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采用网箱集团接种结合玻管定苗定虫接种技术，测定比较了中菲栽培稻的８１个品种和野生稻的３个种，对两国水稻东格鲁病和水稻草状矮化病的病原病毒及其介体的抗性，筛选出了能同时抗水稻东格鲁球状病毒（ＲＴＳＶ）、水稻东格鲁杆状病毒（ＲＴＢＶ）和水稻草状矮化状病毒（ＲＧＳＶ）的３个株系以上的多抗性抗源─中山红无名种、Ｏｒｙｚａｎｉｖａｒａ和Ｏ．ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ，高抗这些病毒两个株系以上的多抗性品种─汕优桂３３、金早６号、ＨＢ４３７、Ｐａｎｋｈａｒｉ２０３、ＩＲ２８、ＩＲ５８和赤块矮选．高抗ＲＴＳＶ、ＲＴＢＶ介体黑尾叶蝉的品种─ＩＲ２８、ＧａｍＰａｉ３０１２－１５和Ｐａｎｋｈａｒｉ２０３，高抗ＲＧＳＶ介体褐飞虱的品种─ＩＲ２８和ＩＲ６４． 相似文献
2.
采用网箱集团接结合玻管定苗定虫的接种技术，测定比较了中菲栽培稻的８１个品种和野生稻的３个种，对两国水稻东格鲁病和水稻草状矮化病的病原病毒及其介体的抗性，筛选出了同时抗水稻东格鲁球状病毒（ＲＴＳＶ），水稻东格鲁杆状病毒（ＲＴＢＶ）和水稻草状矮化状病毒（ＲＧＳＶ）的３上株系以上的多抗性抗源－中山红无名种，Ｏｒｙｚａｎｉｖａｒａ和Ｏ．ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ，高抗这些病毒两个株系以上的多抗性品种─汕优桂３ 相似文献
3.
聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测水稻病毒侵染株内水稻东格鲁杆状病毒的灵敏度是酶联免疫吸附试验法（ＥＬＩＳＡ）的１０＾３～１０＾４倍。由于ＰＣＲ有更高检查灵敏度，它能检测单头二点黑尾叶蝉（Ｎｅｐｈｏｔｅｔｔｉｘｖｉｒｅｓｃｅｎｓ）体内的水稻东格鲁杆状病毒（ＰＴＢＶ），二点黑尾叶蝉是ＰＴＢＶ的半持久性传播介体，而用ＥＬＩＳＡ检测是不成功的，为了评价水稻品种对ＲＴＢＶ的抗性，在ＵｔｒｉＭｅｒａｈＵｔｒｉＲａｊ 相似文献
4.
水稻东格鲁病是由水稻东格鲁杆状病毒 ( RTBV)和水稻东格鲁球状病毒 ( RTSV)复合感染引起的 .RTBV是一种杆状外型的植物副反转录病毒 ;而 RTSV则是一种单链 RNA病毒 .RTSV对 RTBV的传播起帮助作用 .本文综述了水稻东格鲁病毒的生物学和分子生物学特性的研究进展 . 相似文献
5.
转基因水稻对水稻齿叶矮缩病毒（RRSV）抗生评价 总被引：1，自引：0，他引：1
采用人工繁殖带毒褐飞虱（Ｎｅｌａｐａｒｖａｔａ Ｌｕｇｅｎｓ）攻妆种，结合症状观察和ＲＴ－ＰＣＲ检测方法，对５７个含有水稻齿叶矮缩病毒（ＲＲＳＶ）Ｓ７，Ｓ９和Ｓ１０基因片段的转基因水稻对水稻齿叶矮缩病毒的抗生进行评价。总体而言，大多数转基因稻发病率比受体品的发病率要低。从中初步得到对ＲＲＳＶ具有较强抗生的水稻转基因第３１５和３１６，其发病率分别为１５．８％和１３．３％，具有中等抗生的水稻转基因系１ 相似文献
6.
