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为了解产蛋鸡对犬瘟热病毒杭原的免疫反应及其血清抗体和卵黄抗体的消长规律及相关性,为制备卵黄抗体提供依据,将犬瘟热病毒接种Vero细胞和DF1细胞进行传代并测定其病毒滴度,选取细胞病变出现早,病毒滴度高的Vero细胞毒作为接种病毒抗原免疫蛋鸡。通过每10d进行蛋鸡免疫一次,四免后每30d加强免疫一次的方法进行免疫。免疫前和免疫后每10d采血分离血清和每5d收集鸡蛋提取卵黄抗体,用琼脂扩散法和间接ELISA法测定其抗体水平。结果显示,血清抗体比卵黄抗体的滴度高,两者间呈正相关性,卵黄抗体出现较血清抗体迟3～5d,卵黄抗体在三免后3～5d就已达到较高水平,此时即可开始收集鸡蛋制备卵黄抗体。 相似文献
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试验旨在了解产蛋鸡对犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)抗原的免疫反应及其血清抗体和卵黄抗体的消长规律,为制备卵黄抗体提供依据。将CDV接种Vero细胞和DF1细胞进行传代并测定其病毒滴度,选取细胞病变出现早、病毒滴度高的Vero细胞毒作为接种病毒抗原免疫蛋鸡。每10 d免疫蛋鸡1次,第4次免疫后每30 d加强免疫1次。免疫前及免疫后每10 d采血分离血清,每5 d收集鸡蛋提取卵黄抗体,用琼脂扩散法和间接ELISA法测定其抗体水平。结果显示,血清抗体比卵黄抗体的滴度高,两者呈正相关性,卵黄抗体出现较血清抗体迟3~5 d,卵黄抗体在第3次免疫后3~5 d就已达到较高水平,此时即可开始收集鸡蛋制备卵黄抗体。 相似文献
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为了评价商品蛋鸡免疫新城疫和禽流感疫苗后卵黄抗体替代血清抗体检测时卵黄的最适处理条件,试验采用经新城疫和禽流感疫苗免疫后40天产蛋率在90%以上的健康商品蛋鸡(海兰褐)56只,采血取血清,每只鸡取1枚鸡蛋分离卵黄,采用完全随机分组试验设计,随机分4组,分别为试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组及对照组,每组56个重复,每个重复1份血清和1份相应卵黄。对照组为血清抗体检测,试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组分别用生理盐水1∶1倍稀释卵黄、生理盐水1∶3倍稀释卵黄和三氯甲烷1∶3倍稀释卵黄,利用血凝抑制(HI)试验进行血清和处理后卵黄抗体检测。结果表明:检测卵黄中新城疫病毒和禽流感病毒H9抗体时使用生理盐水1∶3稀释卵黄,检测卵黄中禽流感病毒H7、禽流感病毒H5-11和禽流感病毒H5-12抗体时使用生理盐水1∶1稀释卵黄,处理后卵黄抗体效价与血清抗体效价均差异不显著(P>0.05),与血清抗体效价相关系数分别为0.837,0.853,0.888,0.888,0.839。说明在对卵黄进行适宜条件处理后,可以用卵黄抗体代替血清抗体评价商品蛋鸡抗体水平。 相似文献
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《畜牧与兽医》2017,(11):75-81
