降解纤维素酶活高达367.51U·mL-1,并在该菌株中扩增到地衣聚糖酶(Lichenase,blg1S)、甘露糖苷酶(mannosidase,ManSig)、木聚糖酶(xylanase,xynD、xynB)4个纤维素酶编码基因。分离自青藏高原高寒草甸根围的3株芽孢杆菌兼具拮抗、催芽、促生及降解纤维素活性,在高原草地植被恢复、生态农牧业中具有一定的研究及应用潜力。 相似文献
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【目 的】从同株柑橘黄龙病罹病植株的不同显症部位内直接检测植物内生菌群落分布情况，为筛选出对柑橘黄龙病原菌（Ca. L. asiaticus）有相互作用的伴生菌奠定理论基础。【方 法】通过 QPCR方法对脐橙和蜜柚中Clas进行验证，并利用 16S rRNA 基因高通量测序技术对同一颗树上显症和不显症枝条叶片内生菌微生物群落的结构进行研究。【结 果】显症叶与不显症叶之间无特有的内生菌，黄龙病菌是决定植物组织是否显症的关键性因素。显症叶片与不显症叶片内生菌差异显著，显症叶片多样性降低。共有18个内生菌属是不显叶片的共同优势菌群，显症叶中较弱。其中，芽孢杆菌Bacillus与黄龙病菌CLas呈负相关，芽孢杆菌属鉴定出科氏芽孢杆菌 Bacillus cohnii，贝莱斯芽胞杆菌Bacillus_velezensis和大量未培养细菌。【结 论】同一罹病5年以上的柑橘黄龙病病株中，各部位所带病菌量不均匀，是否显症与组织内柑橘黄龙病菌CLas的量呈正相关，芽孢杆菌与黄龙病菌的量呈显著负相关。在韧皮部细胞内增殖过程中的相互作用具有深入研究的价值，下步实验可进行分离柑橘黄龙病植株内生芽孢杆菌，鉴定未培养的其他芽孢杆菌种类。 相似文献
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摘要：为明确抗嘧菌酯柑橘链格孢褐斑病菌在我国的分布、频率、抗性水平和抗性分子机制，本文从重庆、湖南、浙江、云南、广东和广西等有链格孢褐斑病发生的地区收集了54个链格孢褐斑病菌(Alternaria alternata)菌株，通过刃天青染料显色法测定菌株对嘧菌酯的敏感性，扩增、测序和比较嘧菌酯敏感和抗性菌株Cytb基因部分序列，探明我国柑橘链格孢褐斑病菌种群对杀菌剂嘧菌酯(azoxystrobin)的抗性现状和抗性分子机制。结果表明，嘧菌酯抗性菌系在各采样的果园菌存在，抗性频率达14～42%，平均为30%，抗性系数18～112。2个敏感菌株的Cytb 基因第143位氨基酸为甘氨酸，16个抗性菌株则为丙氨酸，由此推测Cytb基因143位氨基酸从甘氨酸突变为丙氨酸是褐斑病菌抗嘧菌酯的分子机制，这一结论与之前国外报道一致。抗嘧菌酯柑橘链格孢褐斑病菌群体在我国褐斑病发生地区的普遍存在，提醒我们在防治柑橘链格孢褐斑病时需谨慎选择QoI类杀菌剂。 相似文献
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一株桑树内生拮抗菌的分离鉴定 总被引：5，自引：2，他引：3
从经过严格表面消毒的桑树根、茎、叶中分离获得内生细菌76株。以金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)作为指示菌进行拮抗菌的筛选,其中5个分离株具有抑菌活性,复筛选出抑菌活性及热稳定性最强的G21菌株。进一步研究表明G21菌株对家蚕病原真菌球孢白僵菌(Beauveria bassiana)、绿僵菌(Metarhizium)均具有较强的拮抗作用。该菌株的形态及部分生理生化特征为:革兰阳性,杆状,产芽孢,接触酶阳性,好氧。16S rDNA序列分析表明该菌株与芽孢杆菌(Bacillus)的同源性达到99.8%。综合以上鉴定结果确定G21菌株为芽孢杆菌。 相似文献
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菠萝心腐病是危害菠萝生产的重要病害之一，近年来发生较严重，严重影响菠萝的产量和品质。本研究从海南乐东菠萝园、香蕉园等地的土壤中分离出224株细菌，其中分别属于枯草芽孢杆菌和链霉菌的HL2和HL3菌株对菠萝心腐病菌烟草疫霉(Phytophthora nicotianae)具有显著抑制效果。抑菌试验结果表明HL2和HL3对菠萝心腐病病菌菌丝生长的抑制率分别为71.6%、53.3%，对病菌产孢子囊的抑制率分别为83.3%、61.7%，拮抗菌培养过程中产生的挥发性抑菌物质能明显抑制病原菌菌丝的生长。 相似文献
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甘草内生真菌分离及其抑菌活性初探 总被引：1，自引：0，他引：1