禽传染性支气管炎病毒免疫原基因的PCR获取及其酶切鉴定 总被引：3，自引：1，他引：3
分绍用ＲＴ－ＰＣＲ（反转录－聚合酶链反应）获取禽传染性支气管炎病毒Ｍ４１株和广东地方致弱株Ｄ４１免疫原（Ｓ１）基因的详细方法，所用引物为ＩＢＶ Ｂｅａｕｄｅｔｔｅ株Ｓ１基因两侧的对应序列，跨幅为１．７ｋｂ，结果表明，两株病毒所获的ＰＣＲ产物与预期的一致；用此对引物，以ＩＢＶ Ｄ４１株Ｓ１基因ＰＣＲ产物为模板，扩增出一样的ＤＮＡ片段，试验还显示，国内外几家公司有关ＲＴ和ＰＣＲ的分子生物学试剂可以兼用 相似文献
7.
采用ＲＴ－ＰＣＲ技术，利用２对此物，从猪瘟病毒（ＣＳＦＶ）强毒石门株感染的猪血中成功扩增了ＮＳ４Ｂ基因，片段大小分别为７５７ｂｐ和７７４ｂｐ。克隆后经酶切鉴定，自动测序和序列分析，结果显示该基因较保守，与其他猪瘟病毒毒株均有很同的同源性，与同 ＢＶＤＶＳＤ－１株和ＮＡＤＬ株也有较高的同源性。 相似文献
8.
RT-PCR和Digoxigenin标记的核酸探针检测鸡传染性支气管炎病毒试验研究 总被引：1，自引：0，他引：1
用２对已发表的引物和１对自行设计的引物对同一ＩＢＶＨ１２０株进行ＲＴ－ＰＣＲ，分别获得了Ｓ１基因上与引物设计相一致的１７２０ｂｐ，２２８ｂｐ，６０２ｂｐ，的扩增片段。用自行设计的引物对７个毒株（Ｈ１２０，Ｈ５２，Ｍ４１，Ｃｏｎｎ，Ｇｒａｙ，Ｔ，Ｈｏｌｔｅ）和５个分离株（宜毒，上毒，云毒，ＨＫ，１１８）的含毒尿囊液或纯化病毒进行ＲＴ－ＰＣＲ。结果除Ｈｏｌｔｅ株，２个分离株（宜毒，云毒）外，其余均被成功地扩增出６０２ｂｐ的片段。将ＩＢＶＨ１２０株０６ｋｂＰＣＲ产物用Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记为探针，分别与上述各ＩＢＶ毒株的核酸及其扩增产物进行核酸杂交，均呈现阳性反应，而该探针不与ＩＢＤＶ和ＮＤＶ的ＤＮＡ，ＥＤＳ－７６病毒的ＤＮＡ及正常鸡胚尿囊液抽提物反应。ＲＴ－ＰＣＲ和核酸杂交技术提供了直接从尿囊液中快速检测出病毒，作为诊断ＩＢＶ的新方法。 相似文献
9.
水稻簇矮病毒：植物呼肠孤病毒属的一个新成员 总被引：1，自引：0，他引：1
水稻簇矮病毒（ＲＢＳＶ）是由黑尾叶蝉（Ｎｅｐｈｏｔｅｔｉｘｃｉｎｃｔｉｃｅｐｓ）和二点黑尾叶蝉（Ｎ．ｖｉｒｅｓｃｅｎｓ）传播的持久性病毒，但不经卵传递；病害表现有奇特的多蘖症或节枝症，且其病株汁液与水稻矮缩病毒（ＲＤＶ）抗血清不起免疫反应．采用差速离心和蔗糖密度梯度离心，可获得ＲＢＳＶ提纯制剂，提纯制剂经紫外扫描，呈典型的核蛋白吸收曲线，Ａ２６０／２８０＝１．６４．在电镜下观察提纯病毒，可见大量比较均一的球状粒体，直径为６０．０ｎｍ．病毒粒体有双层衣壳，蛋白亚基清晰可辨．通过免疫扩散和免疫电镜试验，病毒粒体与ＲＢＳＶ抗血清有明显的血清学反应，而这种抗血清与ＲＤＶ、水稻瘤矮病毒（ＲＧＤＶ）不起反应．提纯ＲＢＳＶ制剂以苯酚－甲基苯酚－ＳＤＳ方法提取核酸．将其注射到昆虫介体内，具有侵染性．核酸制品有典型的核酸紫外吸收曲线，Ａ２６０／２８０＝２．０２．根据核酸在不同离子强度下对ＲＮａｓｅ的稳定性等的测定，表明其核酸属双链ＲＮＡ．根据紫外吸收测定，ＲＮＡ在ＲＢＳＶ粒体中的含量为１７．５％．用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定，其ＲＮＡ的总分子质量为１６．６６×１０６．各组分相对分子质量分别为２．７０×１０６、２．３０×１０６、１? 相似文献
10.