为了研究牛支原体P48抗原蛋白的免疫学功能及相应卵黄抗体的生物学特性,探究其抗体效价随免疫时间的变化规律,试验采用牛支原体P48蛋白疫苗免疫健康产蛋母鸡,定时采血并收集鸡蛋,用水稀释法结合硫酸铵盐析法制备特异性卵黄抗体,利用间接ELISA法检测血清抗体(IgG)和卵黄抗体(IgY)效价。结果表明,低、中、高剂量组均能诱导蛋鸡产生有效免疫应答,血清抗体效价与卵黄抗体效价的变化趋势基本一致,但卵黄抗体的产生滞后于血清抗体,在首次免疫后8~10周Ig Y效价达到峰值,其中中剂量组的免疫效价最高,最高效价为1:212。经SDS-PAGE检测,制备所得的纯度达86%以上,得率在8.6 mg/m L以上。说明采用牛支原体P48蛋白免疫蛋鸡可制备高效价、高纯度的抗牛支原体P48蛋白卵黄抗体,从而为卵黄抗体在牛支原体的检测与防控方面的研究奠定了基础。 相似文献
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为分析蛋鸡免疫后卵黄抗体与血清抗体的相关性,试验采集经H5、H9亚型禽流感和新城疫疫苗免疫的黔东南小香鸡、乌蒙乌骨鸡、威宁鸡血清样本和卵黄样本,采用血凝抑制试验进行相关免疫抗体检测。结果:3个地方品种鸡的血清样本和卵黄样本中均可检测出H5、H9亚型禽流感和新城疫免疫抗体,且几何平均效价均大于24以上,达到免疫合格标准,不同地方品种鸡群间差异不显著(P>0.05);免疫后30d,卵黄样本免疫抗体几何平均效价低于血清样本,但差异不显著(P>0.05);免疫后60d,卵黄样本免疫抗体几何平均效价低于血清样本,差异显著(P<0.05)。结果表明:卵黄抗体与血清抗体呈正相关性,卵黄抗体几何平均效价均低于血清抗体。在临床上可用卵黄抗体替代血清抗体进行H5、H9亚型禽流感和新城疫疫苗免疫效果的评价,但应选择在免疫后30d以内。 相似文献
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禽流感血清抗体与卵黄抗体消长规律比较研究 总被引：2，自引：2，他引：2
应用禽流感病毒二价（H5、H9）油乳剂灭活疫苗免疫160日龄非免疫蛋鸡，免疫接种后分别于第0、7、14、21、28、35 d采集相应的鸡蛋和血清，采用血凝抑制(HI)试验监测血清及卵黄中H5、H9抗体的消长规律，结果表明：H5、H9血清抗体于免疫后7 d时开始产生，14 d时到中等水平，21 d时达到最高值，一直维持到35 d之后；而H5、H9卵黄抗体与血清抗体水平相比相对滞后7 d左右；卵黄抗体与血清抗体在28 d时均达到高峰值并一直维持到35 d之后，28 d后血清和卵黄抗体达到相同水平。本研究为临床上以禽流感卵黄抗体检测替代血清抗体检测及以后禽流感高免卵黄抗体的研究提供了依据和数据。 相似文献
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鸡传染性法氏囊病的血清琼脂扩散试验,虽然比较简易,检出率较高,但由于需要采血,故而对鸡产生应激反应,影响母鸡产蛋,造成经济损失。为此,根据鸡传染性法氏囊病(IBD)抗体能从输卵管上皮层分泌滤泡分泌到卵黄内,从而传递给子代雏鸡的原理,用卵黄琼扩试验监测鸡IBD卵黄抗体水平。一、材料和方法1、鸡IBD弱毒疫苗和灭活疫苗:由英特威公司提供。2、鸡IBD琼扩抗原及阳性血清:由哈尔滨兽医研究所提供。3、试验用种卵和血清:来自上海市华申曾祖代蛋鸡场罗曼曾祖代三世代测定群母鸡。该群鸡于16日龄、23日龄曾用鸡IBD.D_(78)弱毒疫苗饮水免疫各一次,18周龄时用IBD IB ND三联灭活油苗肌注免疫。于注苗后5个半月取种卵,并于产蛋后2小时对种鸡分别对号静脉采血,分离血清。4、卵黄稀释液:配制8%枸橼酸钠溶液、16%氯化钠溶液和0.15mol/L.PBS液。 相似文献
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对免疫蛋禽血清和卵黄中的H5亚型高致病性禽流感抗体进行监测,比较血清和卵黄中HI效价的差异并找出其相关性.试验结果表明,蛋鸡和蛋鸭接种H5亚型高致病性禽流感疫苗后,在抗体的上升期,血清和卵黄HI效价差异显著或极显著(0.01＜P＜0.05,P＜0.01);而在抗体稳定期,血清和卵黄HI效价差异不显著(P＞0.05).在抗体稳定期,血清和卵黄抗体水平之间的相关系数都在0.85以上,(0.66＜r＜1.00),呈强直线相关.试验证明,无论是蛋鸡还是蛋鸭在抗体稳定期内均可以使用卵黄替代血清进行HI抗体监测. 相似文献