为了解药用植物甘草(Glycyrrhiza uralensis)内生真菌资源多样性及其抑菌活性特征,通过组织块法对内生真菌进行分离,并选择小麦全蚀病菌（Gaeumannomyces graminis var.tritici）、枸杞黑果病菌（Colletotrichum gloeosporioides）、番茄灰霉病菌（Botrytis cinerea）、黄瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporium f.sp.cucumeris）、黄瓜立枯病菌（Rhizoctonia solani）5种植物病原真菌和枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）4种细菌作为供试指示菌,采用对峙法和改进的菌块法测定抑菌活性。试验结果显示,从甘草根、茎、叶中分离出20株内生真菌,其中根部最多,占分离菌株总数的65.0%,其次为茎部,叶部最少;经形态学初步分类鉴定归于2目2科5属,梭孢霉属为优势菌属,占分离菌株总数的70.0%;在分离的内生真菌中有15株菌对1种或1种以上供试植物病原真菌有不同程度的抑制作用,为分离内生真菌总数的75.0%,19株菌对1种或1种以上供试细菌有不同程度的抑制作用,为分离内生真菌总数的95.0%;有7株内生真菌对枯草芽孢杆菌拮抗活性差异显著（P＜0.05）,有 8株内生真菌对金黄色葡萄球菌拮抗活性差异显著,有3株内生真菌对大肠杆菌拮抗活性差异显著,有1株内生真菌对革兰氏阴性铜绿假单胞菌拮抗活性差异显著,其中菌株RLEFR015对番茄灰霉病菌、金黄色葡萄球菌拮抗活性差异显著,菌株RLEFR010对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌拮抗活性差异显著,菌株RLEFR002对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌供试细菌拮抗活性差异显著;菌株RLEFR015、RLEFR002、RLEFR010均为梭孢霉属,为高活性菌株。甘草内生真菌具有多样性和抑菌活性,多数菌株对供试病原真菌和病原细菌具有拮抗活性,对革兰氏阳性金黄色葡萄球菌和革兰氏阳性枯草芽孢杆菌拮抗活性较强,预示着甘草内生真菌具有重要的资源价值。 相似文献
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研究旨在评估三株枯草芽孢杆菌抑菌性能的差异。采用体外牛津杯试验，设4个处理组，以土霉素（对照组）为参照，按抑菌圈直径（DIZ）比较三株菌株处理组的枯草芽孢杆菌（菌株编号为D、B、G）对4类13个指示菌的抑制作用。结果显示：(1)对于肠道有害菌：菌株D、B对大肠杆菌K88和K99及鸡白痢沙门氏菌有抑制作用，且菌株D抑制效果均显著大于菌株B(P<0.05)；相反，菌株G对大肠杆菌K88和K99及鸡白痢沙门氏菌无抑制作用（不敏感）；菌株D、G对猪霍乱沙门氏菌的抑制作用为“不敏感”，菌株B为“敏感”；三个菌株对产气荚膜梭菌的抑制作用均达“高敏感”。(2)对于肠道有益菌，菌株B对罗伊氏乳酸杆菌的抑制作用达“高敏感”，菌株D为“敏感”，菌株G为“不敏感”。(3)对于饲料源有害菌，菌株B对金黄色葡萄球菌的抑制作用为“敏感”，菌株D、G为“不敏感”。(4)对于商业饲用益生菌，菌株B对凝结芽孢杆菌、丁酸梭菌、粪肠球菌、屎肠球菌、产朊假丝酵母的抑制作用均达“高敏感”，相反菌株G均为“不敏感”。以上结果提示，三株枯草芽孢杆菌抑菌性能有较大差异，且对其他商业饲用益生菌存在可能的颉颃效应。 相似文献
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桑树内生细菌的分离及生防益菌的筛选 总被引：7，自引：4，他引：3
对不同品种健康桑树植株组织中的内生细菌进行分离,共得到229个菌株。探讨了较合理的内生细菌分离纯化方法,对内生细菌数量进行了测定。结果表明,桑树根、茎、叶柄、叶片、花蕾等组织内均存在大量的内生细菌,且不同品种及组织中内生细菌的数量均存在差异。离体抑菌作用测定表明,229株桑树内生细菌中,有42株(18.3%)菌株对桑树炭疽病菌有拮抗作用,有25株(10.9%)菌株对桑粘格孢菌有拮抗作用;以上67株菌种又有8株菌株对多种病原真菌都有抑菌作用,表现出较强抑菌活性,具有作为生防菌的应用潜能。对8株内生拮抗菌株进行了细菌学鉴定,结果表明,菌株G21、G49、Y12和J26归属于芽孢杆菌属(Bacillussp.),G82和J50归属于假单孢菌属(Pseudom onas sp.),Y33归属于欧文氏菌属(Erwinia sp.),B19归属于短小杆菌属(Curtobacterium sp.)。 相似文献
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由核地杖菌(Scleromitrulashiraiana)等病原真菌引起的桑椹菌核病是一种毁灭性病害.木霉菌是重要的植物病害生防菌,获得对核地杖菌有拮抗作用的木霉菌进行生物防治具有重要意义.文章选取了从桑椹菌核病发病桑树根际土壤中获得的3株真菌为候选拮抗菌株,基于3个菌株的形态及分子生物学分类结果,分别将Ta-N11鉴定为棘孢木霉(Trichoderma asperellum),Th-N13和Th-N36鉴定为哈茨木霉(Trichoderma harzianum).3株拮抗菌发酵液对病原菌菌丝生长表现出有一定的抑制活性,其中拮抗菌Ta-N11对病原菌菌丝生长抑制率达52.2%.田间防效试验的初步结果表明,3株拮抗菌株发酵液喷施对桑椹菌核病具有一定的防治效果,其中拮抗菌株Ta-N11在2个示范点的病果率较清水对照组降低了约30个百分点.综上所述,棘孢木霉Ta-N11菌株对桑椹核地杖菌有较强的拮抗作用,具有一定的实用开发潜力. 相似文献