采用ＲＴ－ＰＣＲ技术,利用２对引物,从猪瘟病毒（ＣＳＦＶ）强毒石门株感染的猪血中成功扩增了ＮＳ４Ｂ基因,片段大小分别为７５７ｂｐ和７７４ｂｐ。克隆后经酶切鉴定,自动测序和序列分析,结果显示该基因较为保守,与其他猪瘟病毒毒株均有很高的同源性,与同属的ＢＶＤＶＳＤ－１株和ＮＡＤＬ株也有较高的同源性。 相似文献
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描述了土传小麦花叶病毒（ｓｏｉｌ－ｂｏｒｎｅ ｗｈｅａｔ ｍｏｓａｉｃ ｖｉｒｕｓ,ＳＢＷＭＶ）的基因组结构,并将之与一些植物病毒作比较。发现重复摩擦接种或在高温下（２５￣３０℃）培养引起的ＳＢＷＭＶ部分ＲＮＡ２序列迅速缺失。在最初几次重复摩擦接种后,小麦病株存在野生型ＳＢＷＭＶ ＲＮＡ２和几个不同大小的外壳蛋白通读（ＣＰ－ＲＴ）基因的缺失突变体。在以后的几次重复摩擦接种后,一个缺失突变体成为占优 相似文献
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水稻齿裂矮缩病毒（ＲｉｃｅＲａｇｇｅｄＳｔｕｎｔＶｉｒｕｓ,以下简称ＲＲＳＶ）是７０年代末新发现的一种植物呼肠孤病毒。主要流行于东南亚地区、日本和我国的福建、台湾等地,广东和江西也有此病发生的报道。已经查明,水稻ＲＲＳＶ颗粒呈二十面体对称结构,整个病毒直径约为７０ｎｍ,其中核心颗粒直径约５０ｍ,上面附着有２０ｎｍ宽、１０ｎｍ高的扁平突起（Ｓｐｉｋｅ）．ＲＲＳＶ基因组由１０条双链ＲＮＡ（Ｓ１－Ｓ１０）组成,其中Ｓ９片段全长１１３２ｂｐ,编码一个３３８个氨基酸残基的蛋白（ＰＳ９）．该蛋白为ＲＲＳＶ病… 相似文献
13.
传染性支气管炎病毒地方分离毒株S1基因的RT-PCR方法研究 总被引：2，自引：0，他引：2
以传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）标准毒株Ｍ４１为材料,根据Ｇｅｎｂａｎｋ公开序列自行全成一对特异引物,用于扩增ＩＢＶ的完整Ｓ１基因。建立了针对ＩＢＶ基因组ＲＮＡ特点的ＲＴ－ＰＣＲ方法。对反应体系中的重要反应物Ｍｇ＾２＋、ｄＮＴＰ和引物浓度进行优化,确定其浓度值分别为１．５ｍｍｏｌ／Ｌ,２００μｍｏｌ／Ｌ和４０μｍｏｌ／Ｌ。使用此反应体系对国内ＩＢＶ地方离毒株ＪＳ／９５／０３,ＳＤ／９７／０１等１０多 相似文献
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减蛋综合征病毒基因文库的构建 总被引：5，自引：0，他引：5
采用差速离心法纯化了鸭胚尿囊液中的减蛋综合征（ＥＤＳ－７６）ＷＰＤＶ２０５病毒并提取了病毒基因组核酸。选用ＥｃｏＲⅠ和ＢａｍＨⅠ两种限制性内切酶对病毒基因组ＤＮＡ进行双酶切处理，结果产生７个片段，在这７个片段中，只具有ＢａｍＨⅠ酶切位点的片段有２个，只具有ＥｃｏＲⅠ酶切位点的片段有３个，具有双酶切位点的片段有２个。将其中的５个片段分别插入到ｐＵＣ１８相应多克隆位点中，建立了ｐＥＤＳＶＢＥ１、ｐＥＤＳＶＢＥ２、ｐＥＤＳＶＢ１、ｐＥＤＳＶＢ２、ｐＥＤＳＶＥ５个重组子，并对这５个重组子进行了酶切鉴定 相似文献
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王明霞 《福建农业大学学报(自然科学版)》1996,25(1):56-60
利用狄高辛（ＤＩＧ）标记制备菊花矮化类病毒（ＣＳＶ）特异性探针，由反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）进行ＣＳＶ ＲＮＡ的反转录和ｃＤＮＡ的扩增，然后比较２种核酸杂交方法－微量板杂交和斑点杂交检测ＣＳＶ的灵敏度。本研究结果表明，３０ｍｇ干燥样本抽提的ＣＳＶ ＲＮＡ被稀释４００倍，取４μＬ（约７５０ｐｇ样本抽提的ＲＮＡ）经ＲＴ－ＰＣＲ，其产物再用１０×ＳＳＣ稀释１００倍，采用微量板杂交仍可很容易得到 相似文献
16.