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《中国家禽》2017,(12)
研究采用重组酵母乙肝疫苗免疫蛋鸡,探索特异性卵黄免疫球蛋白(IgY)的产生和变化规律。产蛋母鸡经免疫后每周收集所产蛋,分别提取IgY,测定血清抗体效价与抗体的产生量,ELISA定期检测卵黄中的抗体效价变化,Western blotting检测总IgY含量。以未免疫鸡IgY作阴性对照,作血清抗体与IgY变化的动态曲线。取三次免疫后的蛋鸡,解剖分离出各级卵泡,观察各级卵泡发育程度。ELISA结果显示:随着卵泡的生长,卵泡细胞分泌的IgY聚集到卵泡卵黄,卵泡卵黄中IgY的含量在逐渐增加。Western blotting显示:随免疫次数的增加,IgY含量增加。首免后第3天血清抗体被检出,以后逐渐上升,2周后达到高峰,维持到第8周后逐渐下降,到第15周仍可检出抗体。本研究表明:用重组酵母乙肝疫苗免疫蛋鸡,卵黄和鸡血清中可持久保持高效价的特异性抗体,血液中的抗体传递到卵黄需要一定时间,卵黄IgY动态变化规律与血清抗体基本一致。 相似文献
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张皓淳 《国外畜牧学(猪与禽)》2022,42(1):32-36
为了制备非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)p30蛋白卵黄抗体,研究卵黄抗体的生物活性。试验构建了p ET-32a-p30原核表达载体,制定了科学的免疫程序和样本采集方法。提取卵黄液,进行二次盐析,得到对应的卵黄抗体。用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)测定卵黄抗体效价,用免疫印迹（Westernblotting）技术对其生物活性进行鉴定。ELISA试验表明：首次免疫p30蛋白7d后,能够在蛋鸡的血清中检测出抗体（Ig Y）,14d后在卵黄中能够提取到Ig Y,35d后Ig Y效价达到最高值。IgY具备和哺乳动物产生的IgY不同的生物活性,并可具有较高的特异性和稳定性,在免疫学研究中具有重要的价值。利用Ig Y进行实验检测,具有突出优势。通过抗原即ASFV p30蛋白免疫蛋鸡,分离提纯免疫蛋白,检测其生物活性,可用于鉴定非洲猪瘟。 相似文献
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抗猪大肠杆菌卵黄抗体变化规律及在体外对大肠杆菌生长的影响 总被引：4，自引：0，他引：4
试验研究抗猪大肠杆菌卵黄抗体变化规律及在体外对大肠杆菌生长和对肠黏膜细胞上粘附的影响。试验选用 30周龄海兰褐壳蛋鸡 2 4 0只 ,试验时间 80d。以K88、K99和 987P 3种大肠杆菌混合液为免疫原 ,免疫原中K88、K99和 987P的细菌数分别为 2 .5× 10 9、2 .5× 10 9、2 .5× 10 10 CFU/mL。免疫剂量为 0 .5、1.0、1.5、2 .0mL/只 ,在试验鸡胸腹部肌肉、分多点注射 (每点约 0 .2mL) ,每个免疫剂量免疫健康蛋鸡 5 0只 ,4 0只蛋鸡作对照 ,以个体为单位 ,每天收集鸡蛋 ,4℃保存。在每次免疫 5d后 ,翅静脉采血、分离血清 ,- 2 0℃保存。用盐析法和冷冻干燥法制备抗猪大肠杆菌卵黄抗体粉 ,配制不同蛋白含量的卵黄抗体溶液 ,用体外法研究卵黄抗体对大肠杆菌生长及对肠黏膜细胞粘附的影响。试验结果表明 :最佳免疫剂量为 1.0mL/只 ,卵黄与血清中的抗体水平没有差异 ;在大肠杆菌培养液中 ,添加蛋白含量为 0 .5mg/mL抗猪大肠杆菌卵黄抗体溶液时 ,大肠杆菌的生长受到抑制 (P <0 .0 5 ) ,不同卵黄抗体间没有交叉反应 ;蛋白含量为 0 .2 5mg/mL的抗猪大肠杆菌卵黄抗体溶液对大肠杆菌在肠黏膜细胞上的粘附有抑制作用 (P <0 .0 5 )。 相似文献