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为了筛选出柑橘轮斑病菌的有效防治药剂,采用菌丝生长速率法测定了29种杀菌剂对分离自重庆的WZ1菌株及分离自陕西的DS3菌株的抑制效果,结果表明,29种药剂中25%咪鲜胺悬浮剂、40%双胍三辛烷基苯磺酸盐可湿性粉剂、400g/L氟硅唑乳油、42%双胍.咪鲜胺可湿性粉剂4个药剂对WZ1、DS3菌株的抑制作用较强,EC50<0.1mg/L;7%苯醚甲环唑水分散粒剂、500g/L氟啶胺悬浮剂、430g/L戊唑醇悬浮剂等16种药剂的EC50<1mg/L,对WZ1、DS3菌株抑制作用强。WZ1菌株和DS3菌株对500g/L氟啶胺悬浮剂、10%抑霉唑水剂、80%代森锰锌可湿性粉剂、500g/L甲基硫菌灵悬浮剂、50%苯菌灵可湿性粉剂的敏感性差异较大,可能存在抗药性差异。其中柑橘轮斑病菌DS3菌株β-tubulin基因第200位氨基酸由苯丙氨酸突变为酪氨酸可能导致该菌株对甲基硫菌灵和苯菌灵等苯并咪唑类药剂产生抗药性。本研究为柑橘轮斑病的田间防治提供了药剂选择,为柑橘轮斑病抗性菌株的快速分子检测方法提供参考。 相似文献
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番茄细菌性叶斑病菌的拮抗菌筛选、鉴定及其拮抗性能评价 总被引：5，自引：0，他引：5
采用含菌平板抑菌圈测定法,从120株高寒草地牧草内生细菌中分离筛选到一株对番茄细菌性叶斑病拮抗能力较强的菌株264ZY7,其抑菌圈直径为1.22 cm。264ZY7菌体短杆状,大小为1.534 μm×0.571 μm~3.210 μm×0.781 μm,革兰氏阳性菌,根据形态特征,并结合16S rDNA和gyrB基因序列相似性分析,将菌株264ZY7鉴定为解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens。通过室内盆栽防效试验,结果表明该菌株对番茄细菌性叶斑病的防效达69%,此外,该菌株对8种病原真菌具有抑菌能力,说明抑菌谱较宽,且抑菌率均大于30%,对番瓜根腐病菌(Fusarium sp.)效果最明显,抑菌率为52.84%。该研究结果为高寒草地紫花针茅内生细菌264ZY47的进一步开发利用提供了依据。 相似文献
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植物根际促生菌对两种真菌病害病原的抑制作用及其鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
利用钼蓝比色法、乙炔还原法和高效液相色谱法分别测定了分离自5种植物根际的19株细菌溶磷、固氮和分泌生长素特性;用平板对峙生长法测定了19株细菌对黄瓜枯萎病菌和小麦根腐病菌的抑制作用;结合菌株形态、生理生化反应,利用分子生物学方法鉴定了其中8株优良细菌。结果表明,菌株Bacillus subtilis LM4-3固氮酶活性较高[244.88 nmol C2H4/(mL·h)];菌株B. subtilis LHS11-1溶磷能力较强(205.77 mg/L);菌株PGRS-3分泌IAA能力较好(40.78 μg/mL)。5株菌株能够有效拮抗黄瓜枯萎病菌,其中B. subtilis FX2-1抑菌活性较强(活菌抑制率69.07%,发酵液抑制率51.73%)。7株菌株能够有效拮抗小麦根腐病菌,其中B. subtilis FX2-1抑菌活性较强(活菌抑制率 78.17%),B. subtilis LHS11-1发酵液抑制率高达81.52%。其他具有较好促生或拮抗上述两种病原真菌的菌株经鉴定,分别属于蜡样芽孢杆菌(B. cereus,菌株XX1)、短小芽孢杆菌(B. pumilus,菌株F1-4和LX22)、简单芽孢杆菌(B. simplex,菌株XX6)和荧光假单胞杆菌(Pseudomonas fluorescens,菌株XX5)。 相似文献
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红豆草壳二孢叶斑黑茎病(Ascochyta onobrychidis)是红豆草(Onobrychis viciaefolia)最重要的病害之一,在分离此病菌的同时得到一种对此病菌具有较强抑制作用的微生物,为评价此拮抗菌的开发利用前景,本研究采用形态学、分子生物学和生物化学方法鉴定了其分类地位,并测定了其对红豆草壳二孢的抑菌效果。通过构建系统发育树并结合其形态特征和生理生化特性,将该拮抗菌鉴定为微白黄链霉菌(Streptomyces albidoflavu),在高氏一号培养基上菌落为黄白色,可产生黄白色水溶性色素,孢子丝钩状,顶端螺旋形;在平板对峙试验中该菌的菌落对红豆草壳二孢菌落的相对抑制率达74.33%,同时该菌发酵液对红豆草壳二孢菌丝生长和孢子萌发的抑制率分别为80.95%和93.87%。该菌具有生物防治红豆草壳二孢的开发和利用价值。 相似文献
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Gomółka-Pawlicka M Uradziński J Wiszniewska A 《Polish journal of veterinary sciences》2004,7(4):251-259