参照了已表的ＩＢＶ Ｂｅａｕｄｅｔｔｅ株全基因组序列,自行设计合成了３和引物（ｙｏｕｌ＋、ｙｏｕ２－ｙｏｕＭ＋）,引物ｙｏｕ１＋和ｙｏｕ２－在Ｓ１基因两侧,跨幅约１６１０ｂｐ,引物ｙｏｕ２－和ｙｏｕＭ＋在Ｓ１基因的３’端,跨幅约５３０ｂｐ。用这两对引物对５个ＩＢＶ地方分离株（ＨＮ２,ＨＮ４,ＪＸ１,ＳＣ２和ＳＣ１）进行ＲＴ－ＰＣＲ,均成功地扩增出相应大小的目的片段。病毒在电镜下观察中以形态多变的冠状病毒粒子。 相似文献
17.
我国福建和湖南水稻东格鲁病的两个分离物--闽株2号和湘株1号,与菲律宾的菲株1号,在电镜下均能见到水稻东格鲁球状病毒（RTSV）粒体,直径为30-33nm,闽株2号和菲株1号尚能见到水稻东格鲁杆状病毒（RTBV）粒体,大小在（35×150）-280nm,而湘株1号则否;闽株2号和菲株1号,与RTSV和RTBV都有血清学关系,而湘株1号只与RTSV有关;3个分离株均能以黑尾叶蝉、二点黑尾叶蝉和电光叶蝉为其介体,并作半持久性传毒,但3种介体对3个分离株的亲和力、获毒时间、传毒时间及其在TN1和Sukanandi两个水稻品种上的反应特征都有不同;通过交叉接种,菲株1号和闽株2号不能侵染已被湘株1号侵染的植株。 相似文献
18.
用反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），从纯化的腺胃病变型鸡传染性支气管炎分离株病毒基因组ＲＮＡ扩增出约１．７ｋｂ的ＩＢＶＳ１基因。将该扩增产物于ＨｉｎｄⅢ和ＢａｍＨⅠ位点克隆到ｐＵＣ１８质粒载体中，对重组质粒载体进行酶切分析，得到与Ｓ１基因预期大小一致的插入片断。经Ｓ１探针Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测，表明插入片断为Ｓ１基因。利用该法筛选到４株阳性重组质粒转化子。 相似文献
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以切花品种“黄秀芳”菊花的顶、侧芽,经茎尖培养脱除烟草花叶病毒（ＴＭＶ）、黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）、马铃薯Ｘ病毒（ＰＶＸ）、马铃薯Ｙ病毒（ＰＶＹ）和番茄不孕病毒（ＴＡＶ）等５种病毒的试管苗为材料,探讨温度、光照强度和ＭＳ培养基中Ｂ９浓度、甘露醇浓度与蔗... 相似文献
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基因探针技术检测血清1型马立克氏病病毒的研究 总被引：3，自引：0，他引：3
选用马立克氏病病毒（ＭＤＶ）ＧＡ株ＢａｍＨＩ基因文库中ＬＤＮＡ片段，制成ＤＩＧ－标记的ＭＤＶ核酸探针，分别对Ｉ型ＭＤＶ强毒株（ＢＪ－１株）和弱毒株（Ｍｄ１１／７５ｃ株）感染材料的核酸进行ｄｏｔ ｂｌｏｔ杂交检测，结果显示均有阳性呈色反应；而对ＭＤＶ血清２型（ＳＢ－１株）、３型（Ｆｃ１２６株）及禽网状内皮组织增殖病病毒（ＲＥＶ）和淋巴细胞性白血病病毒（ＬＬＶ）感染细胞的核酸，作上述同样检测，则均未见 相似文献