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通过自制并初步纯化牛乳铁蛋白的卵黄抗体,用肌肉和皮下注射结合的方法罗曼蛋鸡进行免疫来制备多克隆抗体。选用150日龄的罗曼蛋鸡4只进行不同浓度的多次皮下免疫注射,采集卵黄抗体并用硫酸铵沉淀法进行抗体的初步纯化,经四次免疫后的罗曼蛋鸡卵黄抗体的效价分别达到了1：32000和1：24000,并在较高水平的情况下维持两周以上,同时经初步纯化后抗体纯度得到了很大提高。试验结果显示肌肉和皮下注射结合的方法对罗曼蛋鸡进行免疫来制备多克隆抗体是可行的,同时通过硫酸铵沉淀法纯化抗体可以达到试验的需求。 相似文献
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从浙江省10多个规模化猪场采集仔猪断奶腹泻病料,分离致病性大肠杆菌。血清学和PCR方法鉴定菌毛型主要为F4和F18。挑取1株致病性和菌毛表达较强的F4阳性菌株,接种改良M inca培养基培养,热抽提法分离菌毛并纯化菌毛蛋白。将50只蛋鸡随机分5组,分别肌注1 mL免疫原/只:A组菌毛蛋白(250μg/只),B、C和D组菌毛蛋白(250,50,10μg/只) 弗氏佐剂,E组为空白对照。21 d加强免疫。定期采血分离血清,水稀释法和饱和硫酸铵盐析法分离卵黄抗体。ELISA法检测血清和卵黄抗体效价。结果表明,F4菌毛蛋白具有良好的免疫原性:在弗氏佐剂的辅助下,二免后21 d抗体效价达最高峰,血清和卵黄抗体效价分别为4.7 lg和4.4 lg,二免后56 d血清和卵黄抗体效价仍维持在4.0 lg;另外二免后21 d,10μg/只免疫剂量与50μg/只及250μg/只相比,诱导产生的卵黄抗体效价之间差异不显著(P>0.05)。 相似文献
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在制备IBD和ND二联卵黄抗体以及在计划鸡群的IBD和ND免疫程序时,都需要对鸡体内的IBD及ND抗体水平进行监测。通过对一群鸡按一定免疫程序高免IBD疫苗和ND疫苗后,利用鸡所产鸡蛋卵黄液和相对应鸡的血清测定IBD琼扩(AGP)抗体效价和ND凝集抑制(HI)抗体效价的对比试验认为:用卵黄液测定的抗体效价与用鸡血清测定的抗体效价呈一致关系,完全可用鸡蛋卵黄液代替鸡血清进行鸡体内IBD和ND抗体水平的监测。现将试验结果报告如下: 相似文献
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鸡IBD高免卵黄抗体不同使用途径的效果研究 总被引：2，自引：0，他引：2
为了探讨鸡ＩＢＤ高免卵黄抗体以什么样的途径使用效果最好,而以４０日龄商品代伊沙褐壳蛋鸡进行了试验,血清抗体效价测定结果表明,卵黄抗体以肌肉注射和皮下注射效果较好,口服基本上无效。 相似文献
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卵黄抗体(IgY)是蛋鸡受特定抗原刺激后体内产生的特异性并被转移和贮存在卵黄中的免疫球蛋白。用鸡卵黄大量生产和制备多克隆抗体是近年来抗体制备技术中新兴的研究领域。介绍了IgY的结构和进入卵黄的机制,综述了免疫鸡卵黄抗体在猪生产中的应用及其制备技术的研究进展。 相似文献