The present study was aimed at determining the influence of 15 strains of lactic acid bacteria on the growth of 2 Staphylococcus aureus strains in vitro as well as in meat and raw sausages. The investigations were performed within the framework of three alternate stages which differed in respect to the products studied, the number of Lactobacillus sp. strains and, partly, methodological approach. The study also considered water activity (a(w)) and pH of the products investigated. The results obtained are demonstrated in 5 diagrams. It was found that among 15 strains of Lactobacillus aureus investigated only one strain, Lactobacillus helveticus T 78, showed antagonistic effect on studied strains of Staphylococcus aureus both in vitro as well as in meat and raw sausages. Five other strains of Lactobacillus spp. displayed the antagonistic effect in vitro only. The temperature and incubation time of sausages, but also the type of sausage stuffing were found to have a distinct or slight influence, respectively, on the antagonistic interaction between the bacteria. However, this phenomenon was affected by neither a(w) nor pH. 相似文献
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Comparison of bacteriologic culture of blood and necropsy specimens for determining the cause of foal septicemia: 47 cases (1978-1987) 总被引：1，自引：0，他引：1
W D Wilson J E Madigan 《Journal of the American Veterinary Medical Association》1989,195(12):1759-1763
Diagnosis of bacterial septicemia was confirmed by results of bacteriologic culture of antemortem blood samples and/or necropsy specimens obtained from 47 foals up to 8 days old. Gram-negative bacteria were isolated from all 47 foals, and mixed infections with more than one organism were involved in 26 (55%). Escherichia coli, Actinobacillus spp, and Klebsiella pneumoniae were the most frequent isolates, infecting 55, 34, and 23% of foals, respectively. Gram-positive bacteria and anaerobic bacteria were isolated only from foals with mixed infections with gram-negative organisms. Clostridium perfringens was the only anaerobe isolated. In 38 (81%) of 47 foals with confirmed septicemia, blood samples were culture-positive. Thirty-two septicemic foals subsequently died, allowing a comparison to be made between the species of bacteria isolated by culture of blood with those recovered by culture of internal organs at necropsy. Blood failed to yield any gram-negative organisms in 12 (37.5%) of 32 foals from which a gram-negative pathogen was isolated at necropsy. Forty-three percent of the gram-negative bacteria, including 59% of the E coli, and 10% of the gram-positive bacteria found in septicemic foals at necropsy were not detected earlier by results of bacteriologic culture of blood. 相似文献
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XU Li-pu WANG Jing-bo ZHANG Wen WANG Xiao-liang CAO Huan WANG Shu PAN Yong JIANG Yu-lin 《中国畜牧兽医》2015,42(6):1592-1596
A chronic and infective disease occurred on the farmed Chinook salmon (Oncorhynchus tshaivytscha) in a farm in Huairou district of Beijing and it caused high accumulative mortality.The typical clinical symptoms indicated that it might be bacterial kidney disease (BKD).The purpose of this study was to confirm its pathogen.The typical clinical symptoms of sick fish,morphology observation of bacteria in kidney tissue smears and sequence analysis of bacteria DNA were conducted.A number of gram positive brevi bacteria were observed in kidney tissue print.16S rDNA sequence of K1 strain was more than 99% homology with that of Renibacterium salmoninarum and they were in the same cluster.383 and 320 bp fragment were amplified by PCR and nested PCR.The fragments were sequenced and analyzed.The results showed the fragment was shared 100% nucleotide identity with P57 surface protein gene of Renibacterium salmoninarum. It was indicated that these diseased fish were suffering from BKD caused by Renibacterium salmoninarum.This was the first report about Renibacterium salmoninarum detected in farmed fish in China. 相似文献
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北京怀柔某养殖场的大鳞大麻哈鱼发生一种慢性,但累计死亡率很高的流行病,为研究大鳞大麻哈鱼感染病原菌的种类,本试验根据病鱼临床症状观察判断疑似感染鲑肾杆菌.试验对病鱼肾脏组织进行印片染色观察细菌形态特征,抽提病鱼的肝脏、肾脏组织DNA,扩增16S rDNA和鲑肾杆菌P57表面蛋白基因片段,测序并运用BLAST进行同源性比对.结果显示,病鱼肾脏组织印片在显微镜下可见大量形态一致的革兰氏阳性短杆菌;采用病鱼肝脏、肾脏组织扩增的16S rDNA基因构建的系统发育树显示与鲑肾杆菌聚为一支;通过PCR扩增出鲑肾杆菌P57表面蛋白基因DNA片段,测序结果与鲑肾杆菌标准株ATCC 33209完全一致,符合率为100%.结果表明病鱼感染鲑肾杆菌并引发细菌性肾病(BKD).这是中国首次在养殖鱼体内检出鲑肾杆菌. 相似文献